20 likes | 39 Views
cu00f4ng nghu1ec7 u0110iu1ec7n Di lu00e0 gu00ec? khoa hu1ecdc u0111iu1ec7n di tru00ean gel lu00e0 khoa hu1ecdc su1eed du1ee5ng u0111u1ec3 phu00e2n tu00edch nhu1eefng nucleic: DNA, RNA vu00e0 u0111u1ea1m.
E N D
công ngh? ?i?n Di và nh?ng ?i?u c?n b?n v? ?i?n Di công ngh? ?i?n Di là gì? k? thu?t ?i?n di trên gel là khoa h?c tiêu dùng ?? phân tách nh?ng nucleic: DNA, RNA và ??m. các lo?i phân t? ???c phân tích v?i nhau d?a vào t?c ?? v?n chuy?n c?a chúng trên 1 lo?i môi tr??ng bán r?n là gel. ph? thu?c vào lo?i nucleic mà s? có lo?i gel thích h?p. th??ng ngày ??i v?i DNA là Gel Agarose: xác nh?n ?? hi?n di?n c?ng nh? kích c? c?a s?n ph?m PCR; còn ??i v?i RNA và protein, th??ng tiêu dùng Acrylamide do nó có ?? phân gi?i cao h?n. S? v?n chuy?n c?a các phân t? ???c t?o thành b?i t? tr??ng, các phân t? có kích th??c to s? v?n chuy?n ch?m h?n và ng??c l?i. DNA di chuy?n t? c?c âm (-) sang c?c d??ng (+). T?c ?? di chuy?n c?a DNA tùy thu?c vào: l?c c?a ?i?n tr??ng, thành ph?n buffer, n?ng ?? gel, kích th??c phân t? DNA. Máy ?i?n di Hai lo?i Buffer solution th??ng s? d?ng trong k? thu?t ?i?n di: TBE và TAE. G TBE: phân tích ph?i ch?ng các s?n ph?m PCR có kích c? d??i 2kb, yêu thích ?? ?i?n di nh?n ra s?n ph?m PCR cho các b?nh bình th??ng ho?c nh?ng gen mong ??i. + ?u ?i?m: th?i gian dài ko b? nóng gel. +Nh??c ?i?m: Mu?i borat s? làm ng?n c?m ho?t ??ng c?a enzyme, VD nh? enzyme c?t n?i… làm gi?m t? l? thu h?i DNA t? gel -> n?u s? d?ng cho v?n d?ng v? sau thì không c?n s? d?ng. G TAE: ?i?n di các s?n ph?m có kích th??c l?n. + ?u ?i?m: Buffer có thành ph?n mu?i acetate ko thúc ??y, thúc ??y t?i nh?ng v?n d?ng v? sau -> Có th? l?y s?n ph?m PCR trong gel ?i?n di ?? cloning t?o dòng. + Nh??c ?i?m: Trong th?i kì dài d? x?y ra hi?n t??ng nóng gel -> không nên kéo dài th?i kì v?i ?i?n th? to. Nhu?m gel trong công ngh? ?i?n di: Có r?ng rãi lo?i hóa ch?t nhu?m gel nh? Ethidium bromide (EtBr), GelRed, GelGreen, SYBR…
Source: https://visitech.vn/ky-thuat-dien-di-nhung-dieu-co-ban-ve-dien-di/