СУНЦ МГУ - школа имени А.Н. Колмогорова

1. НИИ фармакологии им. В.В. Закусова РАМН КУРСОВАЯ РАБОТА СИНТЕЗ ДИПЕПТИДНОГО МИМЕТИКА НЕЙРОТРОФИНА BDNF Порфирьева Наталия Алексеевна Научный руководитель: аспирант Тарасюк Алексей Валерьевич Москва 2012 СУНЦ МГУ - школа имени А.Н. Колмогорова

2. Нейротрофины (neurotrophin, греч. neuron – нерв, trophe – питание) – семейство секретируемых белков, отвечающих за рост нейритов, дифференцировку, выживаемость и апоптоидную смерть нейронов. 2 • Сходное число АКО (118–120) • В структуре присутствует 6 цистеиновых остатков. • Характерна высокая степень гомологии – около 50% идентичности первичной структуры. • Каждый протомер состоит из 3-х пар антипараллельных β-тяжей, связанных 3-мя дисульфидными мостиками • Регулярные последовательности β-тяжей связываются нерегулярными участками, называемыми β-петлями.

3. 3 Рецепторы нейротрофинов Нейротрофины выполняют свои функции путем связывания с высокоаффинным трансмембранным тирозин-киназым рецептором Trk (Кd = 10-11M) и низкоаффинным рецептором p75 (Кd = 10-9M).

4. 4 Структура и фармакологические свойства BDNF Вовлечен в патогенез: • болезни Альцгеймера • болезни Паркинсона • болезни Хантигтона • амиотрофического латерального склероза • сенсорных нейропатий • депрессии • ожирения • эпилепсии • шизофрении Структура гетеродимера BDNF/NT-3 по данным РСА (файл 1B8M из Брукхавенской базы данных http://www.rcsb.org/pdb)

5. 5 Дизайн миметиков 4-й петли BDNF Петля II -Asp93-Ser94-Lys95-Lys96- Объект моделирования: β-изгиб 4-й петли BDNF Петля I Наиболее экспонированный участок молекулы, предположительно более доступный для взаимодействия с рецептором. Петля III МономерныйДимерный ГСБ -104Suc-L-Ser-L-Lys-NH2ГСБ -106[Suc-L-Ser-L-Lys-NH(CH2)3-]2

6. 6 Миметики на основе центрального фрагмента β-изгиба (-Ser94-Lys95) [Suc-L-Ser-L-Lys-NH(CH2)3-]2 Suc-L-Ser-L-Lys-NH2 (ГСБ-104) (ГСБ-106)

7. Биологическая активность Нейропротективные свойства пептидов in vitro 7 Нейропротективные свойства синтезированных соединений определяли на культуре клеток гиппокампа мыши линии НТ-22 в условиях оксидативного стресса, вызванного перекисью водорода. Определение жизнеспособности клеток проводили с использованием МТТ-теста Достоверность полученных данных P≤0,05 по критерию Стьюдента. v -достоверность относительно контроля, *- достоверность относительно H2O2

8. 8 Биологическая активность Антидепрессантные свойства ГСБ-106 in vivo в тесте по Порсолту Для выявлениявозможной антидепрессантной активности пептидомиметиков использовали тест «отчаяние» в оригинальной конфигурации [R.D.Porsolt, G.Anton, N.Blavet, M.Jalfre. European Journal of Pharmacology, 1978, v.47, p. 379-391] *- P<0,05 по критерию Mann-Whitney.( U-тест).

9. 9 Синтез гексаметилендиамида бис-(моносукцинил-серил-глицина) ГТ-105

10. Выводы • Синтезирован глицинсодержащий аналог ГСБ-106, миметик ГТ-105 • Полученное соединение было охарактеризованно температурой плавления, хроматографической подвижностью в тонком слое. Структура была доказана методом ПМР.

11. НИИ фармакологии им. В.В. Закусова РАМН КУРСОВАЯ РАБОТА СИНТЕЗ ДИПЕПТИДНОГО МИМЕТИКА НЕЙРОТРОФИНА BDNF Порфирьева Наталия Алексеевна Научный руководитель: аспирант Тарасюк Алексей Валерьевич Москва 2012 СУНЦ МГУ - школа имени А.Н. Колмогорова