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苹果提取物 对喉癌细胞增殖的抑制作用. 指导老师 : 张静 报告人 :王新建 侯艳华, 沈婷婷, 桑绍明 陈波, 蒋孝明, 李宇博. 研 究 背 景. 喉癌是来源于喉粘膜上皮组织的恶性肿瘤,是最常见的头颈部恶性肿瘤,其发病率目前有明显增长趋势,常用的化疗药物治疗其疗效不太理想。 治疗喉癌 ?????. 研 究 背 景. · 流行病学研究发现苹果的消费与降低心血管疾病以 及某些癌症的危险性有关。
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苹果提取物 对喉癌细胞增殖的抑制作用 指导老师 :张静 报告人 :王新建 侯艳华, 沈婷婷, 桑绍明 陈波, 蒋孝明, 李宇博
研 究 背 景 • 喉癌是来源于喉粘膜上皮组织的恶性肿瘤,是最常见的头颈部恶性肿瘤,其发病率目前有明显增长趋势,常用的化疗药物治疗其疗效不太理想。 • 治疗喉癌?????
研 究 背 景 ·流行病学研究发现苹果的消费与降低心血管疾病以 及某些癌症的危险性有关。 ·美国康奈尔大学研究所,《Fresh appleinhibitsbreast tumor cells in rats, the proliferation of inducing apoptosisits generation》 ·郑州大学教授苹果提取物对食管癌细胞 增殖、凋亡及相关蛋白表达的影响
苹 果 提 取 物 ·通过丙酮法萃取苹果,由于含有较多酚类物质,酪酸,丰富的果胶,维生素c等,具有抗氧化和肿瘤化学预防的作用,并可抑制某些肿瘤细胞生长。
目 的 与 意 义 ·苹果提取物对喉癌HEP-2细胞株增殖、凋亡的影响, 以了解苹果提取物对喉癌细胞生长的抑制作用 。 ·抗肿瘤作用及其机制的深入研究, 对于癌症的预防和治疗具有重要意义。 ·本实验将为开发高效、低毒、廉价 的绿色抗肿瘤新药提供理论基础, 对人类抗癌提供了新的思路
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苹果提取物的制备和储存 喉癌细胞的复苏与培养 技 术 路 线 实验分组(10个不同组) MTT法测定对喉癌细胞增殖抑制作用
倒置显微镜观察细胞形态 Hochest染色荧光显微镜观 癌细胞核形态变化 PI染色,流式细胞术分析细胞周期 记录结果分析讨论
关键问题及可行性 • 苹果提取物制备、最佳抑制浓度的确定 • 旋转蒸发仪、荧光倒置显微镜 、流式细胞仪、酶联免疫检测仪等各仪器的联系和使用 • 试剂提供与购买 • 时间的调配和经费预算
苹 果 提 取 物 制 备 将新鲜苹果洗净去皮去籽后均匀切成2mm 薄片 • 放入带盖的烧瓶中并置于冰块上, 以减少由于酶化反应而引起的颜色褐变。 • 100g苹果中加入 200ml 80% 丙酮( 1:2)在匀浆器内搅拌2min。 • 取出匀浆液放入接有真空泵的滤过瓶中,放置定性滤纸,抽滤。 • 收集滤过物置于旋转蒸发器中在45度 条件下旋转蒸发45min。 • 样品用去离子水 调节到终体积为 100ml并于- 80 度 储存。