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AMV 和 MMLV 逆转录酶的特性

AMV 和 MMLV 逆转录酶的特性. Marketing Dept Tim. Marketing Dept Tim. 什么是 AMV 和 M-MLV ？. AMV 来自禽成纤维病毒逆转录酶，引物延伸反应通常用 AMV ， AMV 性能更好，对次级结构耐受。用 AMV 的延伸温度可达 55℃, 以消除次级结构，但在这样温度下，引物延伸反应的得率通常降低。

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AMV 和 MMLV 逆转录酶的特性

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Presentation Transcript

  1. AMV和MMLV逆转录酶的特性 Marketing Dept Tim Marketing Dept Tim

  2. 什么是AMV和M-MLV？ • AMV来自禽成纤维病毒逆转录酶，引物延伸反应通常用AMV，AMV性能更好，对次级结构耐受。用AMV的延伸温度可达55℃, 以消除次级结构，但在这样温度下，引物延伸反应的得率通常降低。 • M-MLV来自鼠白血病逆转录酶，M-MLV的最适温度为37℃，在更高温度下，M-MLV不稳定，但M-MLV可合成更长的产物，这一特点对引物延伸反应不适用，因引物延伸反应所得的产物一般较短，为100-500个核苷酸。

  3. AMV和M-MLV的区别（一） • 如果RNA非常复杂，含有二级结构等，AMV保温温度要高，反转录效果要比M-MLV好AMV和M-MLV在本身的聚合酶活性之外，都具有内源RNaseH活性。 • AMV要比M-MLV RNaseH的活性要高-----RNaseH活性同反转录酶的聚合酶活性相互竞争RNA模板与DNA引物或cDNA延伸链间形成的杂合链，并降解RNA：DNA复合物中的RNA链。被RNaseH活性所降解的RNA模板不能再作为合成cDNA的有效底物，降低了cDNA合成的产量和长度，这点来说AMV不如M-MLV效果好。

  4. AMV和M-MLV的区别（二） 一般而言，M-MLV更优于AMV，也是市场主流产品；而AMV由于是禽类来源，用于禽流感检测较多

  5. 二代RT酶主要是MMLV突变酶

  6. Thanks！

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