一、实验目的学会鉴定生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的基本方法。

一、实验目的 学会鉴定生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的基本方法。二、实验原理（1）鉴定实验设计的理念：某些化学试剂 + 生物组织中有关有机化合物，产生特定的颜色反应。（2）基本原理 ①可溶性还原糖+ 斐林试剂→砖红色沉淀（水浴） ②蛋白质 + 双缩脲试剂→紫色反应 ③脂肪小颗粒 + 苏丹Ⅲ染液→橘黄色小颗粒（脂肪小颗粒 + 苏丹Ⅳ染液→红色小颗粒）（显微镜）

三、实验材料用具 1、实验材料:苹果、花生种子、鸡蛋蛋白 2、实验仪器：水浴锅,双面刀片,试管,试管架,试管夹, 烧杯, 小量筒,滴管,水浴锅，玻璃漏斗,研钵,石英砂, 纱布, 培养皿，载玻片,盖玻片,吸水纸,显微镜 3、实验试剂：

①斐林试剂必须现配现用，甲液和乙液（1:1）混合后再使用。①斐林试剂必须现配现用，甲液和乙液（1:1）混合后再使用。 ②不能在量筒中直接制备斐林试剂。 ③水浴加热时试管底部不要碰到水浴锅底部，试管口不要向着有人的地方。 1.可溶性还原糖的鉴定选材：含糖量较高的白色或近于白色的植物组织(排除色素对显色的干扰，苹果、梨最好）制浆：去皮、切块、研磨，制备组织样液：过滤：（用单层纱布）样液显色反应 2mL斐林试剂水浴2min 2mL组织样液现象：

在加双缩脲试剂时，先加A液，后加B液 2.蛋白质的鉴定鸡蛋蛋清稀释液（或黄豆组织样液）选材: 制备组织样液: 取一个鸡蛋 →敲破一小块蛋壳→吸取0.5mL蛋清→加入5mL蒸馏水→搅拌均匀 3-4滴双缩脲B液 2mL双缩脲A液显色反应 (创设碱性条件) (提供Cu2+) 2mL组织样液现象：

①注意花生子叶徒手切片方法（书本17页右下角）。①注意花生子叶徒手切片方法（书本17页右下角）。 ②染色后一定要用50%的酒精溶液洗去浮色，染色和洗浮色时间不宜过长。 ③注意显微镜的使用。 3.脂肪的鉴定取材：花生种子（浸泡３－４h），去皮，将子叶削成薄片 ①选取最薄的薄片移至载玻片中央 ② 在薄片上滴加苏丹Ⅲ染液2 － 3滴，染色２－３min 制片： ③滴加体积分数为50%的酒精溶液1—2滴，1-2min洗去浮色 ④吸去余液，滴1-2滴蒸馏水，盖上盖玻片，制成临时装片显微观察：先在低倍镜下找到已着色的薄片，后用高倍镜观察现象：

1.可溶性还原糖的鉴定 刚配制的斐林试剂2mL 研磨过滤水浴2min 观察苹果匀浆样液样液2mL + （甲液：乙液=1:1） 2.蛋白质的鉴定双缩脲试剂A液2mL 双缩脲试剂B液3~4滴摇匀鸡蛋蛋清稀释液2mL 观察观察 3.脂肪的鉴定苏丹Ⅲ染液2~3滴染色 2~3min 50%的酒精溶液1—2滴取最薄片于载玻片中央去皮切片花生种子子叶吸去余液，滴1~2滴蒸馏水，盖上盖玻片显微镜观察洗去浮色 1~2min 临时装片

斐林试剂 双缩脲试剂检测对象试剂组成试剂用法检验结果斐林试剂与双缩脲试剂的比较：还原性糖蛋白质甲液:0.1g/mLNaOH 乙液:0.05g/mLCuSO4 A液:0.1g/mLNaOH B液:0.01g/mLCuSO4 甲液与乙液先混再用，且现配现用，需加热先加A液，再加B液，不需加热溶液变成紫色生成砖红色沉淀

一、实验目的 学会鉴定生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的基本方法 。