1 / 31

Руководитель: профессор, д. б. н. Кратасюк В.А. Научный консультант: м.н.с. Римацкая Н.В.

Разработка экспрессного биолюминесцентного метода оценки реакции организма спортсмена на физическую нагрузку. Руководитель: профессор, д. б. н. Кратасюк В.А. Научный консультант: м.н.с. Римацкая Н.В. Выполнил: магистрант 2 года Иванова Г.В. Проблема. Эмоциональная нагрузка:.

quinlan-mendoza
Download Presentation

Руководитель: профессор, д. б. н. Кратасюк В.А. Научный консультант: м.н.с. Римацкая Н.В.

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

  1. Разработка экспрессного биолюминесцентного метода оценки реакции организма спортсмена на физическую нагрузку Руководитель: профессор, д. б. н. Кратасюк В.А. Научный консультант: м.н.с. Римацкая Н.В. Выполнил: магистрант 2 года Иванова Г.В.

  2. Проблема • Эмоциональная • нагрузка: • Физическая нагрузка: • Умственная нагрузка • Сбор суточной мочи • Пульсометры • Наблюдения тренера • Измерение гемодинамики Отсутствие объективных экспресс методов контроля • Недостатки известных методов: • длительность, • сложность проведения анализа, • трудоемкость, • необходимость предварительной • пробоподготовки в лаборатории, • инвазивность при анализе сыворотки и плазмы крови. • Анализ крови • Определение максимального потребления кислорода (МНК), показателей анаэробного обмена (ПАНО) Перегрузка организма Травмы организма Фото электронного ресурса www.google.ru

  3. Цель работы: Изучить закономерности влияния слюны на биолюминесцентную биферментную реакцию НАДН:ФМН-оксидоредуктаза-люцифераза для разработки метода контроля стресса, связанного с физическими и умственными перегрузками Задачи: Изучить влияние слюны на кинетику биолюминесцентной биферментной реакции: НАДН:ФМН-оксидоредуктаза-люцифераза Определить факторы, влияющие на степень действия слюны на биолюминесцентнуюбиферментную реакцию: НАДН:ФМН-оксидоредуктаза-люцифераза Выбрать условия, обеспечивающие наибольшую чувствительность биолюминесцентного метода контроля стресса, связанного с физическими и умственными перегрузками Изучить условия отбора и транспортировки проб слюны для получения повторяющихся результатов.

  4. Материалы и методы NADH:FMN-oxidoreductase (R) NADH (NADPH) + H+ + FMNNAD(NADP)+ + FMNH2 Luciferase (L) FMNH2 + RCHO + O2 FMN + RCOOH + H2О + h Состав реакционной смеси: 50 мкл 0.0025%-ного водного раствора альдегида; 5мкл смеси ферментов L+R; 300 мкл 0.25 M фосфатного буфера, рН 7.0; 10 мкл 5,4х10-4M раствора FMN; 100 мкл 4х10-4М раствора NADH; + 50 мкл слюны

  5. Пробоподготовка Люминометр 20/20n (Turner BioSystems, США) Центрифуга Eppendorf Centrifuge 5810 r (Eppendorf , Германия) TriStar LB 941 Multimode Microplate Reader Фото электронного ресурса www.google.ru saliva samples

  6. Результаты Данные Кратасюк В.А.

  7. Диплом Черняева В.2011г.

  8. Влияние слюны спортсменов (ориентирование) до и после тренировки Диплом Черняев В. 2011г

  9. Диплом Черняев В. 2011г

  10. Диплом Черняев В. 2011г

  11. Контроль эффективности лечения методами иппотерапии I III III I II III LI,% I III № пациента Диплом Черняев В. 2011г

  12. Студенты, физическая нагрузка 2 человека Разделение на 3 группы: • ЛИ увеличивается после нагрузки • ЛИ уменьшается после нагрузки • ЛИ почти не изменятся Эффект сохраняется в нескольких экспериментах Диплом Черняев В. 2011г

  13. Сравнение результатов, полученных биолюминесцентным методом анализа слюны с результатами, полученными иными экспериментальными и классическими методами (кардиограмма)

  14. Исследование биохимического состава слюны на биохимических анализаторах Диплом Гриценко Е.В.1998

  15. Результаты Использование метода атомно-абсорбционной спектроскопии для определения концентраций металлов в слюне. Измерение активности ферментов слюны кинетическим методом на фотометре Humalyzer Junior. Измерение физико-химических параметров слюны электрохимическим методом на газоанализаторе ABL50. Получение спектров поглощения слюны на двухлучевом регистрирующем спектрофотометре UVIKON 943. Получение ЯМР-спектра слюны. Показана зависимость величины ЛИ от концентрации ионов кальция, водородных ионов, активности ферментов: лактатдегидрогеназа, амилаза, аспартат-аминотрансфераза, креатинкиназа; концентрации ионов натрия, калия. Концентрация креатинина не связана с величиной ЛИ.

  16. Получена динамика влияния слюны на биотест в течение дня, для людей живущих в одинаковых условиях(температура, питания, работа.) Диплом Черняева В.2011г.

  17. Получено влияние слюны на биотест после приема пищи Диплом Черняева В.2011г.

  18. Эффект употребления стероидов на результаты биолюминесцентного теста анализ биологической жидкости спортсмена, не употребляющего стероиды. анализ биологической жидкости спортсмена, употребляющего стероиды

  19. влияние возраста, пола, веса на реакцию биолюминесценции

  20. Результаты

  21. Хранение

  22. Выводы • 1 Обнаружена индивидуальная реакция организма на физическую и умственную нагрузку, деление на 3 типа • Предположено, что такие факторы как: концентрация химических элементов, пол, вес, возраст, питание, применение препаратов влияют на биферментную систему • 3 Выбран оптимальный состав реакционной смеси для обеспечения наибольшей чувствительности биолюминесцентного метода контроля стресса, связанного с физическими и умственными перегрузками • 4 Показано, что анализ слюны должен быть проведен в течение 4 часов после пробоотбора.

More Related