第 三 章
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第 三 章 DNA 多态性分析基础 PowerPoint PPT Presentation


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第 三 章 DNA 多态性分析基础. 人类 DNA 遗传标记 ---- 法医物证学应用研究的热点 ♦ 由常量检材到微量检材 ---- 微量 检材的检验 ♦ 由蛋白质水平到 DNA 水平 ---- 陈旧 检材的检验、取材的 广泛性 ♦ 实现了仅能否定到高概率肯定 --- 提高了法庭证据的 可靠性 人类 DNA 遗传标记 ---- 特定的座位上出现等位基因 ♦ 出现在编码区或非编码区 ♦ 表现为 序列多态性 或 长度多态性. 第一节 DNA 分子结构与功能 一、 DNA 的分子结构

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第 三 章 DNA 多态性分析基础

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Dna

第 三 章 DNA多态性分析基础


Dna

人类DNA遗传标记----法医物证学应用研究的热点

♦由常量检材到微量检材

----微量检材的检验

♦由蛋白质水平到DNA水平

----陈旧检材的检验、取材的广泛性

♦实现了仅能否定到高概率肯定

---提高了法庭证据的可靠性

人类DNA遗传标记----特定的座位上出现等位基因

♦出现在编码区或非编码区

♦表现为序列多态性或长度多态性


Dna

第一节 DNA分子结构与功能

一、DNA的分子结构

DNA是由4种核苷酸通过磷酸二酯键连接成的线性多聚体

1.DNA的基本结构单位

碱 基A G C T

核 苷

核苷酸

dNTP

dNDP

dNMP

脱氧核苷酸=碱基+脱氧核糖+磷酸


Dna

2.DNA的分子结构

一级结构--DNA分子中核苷酸的排列顺序

链接方式

3’,5’磷酸二酯键连接

戊糖和磷酸构成多聚核苷酸对骨架

含氮碱基突出于骨架上

不对称末端

5’-自由的磷酸,3’-游离的羟基

生物学意义

1. 遗传信息的载体

2. 构成DNA遗传标记的结构基础


Dna

二级结构--两条DNA单链形成的双螺旋结构

双螺旋结构的特征

1. 两条单链逆向平行排列,

绕同一中心轴形成双螺旋

2. 两条单链间以氢键连接

碱基互补原则:A=T,C=G

** 稳定性与G+C含量呈正比

** 嘌呤和嘧啶相等: A+G=C+T

配对原则的意义

1.复制的分子学基础

遗传信息传给子代

2.转录的分子学基础

RNA合成的模板 –蛋白质

3.DNA多态性分析的分子学基础

DNA遗传多态性


Dna

三级结构---超级螺旋结构

结构特征

真核生物DNA三级结构--核小体

140bpDNA双链缠绕组蛋白8聚体

60bp的连接链(结合有组蛋白H1)

生物学意义

压缩DNA分子体积,有利于在细胞

中包装组蛋白对DNA分子完整性的

保护作用

统计数据

人类基因组DNA直线长2m

细胞核直径5um

DNA分子被压缩了近一万倍


Dna

二、DNA的理化性质

DNA是生物大分子,因此具有高分子物质的一般性质

粘 性 较大溶液的粘性与溶质分子的不对称性有关

两性电解质DNA含有磷酸基团(-)和含氮碱基(+)

♦等电点低--中性或弱碱性溶液--带负电

电泳技术进行分离的分子基础

♦可以与金属离子(Na,K,Mg.Mn)结合成盐

DNA+盐(乙醇或异丙醇)DNA沉淀析出

♦可以和组氨酸结合

使DNA分子更具有稳定性

吸收紫外线碱基含有共轭双链 ( 最大吸收波长260nm )

♦ 对DNA样品进行定量分析


Dna

1.DNA的变性

概念:在加热、溶液碱性、有机溶剂、二甲基亜砜、甲酰胺等条件

下,DNA双链间的氢键断裂,形成两条单链DNA分子的过程。

变化:溶液粘度降低,沉降速率增加,浮力密度上升,紫外线吸收增强

增色效应~随温度上升,DNA溶液的紫外线吸收增强,A260nm值

♦ DNA对紫外线吸收强度与变性程度成正比

♦ OD260值:双链DNA < 单链DNA < 单核苷酸

融链温度~随温度上升,一半DNA分子变性时的温度 (Tm值)

♦ Tm值与DNA分子中G/C含量呈线性关系

估计DNA的GC含量 ( G+C)% = (Tm—69.3)× 2.44

估算引物的Tm 值 Tm = 4( G + C ) + 2 (A + T )

♦ Tm值受介质中离子强度的影响

在高离子强度溶液中相对稳定(1mol/L NaCl)

某些因素影响下→DNA分子共价键断裂→小片段DNA的过程:DNA降解


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2.DNA的复性

概念:当撤除变性因素后,原变性的两条互补DNA单链通过基配对又重

新缔合成为双链结构的过程叫复性。

** 加热后变性的DNA在温度降低过程中的复性有称为退火

影响:温度影响~最适为Tm以下25℃,过高不易复性;过低碱基错配

离子强度~足够盐浓度—中和DNA分子携带负电荷—利于复性

分子结构~简单序列的、小分子DNA--易发现互补序列-复性快

溶液浓度~高浓度DNA溶液较低浓度DNA溶液易复性

** 影响复性过程的主要因素:复性温度与溶液的离子强度

杂交:在复性的条件下,来源不同、但具有碱基互补的DNA单链按碱基

配对原则形成双链DNA分子的过程称作杂交。

** 局部碱基序列具有同源性的DNA分子也能形成局部杂交产物

杂交技术:在复性条件下,探针与靶DNA单链形成杂交双链

用以分析两核酸分子间的碱基互补程度

探 针:标记有失踪物的寡核苷酸片段


Dna

三、DNA的复制和基因表达

1.DNA的复制 概念:复制是指以原来的DNA为模

板合成相同DNA分子的过程

复制的基础--碱基互补原

方式:♦ 半保留复制

♦ 半不连续

过程:复制的起始 双链解开

引物合成

DNA链延伸 5’-3’方向

DNA聚合酶

复制的终止 引物切除

缺口连接


Dna

DNA聚合酶--催化脱氧核苷三磷酸聚合成DNA链的酶

条 件:必须有引物、复制模板、合成DNA的原料dNTP及微量Mg2+

作 用:具有合成、切除和校对的综合功能

♦ 大肠杆菌DNA聚合酶I—polA基因编码的多功能酶

68kd C端2/3 5’-3’聚合酶活性—合成

103kd N端1/3 3’-5’外切酶活性—校对作用

35kd 5’-3’外切酶活性—切除

♦ 真核生物DNA聚合酶—四种酶都具有5’-3’方向聚合作用

α—参与核 DNA的合成(链合成的引发)

β—具有外切酶的活性(修复、校对)

γ—线粒体 DNA的复制

δ—参与核 DNA的合成(链的延长及其他)

忠实性:是保证生物信息准确传递的必要条件

机制 专一性识别碱基--合成控制:碱基对、酶、引物

3’-5’外切酸活性--校对控制:


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转录

翻译

复制

RNA

DNA

蛋白质

逆转录

2.基因表达

概念:将储存于DNA中的遗传信息转变成RNA和蛋白质分子,通过这

些蛋白质分子的功能活动使声明体表现各种各样的生理功能

和千差万别的生物性状。

阶段:转录~DNA分子作为模板直接指导RNA分子的合成过程

翻译~RNA分子上的核苷酸序列信息转变成蛋白质中氨基酸


Dna

四、DNA的损伤与修复

1.DNA损伤----是指DNA双螺旋结构出现的任何改变

体内复制错误 DNA复制错配率10-1,10-2

自发损伤 碱基脱嘌呤~A或G被切下来→导致突变

碱基脱氨基~C 脱氨成为 U→U与A配对

外界物理因素 紫 外 线 嘧啶间诱导形成共价键→嘧啶二聚体(TT)

嘌呤间形成异常化学键

电离辐射 机理~构成基因的化学物质电离

结果~碱基破坏、核糖分解、DNA分子断裂

化学因素 烷 化 剂 烷基置换碱基的氢原子

---碱基被烷化,造成基因改变

类 似 物 替代正常碱基掺入DNA链中引起错配

5-溴尿嘧啶、2-氨基嘌呤


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2.DNA修复

切除修复—恢复正常结构 重组修复---损伤可以保留


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第二节 人 类 基 因 组

基因组概念

广义概念:一个生物体的所有基因或遗传物质

狭义概念:一大组基因、一个染色体或几个染色体的基因

** 基因组包含基因序列(20-30%)+ 非基因序列(70-80%)

基因组构成

核 基 因 组:单倍体细胞内的全部DNA分子,3×109 bp

体细胞~22对常染色体和1对性染色体

性细胞~22条常染色体和1条型染色体

** 每个细胞含相同的基因组拷贝(特殊除外)

** 平均每个细胞含有6~10pg的DNA

线粒体基因组:线粒体内包含的全部DNA分子,16569bp

** 每个细胞平均有800个线粒体

** 每个线粒体含有10个DNA拷贝


Dna

一、人类核基因组DNA

1.基因与基因有关序列

基因组成:包括合成有功能的多肽链或RNA所必需的全部序列


Dna

真核生物---断裂基因

基因中编码序列被若干个插入序列分隔的不连续的镶嵌结构

编码序列----外显子( n ) 10%~50%

插入序列----内含子(n-1) 50%~90% 决定基因长度

编 码 率----编码序列长度占整个基因序列的比例

外显子 内含子

转录:模板DNA

初级RNA

成熟RNA

剪接方式:特定外显子+不同外显子---表达多种产物

表现为外显子/或 内含子---表现多种功能

由同一DNA序列可以得到不同的mRNA,从而编码多种

具有部分重叠序列的蛋白质的基因称为重叠基因

GT AG GT AG


Dna

基因分类 结构基因:合成结构蛋白、催化生化反应的酶

调节基因:阻遏蛋白或激活蛋白,控制基因活性

◆ 既可以转录成RNA,又可以翻译成蛋白质

rRNA基因:产物是核糖体的核糖体RNA

tRNA基因:产物是转移RNA

◆ 只转录产生相应RNA,而不翻译成蛋白质

相关序列 前导序列和尾随序列---能被转录,但不被翻译

启 动 子:RNA聚合酶与DNA结合起始部位

位置:基因转录起点上游(5’-1kb)

作用:能与RNA酶结合,调控基因表达

增 强 子:调节基因产物与DNA结合的部位

位置:基因上游,促进基因转录活性

作用:促进转录活性,增强启动子

2.基因外DNA

功能不清,多拷贝或低拷贝形式;30%串联重复


Dna

3.重复序列

概念:在基因组中反复出现,在基因组中含有一个以上相同

顺序拷贝的DNA序列称为重复序列---DNA多态性基础

分类:反向重复序列----两个序列相同的拷贝在DNA上呈反向排列

重复序列间有间隔位于基因调控区内

重复序列间无间隔与基因的转录、复制有关

串联重复序列----相对恒定的序列为重复单位,首尾相接

大卫星DNA(macrosatellite DNA) 主要在在非编码区

小卫星DNA( minisatellite DNA ) 与染色体折叠压缩

微卫星DNA(microsatellite DNA) 和染色体配对有关

散在重复序列----相同序列的重复单位散在分布

短散布元件〈 500bp Alu序列

序列长平均250bp,含有Alu I酶切位点(AGCT)

同源性高达80%,但具有种属特异性

人类Alu序列长300bp(130bp+31bp+130bp)

长散布元件 〉6-7kb Kpn序列 约6500bp


Dna

发现:DNA主带以外有多个小的卫星带

分类:大卫星---根据浮力密度不同

1.687 Ⅰ卫星DNA(25-48bp)

1.693 Ⅱ卫星DNA(5bp-ATTCC-)

1.697 Ⅲ卫星DNA(5bp-ATTCC-)

1.700 Ⅳ卫星DNA(隐蔽的卫星DNA)

α卫星DNA 171bp 灵长类特有

β卫星DNA 68bp 富含GC

γ卫星DNA 220bp

成分:GC含量少于主带中的DNA

特征:DNA呈串联重复形式

各类型家族成员序列G/C含量近似

具有相同的浮力密度

但是重复序列特征有明显差异

卫星DNA


Dna

所有串联重复DNA序列都称为---卫星DNA

根据重复序列长度和序列特征分类

小卫星DNA 微卫星DNA

( minisatellite DNA ) (microsatellite DNA)

重复单位15bp-30bp 2bp-6bp

重复次数数次至数百次 10bp-60次

序列总长100bp-20kd 300bp

序列特征 核心序列 单拷贝

多态原因VNTR STR

形成机制不等交换,重组 复制滑动

主要分布近端粒处,着丝点 内含子、间隔DNA

有特定的基因座定位 有特定的基因座定位

核心序列----富含G/C或A/T的保守序列

不同小卫星高度同源性---DNA指纹技术


Dna

4.假 基 因:与正常功能基因在核苷酸序列上相似,但不能转录或

转录后生成无功能基因产物的DNA序列。

突变:复制-失去调控;转录-拼接信号;翻译-终止信号

其他:丢失5’或3’端部分而失去活性—基因片段

5.基因家族:基因组中来源相同,结构相似,功能相关的一组基因

产物:编码 R N A ~ snRNA, tRNA, rRNA

编码蛋白质 ~ 组蛋白、珠蛋白、生长激素

位置:同一个染色体上或不同染色体上

分类:多 基 因 家 族(rRNA基因家族)

散在基因家族(珠蛋白基因家族)

超 基 因 家 族(免疫球蛋白、组织相容性复合体)

6.转位因子:DNA分子内部或分子间可以移动的DNA片段

特点:保留原位的序列,新合成复本的插入,可以遗传

部位:不固定(内含子、基因侧翼序列、插入编码区 )


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7.端粒

存在于真核生物染色体末端,一段DNA和蛋白质形成的复合结构

特点:仅存在于真核生物,富含G的寡核苷酸序列

多个串联重复序列组成,重复单位为 5bp-8bp(-TTAGGG-)

重复次数为800-3000次,总长度5~15kb

作用:在端粒酶参与下,封闭染色体末端,维持染色体稳定性的作用

DNA复制:由于受DNA聚合酶特性限制,子代DNA链的最后

一个片断去除引物后,无法填补空隙,易造成子代

DNA链的缩短。

端 粒 酶:由RNA与蛋白质组合成的酶,以自身携带的RNA为模板

合成互补链,直接从末端起始DNA的合成

意义:端粒长度与年龄、细胞分裂次数有关,存在性别、种族和组织差


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二、线粒体DNA

惟一的细胞核外DNA,携带有编码蛋白质和RNA的基因

结构:闭环双链--- 16569bp组成

外环—重链(H链)

富含嘌呤

内环—轻链(L链)

富含嘧啶

分子裸露----无组蛋白

容易破坏,不稳定


Dna

功能:储存信息---编码参与氧化磷酸化蛋白质和RNA的基因

H 链:2个rRNA,14个tRNA,12个蛋白质

L 链:8个rRNA,1个蛋白质

自身复制---单向:置换环复制或D-环(D-loop)复制

特点:不对称的复制,

H链和L链各有一个复制起点,先复制H链,

H链复制到达L链起始点后,L链开始复制

D-环:新合成第三条H链姊妹链 ,序列与L链互补

H链复制起点附近( 520-700 ),高变异

转录功能--两条链同时转录合成RNA--对称转录


Dna

特征(1)碱基结构紧凑、简洁:以最少碱基数编码尽量多的蛋白质和RNA

♦ 基因间无间隔序列

♦基因内无内含子、前导序列、带帽序列和终止信号

♦ 相邻基因甚至有碱基的重叠

(2)不存在同源基因间的重组与交换

结果:mtDNA所有序列变异呈单倍型特性

(3)母系遗传:同一母系后代mtDNA序列,在排除突变情况下是一致

原因:精子尾部线粒体不进入或少量进入卵细胞

卵细胞

精细胞


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(4)突变率比较高

主要分布 控制区(D-环区)- 含有启动子和重链复制的起点

跨距约1100bp,个体间存在较大差异

高 变 区HV-I 29 ~ 408号碱基

HV-II 15996 ~ 16401号碱基

HV-III 438 ~ 574号碱基

主要原因 A : mtDNA没有组蛋白的保护

B : DNA聚合酶缺乏3’-5’外切酶校正功能

C : 缺乏DNA损伤的修复体系

D : mtDNA极少或不受来自选择压力的影响

突变类型碱基的错配---序列多态性

主要为转换(90%):嘧啶转换 HV-I 80%

HV-II 20%

少数是顛换(10%): C→A 或 A→C

插入或缺失----长度多态性

poly—C:nt16184-nt16193 ( HV-I )

CA 重复:nt514-nt523 ( HV-III )


Dna

(5)异质性同一个体mtDNA出现两种或两种以上碱基序列的现象

形式:同一个体的不同组织有不同的mtDNA序列

同一组织中含有一种以上的mtDNA序列

异质性仅出现在个别组织中,其他组织则无

类型:点异 质 性---异质性序列之间差异仅限于单个碱基

长度异质性---异质性出现在多聚胞嘧啶(poly-C)

HV-I nt16184, HV-II nt303-nt315

成因:拷贝数目多、不对称复制、缺乏校正修复机制

应用1.含 量 多:数以百计线粒体/人类细胞,2-10个拷贝/线粒体

2.母系遗传:单亲鉴定或母系遗传的研究出现率为2%-8%

3.异 质 性:出现率为2%~8%,对个体识别鉴定的影响值得注意


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第三节 基 因 突 变

概念:基因碱基组成的改变,又称为点突变。

野生型--自然界存在的,无DNA分子改变的个体表型

突变型--突变后的表型

方式:碱基的替换 转换---同一类型碱基的替换

顛换---不同类型碱基的替换

插入和缺失 在DNA序列中插入或缺失一个或几个碱基

后果:编 码 区---碱基突变导致相应密码子的改变

同义突变-- 氨基酸不变

中性突变-- 氨基酸改变,不影响蛋白质功能

错义突变-- 氨基酸改变,影响/不影响功能**

无义突变-- 终止密码子形成,产物无功能

移码突变-- 阅读框改变,肽链延长或缩短

非编码区---没有表达产物,多不构成实质性影响

人类非编码区的序列变异远比编码区多


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第四节 DNA 多 态 性

DNA 多 态 性

基因组DNA中,由不同碱基结构的等位基因所形成的多态性

产生机制 点 突 变---DNA序列多态性

   插入或缺失---DNA长度多态性

存在部位 编 码 区

非编码区

DNA遗传标记

是特定的碱基序列

     遵循孟德尔遗传规律遗传

     具有终身不变的遗传特征


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一、DNA长度多态性

同一基因座上个等位基因之间DNA片段长度差异构成的多态性

1.可变数目串联重复序列

(variable number of tandem repeats, VNTR)

特征:重复单位9bp-24bp、重复数次至数百次、

总长0.1-2.0kd,有特定的染色体定位

分布:小卫星DNA--可变数目串联重复序列

微卫星DNA--短片段重复序列

多态性结构基础---不同个体所含串联重复序列拷贝的差异

♦不同的个体,不同等位基因的串联次数不同,

形成不等长度的等位基因

♦同一基因座,每个等位基因之间的长度差异

刚好是重复单位的整倍数

♦不同基因座,小卫星VNTR序列间具有同源性—核心序列

可以发生相互杂交

**多基因座DNA探针RFLP分析的理论基础


Dna

♦ 高度多态性—个人识别的重要依据

某基因座杂合度高100%

例:重复单位 17bp

重复次数 70-450次

片段长度 1190-7650bp

等位基因数 = 381

基 因 型数 = 72771个

H=0.9974

DP=0.99999992

VNTR等位基因频率0.1%-10%


Dna

DNA指纹图

♦核心序列----DNA指纹技术的理论基础

发现:1985年Jeffreys报告

人肌红蛋白基因第一内含子

重复单位33个碱基,重复4次

核心序列16个碱基

探针:筛选出8个阳性克隆

核心序列--GGAGGTGGGCAGGAXG--

确定探针:33.6 AGGGCTGGAGG

33.15 AGGTGGGCAGGTGG

分析:DNA酶切片段(HinfI)

电泳分析

转移印迹

探针杂交

RFLP图谱(20条左右的片段)

**偶合几率10-11-10-12


Dna

♦小卫星变异重复多态性

部分重复单位内部的出现碱基替换

重复单位 AGGTCGG

变异单位 AGGTTGG

等位基因A

等位基因B

酶切分析:

PCR扩增


Dna

2.短串联重复序列(short tandem repeats, STR)

特征:重复单位2bp-6bp 不宜用RFLP方法分析

实质也是一种VNTR PCR扩增没有优势扩增

重复次数5次-60次,总序列长度<400bp

微卫星DNA适用于降解DNA的鉴定

最常见是二核苷酸,法医常用的是四核苷酸重复

必须用高分辨率的电泳方法分离

分布广泛,人类基因组的5%,估计20-50万个

检出8000多个,遗传标记数目多

绝大多数分布非编码区,极少三核苷酸位于编码区


Dna

类型:根据重复单位的碱基组成分为以下三类:

重复单位长度 重复单位组成

简单重复序列 基本一致 基本一致

复合重复序列 基本一致 组成不同

复杂重复序列 长度不同 组成不同

筛选基本条件: 多态性程度高 、扩增稳定性好

1.等位基因长度<300bp

2.重复单位为4核苷酸,无非重复单位碱基

3.等位基因数8-12个

4.基因座杂合度>0.8,个人识别能力>0.9

5.基因频率分布比较平均

6.PCR扩增稳定、突变率低


Dna

命名基 因 座♦结构基因内含子中STR基因座

---GenBank注册基因名称命名

例:TH01 酪氨酸羟化酶基因第1内含子

♦非编码区/定位不清的STR基因座

---Genome Database原始序号

例:D3S1359 3号染色体;单拷贝;1359号

等位基因 不同实验室检验结果的可比性和重复性

♦按照重复单位次数命名

5’-GGTCATCATCATGG-3’“TCA TCA TCA”

“CAT CAT CAT”

** 从离5’端最近的核苷酸开始定义

♦含有不完全重复的等位基因

(完整重复等位基因数)·(不完全碱基数)

例:TH01基因座9.3基因 [ATG]4ATG[AATG]5


Dna

3.长度多态性形成机制

(1)同源重组

概念:发生在联会复合体内的,同源染色体的两条非姊妹染

色单体之间的遗传物质交换

条件1.交换区域的核苷酸序列必须相同或相似

2.交换链间碱基互补,重组发生在同样基因座

3.DNA序列的交换在重组酶催化下进行

机制:不等交换--交换双方地位平等,但数量不一定相等

证据:核心序列G/C含量与碱基序列和大肠杆菌χ序列类似

χ序列原核生物基因组DNA重组的信号

以核心序列为探针与减数分裂中期的人染色体杂交

信号集中在染色体着丝点及附近

意义:法医学---形成DNA片段长度多态性

遗传学---减轻编码区选择压力,维持物种稳定


Dna

(2)基因的结构重排

概念:通过基因的转座,DNA的断裂错接使正常基因顺序发

生改变

机制:结构重排是一种DNA双链断裂的修复过程。

DNA断裂(5’端的重复序列内)--形成两个游离末

修复过程中:末端的因摆动或错位—基因转移移动

部位:基因内重排---单链末端的碱基率先复复性

然后合成空缺的碱基,形成插入重复单位

TCC TCC TCCTCC TCC TCCTCC TCC

AGG AGG AGG AGG AGG AGG AGG AGG

基因间重排---游离单链末端侵入对应染色单体基因

形成同源染色单体基因移动

(1)部分重复单位的转移

(2)基因共转移(部分重复单位+侧翼SNP)

(3)基因间重组交换


Dna

(3)复制滑动

类型:正向链3’-5’的滑动错配

在正向链中插入1个重复单位

反向链3’-5’的滑动错配

正向复制链中缺失1个重复单位

特点:1.多发生在相似碱基结构区域,更倾向较短重复序列

是STR多态性那个的主要原因

2.插入比缺失多见,卫星序列有自我加速复制、延长

该序列可以减轻编码区承受的选择压力

3.滑动错配是DNA半保留复制的关系

只要出现不对称环,多为滑动错配


Dna

二、DNA序列多态性

概念:是指一个基因座上,因不同个体DNA序列有一个或多

个碱基的差异而构成的多态性。

即:同一基因座上所有的等位基因DNA长度相同

但它们之间的序列存在差异。

原因:点突变 物种进化—对自然选择的回应

法 医 学—提供大量的遗传标记

单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)

---在人类基因范围内,如果任何单碱基突变使特定核苷酸位置上

出现两种碱基,其中最少的一种在群体中的频率不少于1%。

特点:二态基因---利于信息的自动化分析

含量丰富---在基因组中至少有300万个SNP

期望:高通量分型检测的技术难题


Dna

遗传标记 分析方法

VNTR DNA指纹技术

STR PCR扩增技术

SNP DNA芯片技术


Dna

概念:

半保留复制 DNA变性 DNA降解

DNA复性 分子杂交 Tm值

基因表达 断裂基因 重叠基因

重复序列 串联重复序列 多基因家族

端粒 异质性 DNA多态性

DNA长度多态性 DNA序列多态性 核心序列

小卫星变异单位多态性 同源重组

VNTR STR

小卫星DNA和微卫星DNA的主要区别

线粒体DNA复制的特点

线粒体DNA的主要特征


Dna

DNA一级结构的生物学意义主要有------和------。

碱基配对原则的生物学意义---,---和---。

影响复性的主要因素是-----和------。

DNA复制的过程包括-----、----和----。

DNA聚合酶具有-----、-------和------功能。

聚合酶实现DNA复制的条件是-----、-----、-----和----。

保证复制忠实性有-----和----两种机制

基因表达包括----和 ----两个过程。

主要的DNA修复方式是-----和------。

基因分为-----、---、-----和------三。

真核生物基因的特点是------。

重复序列分-----、----、和------三类。

线粒体DNA突变率高的原因有----、----、----和----。

线粒体DNA 的特点-----、-----、-----、-----和-----。

基因突变的后果---、---、---、---和---。

STR的三种结构类型有-------、-------和-------。

STR筛选条件---、----、----、----、----和----

长度多态性形成的机制


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