植物组织培养实验

植物组织培养实验 之一：培养基配制

一、实验目的 掌握培养基的配制方法，为烟草组织培养准备好培养基二、实验内容配制：MS + NAA 0.1mg/L + 6-BA 1.0mg/L 三、实验步骤（一）母液配制（参照MS培养基配方）大量元素——N、P、K、Ca、Mg、S 微量元素——I、B、Mn、 Zn 、 Mo 、 Cu 、 Co 铁盐——Fe 有机化合物——肌醇、烟酸、盐酸吡哆醇、盐酸硫胺素、甘氨酸植物生长调节剂——NAA、 6-BA

（二）每L用量及配制方法 1、先在搪瓷量杯中加入约700ml蒸馏水，依次加入下列组份并搅拌溶解：大量元素 10X 100ml CaCl2 100X 10ml 微量元素 100X 10ml 铁盐 100X 10ml 肌醇 100X 10ml 烟酸 0.5mg /ml 1ml 盐酸吡哆醇 0.5mg /ml 1ml 盐酸硫胺素0.1mg /ml 1ml 甘氨酸 2.0mg /ml 1ml NAA 0.1mg /ml 1ml 6-BA 1.0mg /ml 1ml 蔗糖 30.0g （要求每个大实验台上的8名同学共配500ml，注意用量减半）

2、定容到1000ml。 3、测 pH 并调到5.8。 4、加琼脂7.0g，加热熔化(煮沸2次)，补充蒸馏水至1000ml刻度液面。 5、分装到试管。每人共分装2管，每管培养基液面高度2-3cm。拧盖密封。 6、高压蒸汽灭菌。121 ℃ 15-20 min 。本灭菌锅从进到出 2 hr。 7、冷却凝固，4－10 ℃下贮存，为下次备用。

植物组织培养实验 之二：烟草组织培养

一、实验目的 掌握无菌操作方法和烟草组织培养中的快繁技术二、实验内容烟草叶片愈伤组织的转接与培养三、实验原理全能性激素调控四、实验步骤 1、本无菌室的设计及仪器使用介绍 2、本实验的几种灭菌法介绍 3、本实验所用的培养基： MS + NAA 0.1mg/L + 6-BA 1.0mg/L 4、外植体：从烟草种子经无菌培养获得的烟草叶片愈伤组织

5、进入无菌室和操作前的准备。冼手、鞋套、酒精棉花擦手和桌面。 6、取材和接种。在超净台上按无菌操作法从培养皿中钳取1块带叶片的愈伤组织到置于台面上的已预先灭菌的滤纸上，用解剖刀切分成约0.5cm见方的小块，用镊子放入琼脂固体培养基上的中部。每人接种1管。软木塞封口，加盖。 7、培养。置培养架上26 ℃ 4000 lux 日光灯下培养。用记号笔在试管玻壁上方写上名字和日期。拍照。培养时间2周。2周后将试管带走。挂或置于有光的寝室窗台上继续培养观察。五、结果和讨论每周观察培养物的生长发育和污染状况，拍照和文字记录。与其他组的结果对比。来培养室的观察时间选在每周二到周四（白天有人）。六、报告提交

起始对照

植 物 组 织 培 养 实 验