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第六章 转基因动物

第六章 转基因动物. 动物转基因技术. 一、显微注射法 ( Microinjection ) 原理： 将在体外构建的外源目的基因 , 在显微操作仪下用极细的微吸管注射到处于原核时期的受精卵的原核中，外源基因在受精卵繁殖过程中通过 DNA 的复制而整合到动物基因组中，再通过胚胎移植技术将整合有外源基因的受精卵移植到受体的子宫内继续发育，进而得到转基因动物。.

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第六章 转基因动物

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Presentation Transcript

  1. 第六章 转基因动物

  2. 动物转基因技术 一、显微注射法(Microinjection)原理： 将在体外构建的外源目的基因,在显微操作仪下用极细的微吸管注射到处于原核时期的受精卵的原核中，外源基因在受精卵繁殖过程中通过DNA的复制而整合到动物基因组中，再通过胚胎移植技术将整合有外源基因的受精卵移植到受体的子宫内继续发育，进而得到转基因动物。

  3. 1.目的基因的制备：注射用DNA应先用限制性内切 核酸酶消化成线性，并通过凝胶 电泳等方法回收目的基因片段。2.小鼠的准备： 提供受精卵的动物双亲最好是来自不同品系。3.受精卵的分离： 透明质酸酶处理受精卵，确认和选择受精卵。

  4. 4.显微注射： 1）用固定微吸管吸住一个受精卵，以见雄性原 核。 2）使DNA溶液充满注射针头部。 3）注射管插入受精卵，慢慢注入DNA溶液。 4）每个受精卵注射DNA的量为1—2pl。 5）注射后迅速拔针，以免核内物质或细胞质流 出。 6）将所有注射过的受精卵转入另一培养液滴 中，立即进行胚胎移植

  5. 5.受精卵的移植。6转基因小鼠的鉴定。

  6. 二、 逆转录病毒法： 将外源目的基因和LTR重组,再使之包装成为高 滴度 病毒颗粒。 三、 胚胎肝细胞法： 从哺乳动物早期胚胎的内细胞 团中分离出来的一种二 倍体细胞，可在体外培养并保持全能分化的潜能，因 此在适当的环境条件下它可形成胚系集落。 四、 精子载体法： 直接用精子作为外源DNA的载体，精子直接与外源 DNA混合培养时，外源DNA可直接进入精子头部，通 过受精将外源基因引入动物细胞中。 五、 体细胞移植法 六、 受体介导法

  7. 提高转基因效率的策略 一、对外源基因的整合机制进行深入的研 究 二、建立更完善的转基因方法 三、探索有效的阳性胚胎筛选方法 四、使用大的外源DNA片段 五、许多动物的启动子都可以启动连接在其后的外源基因的表达。 六、其他DNA顺序的影响

  8. 转基因动物的应用 一、转基因动物在基因功能等生命科学基础研究中的应用 二、转基因技术在动物育种中的应用 1.提高动物的抗病能力 2.提高动物生长速度 3.提高动物产毛性能 4.改良乳品品质 5.提高动物生存能力

  9. 三、转基因动物在医药科学研究中的应用 1．生产用于人体器官移植的动物器官 2.在药理中的应用 3.作为人类疾病模型 4作为生物反应器的应用

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