Skąd ? ADVANCELL

1. Bank Komórek EukariotycznychTransfer Technologii do Centrum BioMoBiL25-29 / 10 / 2004Konrad Kleszczyński Jolanta Grzenkowicz – Wydra

2. Skąd ? ADVANCELL biotechnologiczna firma wdrożeniowa wykonująca usługi dla przemysłu w oparciu o ludzkie linie komórkowe (toksykologia, onkologia, dermatologia, choroby degeneracyjne mózgu) bankowanie komórek (156 linii) tworzenie i namnażanie nowych linii dla potrzeb lokalnego środowiska naukowego i ich dystrybucja kontrola jakości otrzymywanych linii komórkowych

3. PracowniaSOP Bazy danych Bankowanie Kontrola Jakości Sprzęt niezbędny do pracowni komórkowej: komora laminarna klasy II inkubator CO2 mikroskop świetlny z odwróconą optyką lodówka oraz zamrażarki: - 20 ÷ -30OC - 80OC system oczyszczania wody wirówki inny sprzęt

4. PracowniaSOP Bazy danych Bankowanie Kontrola Jakości Sprzęt niezbędny do przechowywania komórek (zbiornik Dewara): zbiornik na ciekły azot (3600 ampułek o pojemności 2 ml, poj. zbiornika 116 L, parowanie 0,6 L / dobę) zbiornik magazynowy na ciekły azot (poj. zbiornika 34 L, parowanie 0,25 L / dobę)

5. PracowniaSOP Bazy danych Bankowanie Kontrola Jakości Standardowe Procedury Operacyjne Standard Operating Procedures Zbiór szczegółowych instrukcji zapewniających jakość i spójność postępowania z komórkami. SOP obejmują: pobranie i przechowywanie próbek aparatura: obsługa, sprawdzenie działania, kalibracja odczynniki:potwierdzenie odbioru, oznakowanie, przepisy wykonania roztworu monitorowanie i rejestrowanie wszystkich czynności laboratoryjnych

6. PracowniaSOP Bazy danych Bankowanie Kontrola Jakości

7. Pracownia SOPBazy danych Bankowanie Kontrola Jakości • bazy danych służą do organizacji i zarządzania przechowywanymi próbkami • pełen dostęp do bazy danych ma administrator, który wskazuje miejsce złożenia bądź pobrania próbki • dostęp pracownika do bazy danych ogranicza się do wypełnienia formularza określonego przez SOP dostępnego w lokalnej sieci • codziennie wszystkie operacje są archiwizowane

8. PracowniaSOP Bazy danych Bankowanie Kontrola Jakości

9. PracowniaSOP Bazy danych Bankowanie Kontrola Jakości Usługi oferowane przez Bank Linii Komórkowych Udostępnianie i sprzedaż linii komórkowych Bezpieczny depozyt, krótko- i długoterminowy Identyfikacja i kontrola jakości linii komórkowych Usuwanie zanieczyszczeń Mycoplasma z hodowli komórkowej

10. PracowniaSOP Bazy danych Bankowanie Kontrola Jakości Przechowywanie linii komórkowych oraz ich dystrybucja Original Bank (OB) do 5 krioampułek Master Bank (MB) 10 - 15 krioampułek Distribution Bank (DB) 15 - 30 krioampułek 106 komórek / ml

11. PracowniaSOP Bazy danych Bankowanie Kontrola Jakości • Do podstawowych testów kontroli jakości należą: test immunocytochemiczny, test na obecność bakterii i test na obecność Mycoplasmy • Metoda detekcji mykoplazmy oparta jest na amplifikacji PCR z użyciem komercyjnego zestawu • Większość zanieczyszczeń hodowli komórkowych spowodowana jest przez następujące gatunki: M. arginini, M. fermentans, M. hyorhinis, M. orale, Acholeplasma laidlawii • Zanieczyszczoną hodowlę traktuje się antybiotykami będącymi pochodnymi tetracykliny (minocyklina, BM-cyklina) lub ciprofloksacyną

12. PracowniaSOP Bazy danych Bankowanie Kontrola Jakości C+ C- M 1 2 3 4 5 6 7 Elektroforeza w 2% żelu agarozowym produktów amplifikacji DNA C+ kontrola pozytywna C- kontrola negatywna M wzorzec masowy DNA 1-7 badane próbki hodowla zainfekowana zdrowa hodowla Mycoplasmą Barwienie wykonane wg Hoechst 33258

13. PracowniaSOP Bazy danych Bankowanie Kontrola Jakości