白细胞检验

1. 白细胞检验

3. 白细胞计数

4. 原理 用白细胞稀释液，将血液稀释一定倍数并破坏红细胞后，滴入计数池中，在显微镜下计数一定范围内的白细胞数，经换算即可求得每升血液中各种白细胞的总数。

5. 器材

7. 质量控制

8. 一、误差 • 技术误差：由于操作不正规或器材不精确造成的误差。这种误 差通过主观努力可以避免或显著减小 。 • 器材不符合要求 • 采血部位不当 • 稀释倍数不准 • 充液不当 • 血液发生凝固

9. 固有误差： • 包括计数域误差、吸管误差和计数室误差。 • 在计数室内计数的面积越大，计数的细胞越多，计数室和吸管使用的次数越多，误差越小。 • 若细胞数太低（＜3 × 109/L），可数8个大方格，或降低稀释倍数；若细胞数太高（＞15 × 109/L），可适当增加稀释倍数。

10. 二、有核红细胞的影响 校正公式： 　校正后的血细胞数/L＝X × 100/（100+Y） X：校正前的白细胞数 Y：白细胞分类计数时，计数100个白细胞的同时计数到的有核红细胞。

11. 例：某病人白细胞计数结果为5 × 109/L，白细胞分类计数时，计数100个白细胞的同时发现20个有核红细胞，请问该病人真正的白细胞计数结果为多少？ • WBC＝5 × 109 × 100/（100+20）/L ＝4 × 109/L

12. 三.常规考核标准（RCS） • RCS(routine checking standard) • RCS =（四大格的所见白细胞最大值－最小值）/四大格所见白细 胞平均值*100% • 白细胞≤4 × 109/L者，RCS＜30% • 白细胞（4.1－14.9）× 109/L者， RCS＜20% • 白细胞≥15 × 109/L者，RCS＜15%

13. 方法学评价

14. 血细胞分析仪法：操作简单、效率高、重复性好适合于大批量的标本血细胞分析仪法：操作简单、效率高、重复性好适合于大批量的标本 集中监测 缺点：仪器昂贵，准确性取决于仪器的性能及工作状态，使用前需进行仪器 的校准，坚持日常质控 显微镜计数法：操作简单、费用低廉，试用于基层医疗单位及分 散就诊 缺点：费时，重复性差，结果的准确性取决于操作者的技术水平， 作为仪器检验的校准

15. 白细胞分类计数Differential Count （ DC）

16. 一.外周血五种白细胞 • 中性粒细胞 : 中性杆状核粒细胞 中性分叶核粒细胞 • 嗜酸性粒细胞 • 嗜碱性粒细胞 • 单核细胞 • 淋巴细胞

18. 二.中性粒细胞形态 • 细胞呈圆形，直径10－15um • 细胞质丰富，呈粉红色，含较多细小、均匀、密集的针尖样的染淡粉红色的中性颗粒 • 细胞核为深紫红色，染色质致密成块状，粗糙 核最窄处＞1/3最宽处中性杆状核粒细胞 • 核最窄处＜1/3最宽处中性分叶核粒细胞

21. 嗜酸性粒细胞 • 细胞呈圆形，直径13－15um； • 胞核多为两叶，呈眼镜状，也可偶见分叶的，染色质粗糙染紫红色 胞浆内充满粗大、整齐、均匀、排列紧密的橘红色嗜酸性颗粒。

23. 嗜碱性粒细胞 • 细胞呈圆形，直径10－12um； • 细胞核常被颗粒遮盖，核着色较淡，模糊不清。 胞质量较少，呈淡红色，含少量粗大但大小不均、排列不规则，分布不均匀的紫黑色嗜碱性颗粒。

25. 单核细胞 • 细胞呈圆形或不规则型，直径15－25um。 核大，呈不规则圆形、肾形、马蹄形或不规则分叶，染色质细致疏松如网状，染色质和副染色质对比明显，染紫红色。 胞浆丰富，染淡蓝或灰兰色，呈毛玻璃样半透明，含大量细小、灰尘样的紫红色嗜天青颗粒。

28. 小淋巴细胞 • 细胞呈圆形，直径6－10um。 • 核呈圆形，偶见凹陷，染色质粗糙致密成块，染色质和副染色质界线不清。 胞质量少，仅在核的一侧出现一线天蓝或深蓝色胞浆，甚至完全不见。

30. 大淋巴细胞 • 细胞呈圆形，直径10－15um。 • 核呈圆形或椭圆形，常偏于一侧，染色质致密呈块状，但要比小淋巴细胞略为疏松，紫红色。 胞质丰富，呈透明天蓝色，常有少量大而稀疏的紫红色嗜天青颗粒。

31. 三.白细胞分类计数原理 (一).电阻抗法 　　　通过微孔的血细胞所产生的脉冲信号幅度与血细胞体积成正比。白细胞脉冲信号的大小由被计数细胞在溶血液中的大小决定。

32. REL NO WBC 小细胞 大细胞 中间细胞 fl R1 R2 R3 R4 白细胞体积分布直方图

33. (二).容量、电导、光散射（VCS）白细胞分类法 根据流体力学原理使用鞘流技术，使溶血后液体内剩余白细胞逐个通过检测器接受VCS三种技术的同时检测。 Coulter Maxm血细胞分析仪

34. 体积（volume V):细胞体积的大小 • 电导性（conductivity C): 细胞核与细胞质的比例、 颗粒的大小和密度 • 光散射(scatter S): 检查细胞膜表面特征和内部结构。光散射对细胞颗粒的结构和密度的区分能力强，粗颗粒产生的光散射比细颗粒强。

36. 淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞检测系统 采用电阻抗法（测量细胞体积）和射频（检测细胞核和颗粒密度）的联合检测。 细胞悬浮液中加入溶血剂使红细胞溶解，白细胞形态改变不大。当这些细胞通过检测系统时，同时进行直流和射频两种电流的检测。 以DC（细胞大小）信号为横坐标 ；以RF（核及颗粒的密度）为纵坐标 结果将细胞分成淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞三个群体。

37. 电阻法检测原理 射频检测原理

38. 手工分类计数方法 • 1、制作血片并染色，干燥后待用 • 2、低倍镜观察白细胞的数量、分布和染色情况 • 3、选择血涂片体尾交界处染色良好的部位，用油镜分类100－200个细胞 • 4、记录五种白细胞的细胞数

43. 一般体积小的细胞分布在头部和体部比较多；而尾部和两侧以中性粒细胞和单核细胞较多，异常大的细胞在片尾末端出现，所以在体尾交界处观察细胞。一般体积小的细胞分布在头部和体部比较多；而尾部和两侧以中性粒细胞和单核细胞较多，异常大的细胞在片尾末端出现，所以在体尾交界处观察细胞。 四.镜检部位

44. 白细胞总数＜3×109/L，分类50－100个细胞 白细胞总数＞15×109/L，分类200个细胞 其间的白细胞数，分类100个细胞

45. 五.记录方法 • 手工完全记录法：将所见的白细胞按其分类用“正”或“++++”的方法记录至所需总数 • 手工半记录法：用上法记录除中性粒细胞以外的各种白细胞，同时默记总数至所需细胞数 • 分类记数器法

46. 六.白细胞计数及分类计数的临床意义 • 分裂池：原、早、中 • 成熟池：晚、杆 • 储备池：杆、分 • 循环池：血液循环 • 边缘池：附着 骨髓 外周血

47. （一）、生理变化 1.年龄 2.日间变化: 3.运动、疼痛、和情绪的影响 4.妊娠和分娩 结论：白细胞计数波动在30%以下，在临床诊断上无意义， 只有通过定时和反复观察才有意义。

48. （二）.病理变化 1. 中性粒细胞增多 急性感染、严重组织损伤、急性中毒、急性大出血 白血病或恶性肿瘤。 2. 中性粒细胞减少 某些感染、某些血液病、慢性粒化损伤、自身免疫 性疾病、脾功能亢进。

49. （二）.病理变化 • 淋巴细胞增多 • 某些病毒、细菌感染、某些慢性感染、淋巴细胞 • 白血病 • 淋巴细胞减少 • 接触放射线及应用肾上腺皮质激

50. 七.嗜酸性粒细胞直接计数 • 原理: • 用嗜酸性粒细胞稀释液将血液稀释一定倍数，同时破坏红细胞和大部分其它白细胞，并将嗜酸性粒细胞着色，然后滴入细胞计数池中，计数一定范围内嗜酸性粒细胞数，即可求得每升血液中嗜酸性粒细胞数。