PGN

1. IBα IKK PGN IKK IKK Zimosano Lipopéptidos diacil Peptidoglicano Lipopéptidos triacil Peptidoglicano TAB1 U TAK1 TAB2 TRAF6 U Lipopolisacárido IRAK1 P TIRAP TRL2 TRAF6 TRL1 TRAF6 P IRAK1 P No identificado IRAK1 MyD88 U TAB1 TRL10 TAK1 IRAK2 IRAK4 TRL2 TRL6 TAB2 TRL2 TRL10 TRL6 TRAF6 U TRL9 TRL5 ADN CpG TRL4 Flagelina TRL9 TRL5 TRL4 TRL11 P P TRL3 P p50 p65 P P TRL3 TRL11 U TRL8 TRL8 U P TRL7 P Molecula similar a profilina P p50 p65 p65 TRL7 p50 ARNdc ARNmc ARNmc El tratamiento con peptidoglicano potencia la replicación del VIH-1 en linfocitos T humanos de sangre periférica María Rosa López-Huertas, Mayte Coiras, José Alcamí Expresión de receptores TLR Sistema inmune innato Tejidos no inmunes Sistema inmune adquirido Objetivos Actividad transcripcional de NF-B Expresión de TLR2 En células T de sangre periférica se estudiará la influencia del tratamiento con PGN en: Liberación citoquinas Replicación del VIH-1

2. PGN TLR2 -Actin B B B LUC 8000 REN 7000 REN 6000 Basal IFN-  5000 PGN IL-6 4000 REN IL-1 p65/RelA 3000 TNF- aCD3 2000 Citosol IB 1000 -Actina 0 Basal PGN 30' PGN 4h PGN 24h PGN NL-4.3Renilla PGN p65/RelA * x 3.6 p65-P Núcleo IB * RLUs -Actina x 4.3 * * x 4.1 x 2.2 RESULTADOS Expresión de TLR2 Proteína TLR2 RNA TLR2 En superficie Intracelular PGN PGN PGN PGN PGN PGN - - - 30’ 30’ 99% 80% - 23.0% 3.1% 75.3% 1.4% 3.6% 83.4 % CD3 CD3 30' 4h 24h - CD4 CD3 30’ 15.0% 18.2% 24h 24h 4h 4h 30’ 75.9% 80.1% 4.7% 23.0% 2.1 1.7 1.0 1.6 TLR2 TLR2 TLR2 TLR2 Liberación citoquinas Actividad transcripcional de NF-B Western-blot - 30’ 4h 24h Transactivación Replicación del VIH-1 - 30’ 4h 24h

3. PGN p50 p65 TRL1/6 TRL2 CONLUSIONES • 1) Los linfocitos T humanos expresan receptores TLR2 funcionales, cuya expresión es regulada por PGN, su propio ligando. • 2) La proteína TLR2 se acumula en el citoplasma y está disponible para translocarse a la superficie celular tras la estimulación. • 3) El tratamiento con PGN: • Aumenta la actividad transcripcional de NF-B mediante la inducción de la fosforilación de p65/RelA y la degradación de su inhibidor IB en el núcleo. • Induce la liberación de las citoquinas proinflamatorias IL-1, IFN-, IL-6 y TNF. • Potencia significativamente la replicación del VIH-1. Los productos microbianos pueden inducir directamente la activación policlonal de las células T Incremento de la carga viral en enfermos de VIH-1: - co-infectados - tras la vacunación La activación crónica del sistema inmune