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第九章 高效毛细管电泳

第九章 高效毛细管电泳. Capillary Electrophoresis, CE. 毛细管电泳 是带电粒子在电场力的驱动下，在毛细管中按其淌度或分配系数不同进行高效、快速分离的电泳新技术，也称为高效毛细管电泳 。 20 世纪30 - 40年代蒂塞利乌斯 (A. W.K. Tiselius) 建立了移动界面电泳 ， 将电泳发展成分离技术，1981年 J.W.Jorgenson ， K.D.Lukacs 在实验上和理论上为毛细管电泳的发展奠定了基础。 Tiselius 获得1948年诺贝尔化学奖。

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第九章 高效毛细管电泳

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  1. 第九章 高效毛细管电泳 Capillary Electrophoresis, CE

  2. 毛细管电泳是带电粒子在电场力的驱动下，在毛细管中按其淌度或分配系数不同进行高效、快速分离的电泳新技术，也称为高效毛细管电泳。 • 20世纪30-40年代蒂塞利乌斯(A.W.K.Tiselius)建立了移动界面电泳，将电泳发展成分离技术，1981年J.W.Jorgenson，K.D.Lukacs在实验上和理论上为毛细管电泳的发展奠定了基础。 Tiselius获得1948年诺贝尔化学奖。 • 毛细管电泳因其极高的柱效和极强的分离能力，在20世纪后20年是分析化学领域发展最迅速的分离分析方法。

  3. 毛细管电泳法 • 一、毛细管电泳的原理 • 二、分离模式 • 三、进样与检测 • 四、毛细管电泳的应用

  4. 一、毛细管电泳的原理 装置原理图分离场所为毛细管 内径75-150μm 毛细管 数据处理 电极 检测器 电极 试样 缓冲液 缓冲液 高压电源 （可高至30KV）

  5. 电泳和电渗流 电泳是指在电场作用下，溶液中的带电粒子作定向移动的现象。 电渗流是指在电场作用下，毛细管或固相多孔物质内液体沿固体表面移动的现象，形成电渗流。

  6. 二、毛细管电泳的主要分离模式 1 毛细管区带电泳 2 胶束电动色谱 3 毛细管凝胶电泳 4 毛细管等速电泳 5 毛细管电色谱

  7. 1 毛细管区带电泳 CZE 也称为毛细管自由溶液区带电泳，是毛细管电泳中最基本的操作模式，应用最广泛，是其它各种操作模式的母体 。

  8. 2 胶束电动色谱 电动色谱:是以电渗流驱动的一种色谱技术。 胶束电动色谱MEKC: 是以胶束为假固定相的一种电动色谱，是电泳技术和色谱技术的结合 加入高于胶束临界浓度的表面活性剂

  9. 第22章 3 毛细管凝胶电泳 CGE是毛细管自由溶液区带电泳派生出的一种电泳方式，用多孔性的凝胶或其它筛分剂作介质，网状结构，按分子的大小分离。

  10. 4 毛细管等速电泳 毛细管等速电泳分离是建立在试样中各组分的电泳淌度不同，等速电泳中被分析试样进样前后分别使用前导电解质溶液和终结电解质溶液，分离后的各组分区带以相同的电泳迁移速度通过检测窗口。

  11. 等速电泳机理图

  12. 5 毛细管电色谱 • 以电渗流驱动流动相，开管和填充两种。比高效液相色谱具有更高的柱效 。

  13. 三、进样与检测 1 进样方法 • 电动进样 也称电迁移进样. 方法:将毛细管的进样端插入装有试样溶液的试样管中，试样管中插入电极，与检测端的缓冲液间施加进样电压，并维持一定时间，试样溶液在电泳和电渗流作用下进入毛细管，然后再将试样溶液换成缓冲液，电泳即可进行。

  14. 流体动力学进样 也称为虹吸进样、重力进样、压差进样。 方法:毛细管进样端插入试样溶液容器，通过进样端加压，或检测端出口减压，或调节进样端试样溶液液面大于出口端缓冲液液面高度，利用虹吸现象，使进样口端与出口端形成正压差，并维持一定时间，试样在压差作用下进入毛细管进样端，再把进样端放回缓冲液液槽中，进行电泳 。

  15. 2 检测方法 在毛细管上开一个检测窗口进行在柱检测

  16. 四、应用 • 阵列毛细管凝胶电泳分析DNA序列 • 硬件由十六条毛细管组成阵列 • 用氩激光激发荧光检测，CCD检测器接收荧光 • 可以进行连续地大规模地基因测量

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