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1. P1555 96 P2100 P0823 P2085 P1607 99 P1089 P1324 p1371 100 p1372 C.BR.92 P1486 P2148 1 C.ET.86 P1983 P0669 P1571 P2014 P2015 92 P1912 P1074 P2181 P1295 4 88 P1833 P1208 H.CF.90.056 96 P1003 A2.CY.94. 91 P1806 P984 P1975 11 CPX.GR P1918 J.SE.94 P1552 P971 P1811 P0404 P0250 88 P0846 90 p0377 94 P1766 P344 99 P1915 P1943 97 01 AE.TH.90 1 P1965 P1528 94 P2157 94 P2195 87 P1944 P1939 74 P1846 A1.UG.1985 P1533 P1751 P0264 76 A3.SN.2001 P1885 P2063 P2067 CRF10 CD.TZ D.TZ.01 P0940 P1192 D.CD.83.ELI P1741 D.UG.94 P1293 2 CRF19 CPX.CU 73 B.FR.1983.HXB2 83 B.US.98. CRF28 BF.VE P1467 P1273 29 BF.BR.1999 P1786 P1942 96 P1603 F1.BE.93 P1970 F1.BR.93 F1.FI.93 P2165 P1708 P1899 P1868 P1842 P1826 P1675 12 BF.AR.99 73 P1356 P1587 91 P1873 F2.CM.95. F2.CM.95. P1353 P2059 P0742 F1.FR.96 P1553 P1146 P1147 P1655 P1496 P1599 P2111 P2218 CRF06 CPX P2233 P2209 P1174 P1861 96 P1605 G.KE.93 P1992 82 P0852 P1515 70 P1909 P2196 75 P0962 99 G.NG.92 P2007 P2104 99 P2105 P1072 P1481 P0402 G.CM.96 P1831 100 P2091 P 1543 P1991 P1774 P1907 P1795 79 P1986 92 P0858 P1981 P2103 P2101 P1004 P1749 CRF14 BG.ES P 1738 P2188 G.ES.00.X558 P1863 P2093 P1917 P2027 P0877 P1423 P2193 P1534 P0853 P1518 100 P1519 P2139 P2077 P2180 P2062 90 P2170 100 P2177 P2231 P1495 P1589 P1903 P2222 P1234 P0365 P2150 95 P0903 89 P2070 P950 P2034 P0844 P0683 P1969 CRF02 AG.NG P1023 P1568 P2144 P1736 P1261 95 P0957 78 P1660 CRF02_AG CRF06_cpx CRF02_AG P2106 P1682 P2056 P1624 P1416 P2132 P980 P0425 P2020 P0943 P1396 P1382 P2153 P1847 P1494 P0329 P1953 P1884 P1441 87 P0516 P0803 P0325 74 P0812 P1296 76 P0148 P1325 P1813 P1303 P2166 94 P1956 P2089 P1388 P2186 O.BE.87.ANT70 0.02 ESTUDIO PROSPECTIVO DE FORMAS GENETICAS NO-B DEL VIH-1 EN PACIENTES PROCEDENTES DEL PAIS VASCO: ALTA DIVERSIDAD GENÉTICA Y PREDOMINIO DE FORMAS RECOMBINANTES. María Teresa Cuevas González-Nicolás1, Elena Delgado Blanco1, Miguel Thomson Okatsu1, Aurora Fernández-García 1, Mercedes Muñoz-Nieto1, Ester Serrano Bengoechea2, Ana María Sánchez Sánchez1, Carmen Ezpeleta Baquedano3, María González-Galeano1, Leyre López Soria4, Milagros Pinilla García1, María Jesús Lezaún5, Valentina García Álvarez1, Labora A6, Pérez-Alvarez L1, y el grupo Español de Estudio de Resistencias a Antiretrovirales en el País Vasco. 1Unidad de Biología y Variabilidad de VIH. CNM. Instituto de Salud Carlos III, Majadahonda. Madrid. 2 Complejo Hospitalario Donostia, San Sebastían, Guipuzcoa. 3Hospital de Basurto, Bilbao. 4Hospital de Cruces, Baracaldo, Bilbao. 5Hospital de Txagorritxu, Vitoria, Alava. 6Hospital de Santiago Apostol, Vitoria, Alava. NUMERO DE POSTER P 49 Objectivo: El objeto de este trabajo fue analizar la introducción y expansión de formas virales no-B en el País Vasco, desde el año 2002 hasta Abril del 2009. Pacientes y Métodos: Se incluyeron un total de 1.900 pacientes que estaban siendo atendidos en 9 hospitales del servicio público de salud del País Vasco entre los años 2002 hasta Abril del 2009. El ARN se extrajo a partir de plasma, se amplifico la región de pol correspondiente a Proteasa y Transcriptasa inversa (PR-RT) mediante RT-PCR para su posterior secuenciación. Las secuencias se ensamblaron usando el programa Seqman (DNASTAR), y se corrigieron con Bioedit (www.mbio.ncsu.eduBioeditBioedit.html). Para definir el subtipo viral, se realizaron árboles filogenéticos el programa MEGA (Molecular Evolutionary Genetic Analysis), siguiendo el método de unión por vecindad (Neighbour –joining), se realizaron 100 réplicas en la construcción de estos árboles, considerando un valor de bootstrap significativo igual o superior al 70%. Las secuencias también se analizaron enviándolas online al programa Rega de la universidad de Stanford (http://dbpartners.stanford.edu/Regasubtyping) y al Genotyping (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/ projects/ genotyping). La recombinación se analizó en mayor detalle mediante bootscanning usando el programa Simplot (http://sray.med.som.jhmi.edu/RaySoft/simplot.html) y con otro programa de la base de datos de los Alamos, jpHMM (jumping profileden Markov Model (http://jphmm.gobics.de) Introducción: El VIH muestra una alta diversidad genética, debido principalmente a la alta tasa de replicación, a los errores que comete la transcriptasa inversa al sintetizar el ADN proviral y a su capacidad de recombinación. Estas características virales ha permitido la clasificación del grupo M en nueve subtipos: A, B, C, D, F, G, H, J, K. Las secuencias de los subtipos A y F muestran una cierta divergencia, por lo que se han descrito sub-subtipos, A1-A4 y F1-F2. En áreas donde co-circulan diferentes subtipos se han descrito virus recombinantes. Si los virus presentan el mismo patrón de recombinación y se detectan en 3 ó mas pacientes no relacionados epidemiológicamente se definen como formas circulantes recombinantes, en inglés CRF. Hasta ahora se han descrito 43 CRF. Al resto de los virus recombinantes se les define como formas recombinates únicas o URF. En España la forma viral más prevalente es el subtipo B, si bien los movimientos poblacionales han permitido la introducción y expansión de virus de subtipo no-B. RESULTADOS 3.- VÍA DE TRANMISIÓN: La mayoría de los pacientes (83.2%) se infectaron por vía sexual, incluyendo 134 (70.2%) pacientes cuya infección fue por vía heterosexual, 13 (6.8%) se produjo entre hombres homo o bisexuales, hubo 12 casos entre varones que definieron su vía de contagio como sexual sin especificar si fue homo ó heterosexual y por último 21 (10.9%) pacientes se infectaron por el uso de drogas inyectables. 2.- ORIGEN DE LOS PACIENTES: 57 (29.8%) pacientes procedían de España, 92 (48.2%) de África, 19 (9.9%) de América, 17 (8.9%) de otros países europeos, 1 de Asia y en 5 casos no tuvimos datos del país de origen de los pacientes. 1.-VIRUS DE SUBTIPO NO-B: Un total de 191 (10.1%) pacientes se infectaron con virus de subtipo no-B. Se observó un incremento anual en la frecuencia de este tipo de virus: 5,2% en 2002, 2,1% en 2003, 9,4% en 2004, 7,8% en 2005, 11,5% en 2006, 17,8% en 2007, 34,1% en 2008, 12, 1% de Enero a Abril de 2009, es importante destacar que aunque son sólo cuatro meses el porcentaje es superior a los valores obtenidos previos al 2007 . 6.-PATRON DE LOS MOSAICOS DE RECOMBINACION II: 4.-ARBOL FILOGENÉTICO: 5.-DISTRIBUCIÓN DE LAS FORMAS GENETICAS DEL VIH: P1915 La distribución de las formas genéticas presentó una predominancia de formas recombinantes (61,3%), incluyendo 86 (45,1%) CRFs, y 31 (16,2%) URFs. La CRF02_AG fue la forma genética más frecuentemente detectada (83.7%), seguida de 5 CRF14_BG, 2 CRF01_AE, 2 CRF11_cpx, 2 CRF12_BF, 1 CRF13_cpx, 1 CRF19_cpx y 1 CRF28_BF. Respecto a las URFs, 20 (64.5%) de ellas fueron recombinantes donde estaban implicados dos subtipos y 11 (35.5%) donde estaban implicadas, bien una CRF y un subtipo, o dos CRFs. Destacamos la presencia de 6 secuencias recombinantes en las que estaban implicadas las CRF02_AG y CRF06_cpx. Por último, 73 (38.2%) muestras agruparon con subtipos, siendo los subtipos G y C los más prevalentes (30.1%) cada uno de ellos, seguidos de los subtipos F (19.1%) y A (13.7%). Otros subtipos detectados fueron: 2 D, 1 A2, 1 F2 y 1 H. Una secuencia se definió como U (unclassified), al no poderse tipar Es importante destacar que aunque la proporción entre hombres y mujeres fue muy similar (51.3% vs. 47.1%), el porcentaje de hombres fue superior entre los afectados por los subtipos C, G y CRF14_BG, mientras que la proporción de mujeres fue superior entre los pacientes infectados por subtipos F1 y CRF02_AG. P0846 6.-PATRON DE LOS MOSAICOS DE RECOMBINACION I: Se muestran algunos de los patrones de recombinación. P1273 P1813 CONCLUSIONES: Describimos una gran diversidad viral del VIH-1 en pacientes procedentes del País Vasco. El incremento en el número de formas virales no-B a lo largo de los años, está dando lugar a la generación y circulación de recombinantes nuevos y más complejos. P0846 P1842 AGRADECIMIENTOS: Agradecemos al Dr. Daniel Zulaica, coordinador del Plan para la prevención y control del Sida y al personal del servicio Vasco de Salud- Osakidetza, por su apoyo y colaboración en el desarrollo de este trabajo. El grupo Español de Estudios de Resistencias a Antiretrovirales en el País Vasco: Álava:H. Txagorritxu: Agud JM, Aldamiz M, Ayensa C, Barroso J, Lezaun MJ, Michaus L, Pérez-Ortola R, and Portu JJ. H. de Santiago; Andia A, Labora A. Guipuzcoa: Complejo Hospitalario Donostia: Arrizabalaga J, Cilla G, Echevarria J, Iribarren JA, Rodriguez-Arrondo F, Serrano-Bengoechea E and Von Wichmann MA, H de Zumarraga: Bustillo MA. Vizcaya. H Galdakano: López de Goichoechea M, H de Cruces: Aguirrebengoa K, López Soria L, Goikoetxea J, Montejo M, Bereciartua E. H Basurto: Baraia JB, Cisterna R, Ezpeleta C, Ferrero O, Ibarra S, Imaz M, Muñoz-Sanchez J, Santamaría JM, Sota M, Zubero Z, H San Eloy: Lizarraga M, Silvariño R.