亲子鉴定与 DNA

1. 亲子鉴定与DNA • 亲子鉴定历史 • 亲子鉴定原理 • 鉴定的标准 • DNA指纹法 • 比较

2. 所罗门的审判： 大家都听说过所罗门的审判这样一件故事： 两位妇人都声称自己是孩子的母亲，于是 所罗门就命令一名侍卫把那个孩子带来，要用剑将其 辟成两半分给他们两， 结果假母亲同意所罗 门的判决，而孩子真 正的母亲却恳求侍卫 饶了孩子的性命，她 解释说：“把孩子给了 假母亲，总比让孩子 惨死好。”当然，真假母亲也就水落石出了。

3. 《十二铜表法》： 公元前449年左右，相当于我国春秋战国时期，古罗马制定了成文法典《十二铜表法》，它记载有最早的有关“亲子鉴定”的法律条文。即依据妊娠月数推定父权。

4. 鹬术察情: 在我国，有关亲权认定的最常见的方法有两种：一为“鹬术察情”，即先施诡计，后观其真情并作出判断。这种方法和千前面所说的所罗门断案法如出一辙。

5. 滴骨验亲法： 另一种方法就是“滴骨验亲”法。即以生者的血滴在尸骨上，观察血能否浸入骨内，浸入的则被认为两者有血缘关系，在各种古籍中有多种记录。 三国时代（公园220—280年）谢承著《会稽先贤传》中的《以弟血滴兄骨》可能是记录此法的最早的史料：陈业的哥哥因海难不幸殒命，当时一同遇难的有五六十人，并且尸体都已严重腐败而无法辨认死者的身份。陈业就用刀刺破自己的手臂将血分别滴在尸骨上，发现其血液只能浸入一具尸骨，其余皆不能。陈业就这样确认其兄的尸骨。

6. 合血法： 等到了明代，更是采用了“合血法”来识别亲权。明末清初的检验书籍中都有相同的记载：“亲子兄弟或自幼分离，欲相认识。难辨真伪。命各刺出血，滴一器内，真则共凝为一，否则不凝也。”

7. 现代亲子鉴定法： • ABO血型检查 • DNA指纹分析 • STR技术应用

8. ABO血型检查： 人的ABO血型是受三个复等位基因控制的，i为隐性基因，IA、IB为显性基因。决定ABO血型的基因型有6种，表现型有4种：A型、B型、 AB型和O型；根据孟德尔遗传规律，即可计算出孩子的可能血型的概率。

9. 从表中可知：孩子的血型不是惟一确定的，而是一个大小差别很大的概率事件。但是除了A型血与B型血的人婚配外，其他血型组合都有概率为0的不可能事件，即都有一些不可能出现的血型。因此，用红细胞进行亲子鉴定，只能否定，不能肯定。也就是只能做亲权排除。

10. DNA指纹 大家知道，每个人体细胞内都含有23对染色体，每条染色体中部含有一个DNA分子，DNA分子中的核苷酸序列包含着遗传信息，在DNA分子中存在三种类型：单拷贝序列、中等程度重复序列、高度重复序。 每个重复序列在300个核苷酸长度之内，由于高度重复，序列经过超离心后以卫星带出现在主要DNA带的附近，所以也称卫星DNA，其中的重复序列单元则称为“小卫星DNA”。 “小卫星”具有高度的可变性，但在“小卫星DNA “中有一小段序列则在所有个体中都一样，称为“核心序列”。如果把核心序列串联起来作为分子探针与不同个体的DNA进行分子杂交，就会出现各自特有的杂交图谱。它们与人的指纹一样具有专一性和特异性，因此称作“DNA指纹”。 通过对人类基因组的解析，发现人与人之间99．99％的碱基序列都相同，而剩下的0.01%的碱基特征序列则来自于双亲。据此可用于“亲子鉴定”。

14. 优点： • DNA指纹可以同时检测好些高度多态性位点，却只需要少量血样(不一定新鲜)．并对其它任何组织如被毛、皮屑等也同样有效． • DNA指纹不需要专门的实验室，程序相对简单．一个经过相应训练的技术员，在任何能够进行DNA重组工作的实验室里都可以完成，也不需要准备大量特殊试剂．若用非放射性标记的DNA探针则使用一般商业性试剂即可进行DNA指纹鉴定． • 随着探针和酶的增多，DNA指纹的分辨能力将会增强，足以处理父母未知个体的亲子鉴定问题．这是经典的血液和生化多态性方法无能为力的． • DNA指纹的实验室费用低．

16. PCR技术原理

17. 1953年，PCR技术开始被应用到法医鉴定中，它突破了“极微量”的生物学检材制约DNA检测技术应用范围的技术“瓶颈”，也是的用于亲子鉴定的检材几乎包括全部的人体组织，特别是那些陈旧的检材。 如1992年因国内务部法医服务中心主持和完成的俄国末代沙皇尼古拉二世、皇后亚历山德拉及其3位公主的遗骸身份鉴定工作，成为了当今亲子鉴定的经典之作。

18. STR(Short Tandem Repeats) 短串联重复序列(STR)是由2—6bp重复单位构成核心序列，是一种广泛分布在人类基因组中的DNA片段，主要由核心序列拷贝数目的变化产生长度多态性。 。 其最大的特点是具有很高的突变率，从而表现出广泛的多态性，适合于记录短期的进化事件，近年来已成为人类遗传学研究的有效遗传标记。 Y染色体是单倍体，呈父系遗传，除拟常染色体区域外，其余的Y染色体特异区不会发生重组，因此通过对Y染色体上DNA(Y—DNA)的系统分析可直接反映种族或人群的父系演化历史。Y—STR位于Y染色体的非编码区，属于Y染色体的特异区，利用其多态性，可研究在父系进化历史中发生的突变事件，探讨关系较近的群体之间的亲缘关系和他们之间存在的微进化关系

19. STR(Short tandem repeats) 如D5S818： 5’GGGTGATTTTCCTTTTGGT(AGAT)7-14TGTGGCTATGATTGGAATCA3’. 目前实验室鉴定常使用STR基因座有：TH01、VWFA31、TPOX、CSFIPO、FIBRA、DS1358、D7S820、D8S1179和D5S818。

23. 优点： STR分型具有很高的灵敏度和良好的重复性，分型结果稳定可靠。因此，STR技术较前者有更高的非父排除率和个人识别几率。STR位点的总识别率为0。9999999999999935，累计非父排除为99．999％，在亲子鉴定中已达到很高的水平，因此被称为“第二代DNA指纹”。STR位点在人类基因组中广泛分布，具有丰富的多态位点资源，而且扩增STR基因座仅需要少量模板DNA。联合使用多个STR位点，可满足各种需要。基于以上优点，近几年做亲子鉴定多使用STR技术

24. 应用范围： 产前亲子鉴定 此类鉴定主要针对遭遇性侵犯而怀孕的妇女，目的是确定其所孕胎儿与性侵犯事实的关联性，以便为当事人是否终止妊娠提供科学依据。其间才来源于羊水，因为羊水中含有胎儿的脱落细胞，羊水抽取的时间一般在怀孕12—20周内。

25. 无名尸骸的身份确定： 以往在此类鉴定中所面临的最大的难题就是：无法找到死者生前的合适检材进行检测比对，即使死者遗有带毛囊的头发或口腔上皮细胞等，但因传统的ABO血型以及血清型、红细胞酶型和人白细胞抗原（HLA）型等检测项目其检测效果很差。 同样，无名尸体的检材条件往往也不适合作上述检测。如果再采用亲子鉴定的方法确认死者与假设父母之间存在着亲生血缘的关系，同样可以确定死者的身份。但是当结果显示死者与假设父母都不存在亲生血缘的关系时，是不是可以得出排除该寺这不来源于该家庭的成员呢？答案是“不能确定，也不能排除”，因为从逻辑上将该检测结果不能排除该死者从其出生时就被换错的可能，而其父母也并不知晓。

27. 亲权认定标准： 从理论上讲，在鉴定中只要出现排除指标并且充分排除存在基因突变的可能，就可以以此作出排除存在亲权的结论。需要说明的是：其中最重要的一项参数就是总检测项目的累积非父排除率，既体现它排除假的父亲的鉴别能力，通用的标准是大于99.9%。当所有的检测项目都不显示排除结果时，利用被检测到的“遗传因子”在群体中出现的频率计算出相对亲权概率值后，以此判断争议父亲和孩子之间是否存在亲生血缘的关系，对于母亲—孩子—争议父亲三联体的亲权确定的评判标准一般为相对亲权概率值大于99.9%，孩子—争议父亲二连体的亲权确定的评判标准一般为相对亲权概率值大于99.73%。