Estudio de caso
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Estudio de Caso. Selection and characterization of BCR-ABL positive cell lines with differential sensitivity to the tyrosine kinase inhibitor STI571: diverse mechanisms of resistance BLOOD, 1 AUGUST 2000 • VOLUME 96, NUMBER 3. Leucemia Mieloide Cr ónica. Translocaci ón t(9;22)(q34;q11).

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Estudio de Caso

Selection and characterization of BCR-ABL positive cell lines with differential sensitivity to the tyrosine kinase inhibitor STI571: diverse mechanisms of resistance

BLOOD, 1 AUGUST 2000 • VOLUME 96, NUMBER 3


LeucemiaMieloideCrónica

  • Translocaciónt(9;22)(q34;q11)


LeucemiaMieloideCrónica

Resultado: Gen BCR ABL


Gen BCR – ABL

  • La translocación genera unaproteínaquimérica (de la unificación del gen BCR y ABL), la cualocasionaunaproteína con actividadtirosinquinasadesregulada.


CascadaTirosinquinasa


Desarrollo de medicamento

  • STI571, inhibidor de la tirosinquinasa, derivado del 2 –fenilaminopirimidina. Estainhibecompletamente el enlace entre el ATP y el dominio ABL en concentracionesmicromolares. Inhibetambién la mayoría de laslíneascelularescromosomafiladelfiapositivas.

  • Sin embargo, algunascolonias de sangreperiférica o médulaóseasobreviven a la presencia del compuesto.


Objetivo del Estudio

  • Investigar el mecanismo de resistencia a STI571 mediante la generación de sublineascelulares, resistentes y sensibles en diferenteslíneasfiladelfiapositivas.

  • Se observaráque se presentaunasobreexpresiónsignificativa del gen en variaslíneascelulares.


Metodología 1: Southern Blot

  • Presencia del Gen


Metodología 2: Northern blot

  • Expresión del gen: cADN o ARN.


Metodología3: Western blot


Resultados: Norhtern blot


Reslutados: Western Blot


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