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第三章 遗传物质的分子基础. 第一节 DNA 作为主要遗传物质的证据. 一 、 DNA 作为主要遗传物质的间接证据 : 1. DNA 含量恒定 : 体细胞: 2C 配子 : 1C 多倍体 :成倍增加 2.代谢 较稳定 : 利用放 射性 与非放 射性元素进行标记 , 其它分子:合成 分解 3.突变: 紫外线诱发突变时,最有效的波长均为260 nm ; 与 DNA 的紫外线吸收峰是一致 ;
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第一节DNA作为主要遗传物质的证据 一、DNA作为主要遗传物质的间接证据: 1. DNA含量恒定: 体细胞:2C 配子: 1C 多倍体:成倍增加 2.代谢较稳定: 利用放射性与非放射性元素进行标记, 其它分子:合成 分解 3.突变: 紫外线诱发突变时,最有效的波长均为260 nm; 与DNA的紫外线吸收峰是一致; 证明基因突变与DNA分子的变异密切联系。 4. 通用性:(低等生物高等生物)
二、DNA作为主要遗传物质的直接证据 1.细菌的转化实验: ──────────────────────── 肺炎双球菌 特征 抗原型(稳定) ──────────────────────── 粗糙型(R) 无荚膜、粗糙菌落、无毒 RⅠ、RⅡ 光滑型(S) 有荚膜、光滑菌落、有毒 SⅠ、SⅡ、SⅢ 格里费斯 (1928): 肺炎双球菌定向转化试验: RII小鼠成活 SIII小鼠死亡 SIII65℃杀死小鼠成活 RII + SIII (65℃)小鼠死亡重现SIII型
杀死的SIII 不影响转化 推断:RII SIII Avery (1944): 排除 糖、蛋白质、RNA 说明:DNA是转化子。 抑制转化 RII colonies
2. 噬菌体的侵染与繁殖 赫尔歇 (Hershey)实验 : 同位素: 32P-DNA* 35S-蛋白质* 结论: 进入菌内的是DNA 遗传给子代噬菌体DNA
3.烟草花叶病毒的感染和繁殖 烟草花叶病毒简称TMV (Tobacoo Mosaic Virus)。 (1)TMV的蛋白质外壳和单螺旋RNA接种: TMV 蛋白质 烟草 不发病 分离不到 TMV颗粒 TMV RNA 烟草 发病 分离到新的TMV TMV RNA + RNA酶 烟草 不发病
(2)重组TMV的感染 A=TMV B=HR RNA决定: a. TMV的毒性 b. 子代TMV 的 RNA和蛋白质
第二节 核酸的化学结构 • 一级结构 戊糖+碱基=核苷 核苷+磷酸=核苷酸 核苷酸 核酸 DNA长度:bp-base pair kbp (kb)-klio-bp 磷酸二酯键
2. DNA二级结构: A-DNA:右手螺旋,大小沟,11nt / 圈, 高盐,DNA-RNA,RNA-RNA B-DNA:右手螺旋,大小沟, 10.4 nt / 圈,生理状态DNA。 Z-DNA:左手螺旋,单沟,12 nt / 圈。
第三节DNA的复制 • 半保留复制 • 引物-RNA • 原核:10-60 nt; 真核:10 nt • 3. 冈崎片段 • 原核:1000-2000 bp; 真核:10 bp
第四节RNA的转录与加工 一、几个概念: 有意义链(+) 对应密码子 反意义链(-) 模板链 转录方向:5’3’
二、原核生物RNA转录: 转录单位:启动子终止子,多个基因 1. RNA聚合酶: 2. 启动子: 共有序列 (consensus sequence) -35区:TTGACA (识别序列) -10区:TATAAT (酶结合区:Pribnow box) 3. 终止子: ρ-dependent , ρ-independent ’ ω σ
三、真核生物 RNA 的转录与加工 (一)转录 1. 一个转录单位一个基因。 2. 转录在核内进行。 3. 三种RNA聚合酶: RNA聚合酶I : rRNA ( rDNA 基因) RNA聚合酶II : 5S、tRNA 和 SnRNA 三种基因。 SnRNA叫做小核RNA,起调节作用。 RNA聚合酶III :mRNA 4. 启动子: -25 TATA box (TATAAAA) -80 CAAT box (GGCCAATCT) 5. 转录因子(TF):聚合酶+TF 与DNA接合
(二)mRNA的修饰 • 5’加帽: • 3’加尾: • 中间剪切: tRNA:内切核酸酶 剪切连接酶 rRNA:自剪切 核酶-rRNA本身 mRNA:剪切体=sn RNA+蛋白质 外显子(exon) 内含子(intron)
第五节蛋白质合成 —— 翻译 一、几个概念: 1. 密码子 (mRNA) 64个22种氨基酸 起始密码子:AUG(GUG) 终止密码子:UAA UAG UGA 同义密码子-简并:例如GU_:缬氨酸 2. 反密码子(tRNA): 摇摆学说:一个反密码子可以与多种密码子识别
注意: mRNA读码方向! 二、蛋白质合成过程 :
反转录: 以RNA为模板在逆转录酶催化下合成DNA。肿瘤、艾滋病: RNADNARNA;基因工程应用。 • RNA自我复制: 某些RNA病毒的繁殖: RNARNA。 • DNA指导的蛋白质合成: