轉基因雞的研究策略

轉基因雞的研究策略 鳳寧工作室 ‹頁尾›

哺乳動物常用的轉基因方法 • 多數哺乳動物受精卵的早期, 將外源基因直接注入到受精卵的雄原核中，此時的受精卵仍處於單細胞期，通過顯微注射等方法將外源基因導入受精卵的原核內,雌雄原核融合時,外源基因就有機會插入到受體DNA上 ‹頁尾›

轉基因雞的不同 • 雞卵結構特殊, 卵子位於卵黃表面,受精後,雄原核被脂粒遮掩。雞卵子中有大量的卵黃，而且脆弱，細胞核不易識別，操作難度大，受精卵雄原核的顯微注射法很難在轉基因雞中應用 ‹頁尾›

轉基因雞的研究方法 • 精子載體法 • 操作產蛋後的胚胎 • 反轉錄病毒載體法 • 脂質體介導法 • 原始生殖細胞（PGCs）法 ‹頁尾›

精子載體法 • 是利用精子攜帶外源基因，經人工授精後通過精卵自然結合而獲得轉基因禽類 • 這種方法操作簡單、易於大量制備，但重複性較差 ‹頁尾›

操作產蛋後的胚胎 • 對受精卵排出體外後,特定的一些類似的乾細胞(ES)和能發育成生殖細胞的原始生殖細胞(PGCs)進行轉基因操作 ‹頁尾›

反轉錄病毒載體法 • 具有復制能力的野生型病毒 • 復制缺陷型病毒 • 單循環載體病毒 ‹頁尾›

反轉錄病毒載體法是目前培育轉基因禽類最有效和最成功的方法，該法操作簡單，基因表達效率較高，而且可以遺傳給後代。反轉錄病毒載體法是目前培育轉基因禽類最有效和最成功的方法，該法操作簡單，基因表達效率較高，而且可以遺傳給後代。 • 但是反轉錄病毒載體所攜帶的基因片段長度有限，且經常丟失，同時，使用反轉錄病毒載體存在生物安全問題，部分載體具有瘤和引起病毒血症的潛在危險 ‹頁尾›

脂質體介導法 • 脂質體 • 脂質體介導的DNA轉移不如用反轉錄病毒的整合效率高，但安全性高，操作簡單，要求技術條件比較容易滿足 ‹頁尾›

原始生殖細胞（PGCs）法 • PGCs是精子和卵子的前體細胞，因而作為媒介是變更基因組的潛在靶細胞 • 在禽類，通過體外遺傳操作將外源基因轉入PGCs中，再把這些PGCs重新注入雞的第X期胚盤，或者同期的血管中，這樣可獲得整合有外源基因的性系嵌合體 ‹頁尾›

綜上所述，對產蛋後的胚胎進行遺傳操作與顯微注射相比技術難度低，操作簡單，個體的成活率高，但獲得的都是嵌合體，只有通過雜交篩選才能獲得真正意義上的轉基因雞。不過，與哺乳動物相比，雞的世代間隔短，性成熟早，在一定程度上彌補了後期冗長的篩選工作。因而，這些方法仍被看好，被許多研究者所利用 ‹頁尾›

轉基因雞的研究策略

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