Objetivo: Conocer las técnicas básicas para el análisis de fertilidad microbiana del suelo

1. PRÁCTICO N°4 Análisis de fertilidad de los suelos Objetivo: Conocer las técnicas básicas para el análisis de fertilidad microbiana del suelo • Técnicas mas utilizadas • Abundancia de microorganismos • Biomasa total • Determinación de grupos funcionales (fijadores de nitrógeno, celulolíticos, nitrificadores, amonificadores, etc.) • Actividad microbiana • Heterótrofa total (producción de CO2, consumo de O2) • Enzimas especificas (nitrogenasa, sacarasa, ureasa, amilasa)

2. Producción de CO2 en laboratorio: Preparación de muestras 20 g suelo 15 ml OHNa 300-400 cc 300-400 cc Muestra Blanco INCUBAR 7 DIAS Reacción química que se producen durante incubación: CO2 + 2 OHNa CO3Na2 + H2O

3. Procedimiento para medir la producción de CO2 en laboratorio Materiales OHNa 0.2 N H2O Pipeta Muestra Cubeta Frasco de 300-400 cc Balanza

4. Procedimiento para medir la producción de CO2 en laboratorio pesar 20 g de suelo colocar en el frasco hidratar: 60% cc (3 ml)

5. Procedimiento para medir la producción de CO2 en laboratorio preparar un “blanco” colocar OHNa en las cubetas (15 ml) colocar las cubetas en los frascos

6. Procedimiento para medir la producción de CO2 en laboratorio sellar con papel parafinado cerrar los frascos herméticamente incubar a 28-30°C (7 días)

7. Producción de CO2 en laboratorio: Titulación OHNa CO3Na2 H2O OHNa CO3Na2 H2O colocar en erlenmeyer agregar 1 ml Cl2Ba y una gota de fenolftaleina titular con ClH 0.2 N CALCULAR Muestra Blanco 2 OHNa + Cl2Ba 2 ClNa + (OH)2Ba CO3Na2 + Cl2Ba 2 ClNa + CO3Ba (OH)2Ba + 2 ClH Cl2Ba + 2 H2O Reacciones químicas que se producen durante la titulación:

8. Procedimiento para medir la producción de CO2 en laboratorio Titulación: Materiales Cl2Ba 2% pizeta blanco y muestra fenolftaleina pinza OHNa 0.2 N ClH 0.2 N erlenmeyer bureta vaso de precipitado

9. Procedimiento para medir la producción de CO2 en laboratorio blanco enrasar la bureta con ClH colocar el OHNa en un erlenmeyer extraer cubeta con pinza

10. Procedimiento para medir la producción de CO2 en laboratorio agitar mientras se titula agregar Cl2Ba (1ml) agregar fenolftaleina (1 gota) registrar lectura del blanco (ml de ClH ) Cambio de color del indicador

11. Procedimiento para medir la producción de CO2 en laboratorio agitar mientras se titula OHNa de la muestra agregar Cl2Ba y fenolftaleina Cambio de color del indicadortitular registrar la lectura de la muestra (ml de ClH )

12. Cálculo para determinar la cantidad de CO2 por gramo de suelo ml de ClH 0.2 N gastados para titular el blanco ml de ClH 0.2 N gastados para titular la muestra ClH ≡ CO2/2 ClH 0.2 N ≡ ClH/5 ≡ CO2/2 x 5 peso molecular del CO2 = 44 factor de conversión entre ClH y CO2 (Blanco - Muestra) 4.4 = mg CO2 / 7 d / g de suelo peso del suelo Ejemplo: • ClH 0.2 N gastados para titular el blanco: 13,4 ml • ClH 0.2 N gastados para titular la muestra: 7,3 ml • suelo: 20 g (13.4 – 7.3) 4.4 = 1.34 mg CO2 / 7 d / g de suelo 20

13. Síntesis para medir CO2 en laboratorio 20 g suelo 15 ml OHNa 300-400 cc 300-400 cc Muestra Blanco INCUBAR 7 DIAS colocar en erlenmeyer agregar 1 ml Cl2Ba y una gota de fenolftaleina titular con ClH 0.2 N CALCULAR

14. Procedimiento para medir la producción de CO2 a campo x tiempo medición con jeringa recipiente hermético enterrado (10 cm) lectura de CO2 jeringa extractora de gases y detector graduado

15. Actividades • CO2 a campo:observar los implementos • CO2 en laboratorio: titular muestras incubadas • Cálculos: resolver problemas de CO2 en laboratorio

16. Casos prácticos de análisis microbiano del suelo Efecto de las practicas productivas • Factores a considerar: • No hay valores óptimos absolutos para todos los sitios en estudio. Usar testigo de suelo sin disturbar • Valores mayores no significa mejor fertilidad. Procesos balanceados • Índices entre parámetros químicos y biológicos: por ej. Índice de mineralización de C (CO2/MO)

17. Situaciones analizadas: Bosque Chaqueño tala y sobrepastoreo testigo quema de pastizal testigo desmonte selectivo y pasturas testigo

18. Situaciones analizadas: Agroecosistemas ganadería y pasturas monocultivo – labranza convencional siembra directa y rotación Testigo: suelo bajo alambrado

19. Parámetros analizados • Químicos: • Materia Orgánica • pH • N total • Nitrato • Biológicos: • Respiración • Grupos Funcionales • Estructura Poblacional • Índice de Mineralización de C

20. Porcentaje (%) de variación con el suelo testigo Bosque Chaqueño Agroecosistemas

21. Estructura de las comunidades microbianas Bosque Chaqueño Agroecosistemas

22. Índice de Mineralización de C (IMC) IMC= 1 balanceado >1 pierde C < 1 gana C