福立液相在饲料行业中的应用解决方案

1. 福立液相在饲料行业中的应用解决方案 浙江福立分析仪器有限公司

2. 目录 • 背景 • 高效液相色谱基础知识 • 福立液相介绍 • 典型应用案例 • 福立公司简介

3. ㈠ 背景

4. 背景--国家政策 国务院：《中华人民共和国食品安全法》 2010年 2011年 国家质检总局：2011年9月1日实施《进出口饲料和饲料添加剂检验检疫监督管理办法》 农业部：2012年5月1日起施行《饲料和饲料添加剂管理条例》 农业部：2012年12月1日起施行《饲料生产企业许可条件》、《混合型饲料添加剂生产企业许可条件》 2012年 农业部：2013.1.1 《饲料原料目录》开始实施 环境保护部、农业部：《全国畜禽养殖污染防治“十二五”规划》 2013年 台湾：外销食品及饲料厂场危害分析重要管制点管理系统验证基准 国务院：《饲料工业“十二五”发展规划》

5. =353项 ∑ 背景--标准类别 共37项 共48项 饲料原料 产品标准 共71项 饲料原料 综合标准 饲料标准 饲料添加剂 方法标准 共127项 共70项

6. 薄层色谱法 酶免疫法 其他 药物、毒素残留分析 主成分分析 在353项标准中，含仪器分析标准共计162项 重金属分析 违禁添加剂分析 背景--标准整理 高效液相色谱法 原子吸收分光光度法 气相色谱法 紫外-可见光分光光度计

7. 背景--数据分析

8. 背景--结论 高效液相色谱！

9. ㈡高效液相色谱基础知识

10. 色谱--起源

11. 色谱--定义 • 色谱法：利用组分在两相间分配系数不同而进行分离的技术 • 流动相：携带样品流过整个系统的流体 • 固定相：静止不动的一相，色谱柱 色谱是一种分离技术 色谱的主要目的是对混合物中的目标物分离和定量

12. 高效液相色谱 • 液相色谱：以液体为流动相的色谱分离方法 色谱优点 • 同时分析 • 分离性能好 • 灵敏度高（ppm-ppb) • 进样量小（1-100uL） 适用范围 • 适用于高沸点、大分子、强极性和热稳定性差的化合物的分析 • 流动相具有运载样品和选择性分离的双重作用

13. 高效液相色谱仪简易流程图

14. 储液系统--溶剂 流动相案例Ⅱ 流动相案例Ⅰ 流动相案例Ⅲ 农业部1068号公告-4-2008 饲料中氯米芬的测定 高效液相色谱法 甲醇-磷酸溶液=75：25，摇匀后，以三乙胺调PH至7.5 GBT 17813-1999 复合预混料中烟酸、叶酸的测定 取500mL去离子水，加10ml冰酸,1.3 mI三乙胺，20mI己烷磺酸钠，去离子水定容至1L，调节pH为3.2，取上述溶液850mL与150m L甲醇混合 GBT 17778-2005 预混合饲料中d－生物素的测定 流动相：850m L三氟乙酸溶液加 150m L乙腊(色谱纯)。 流动相：酸、碱、强极性、强腐蚀等性质 • 储液瓶足够容量，且为玻璃等惰性材料 • 过滤沉子孔径22um，惰性材料 • 管路材料需要耐腐蚀，呈惰性 • 系统亦需惰性材料

15. 输液系统--输液泵 恒流泵：是在一定操作条件下，输出流量保持恒定而与色谱柱引起阻力变化无关 恒压泵：指能保持输出压力恒定，但其流量则随色谱系统阻力而变化，故保留时间的重视性差 恒流输液泵 恒压输液泵 ∵输出流量恒定，压力平稳，可调范围宽，便于迅速更换溶剂及耐腐蚀等要求， ∴恒流泵正逐渐取代恒压泵

16. 输液系统--输液泵---输液原理 吸液： 柱塞由泵腔向外运动从单向阀进口向上形成较低压力，进口单向阀被打开，流动相进入泵腔。由于系统压力大于泵腔压力，出口单向阀被关闭。 排液： 柱塞向泵腔内运动，进口单向阀关闭。出口单向阀打开，流动相进入 色谱系统。

17. 输液系统--输液泵---单向阀 出口 单向阀 进口单向阀安装在泵头的下部出口单向阀安装在泵头的上部这样有利于气泡的排出，阀体是不锈钢的，里面装宝石小球，安装在阀体进口端的是宝石球座，在出口处装有筛网。液体向反方向流时（从上往下）球落入宝石球座内，阻止液体回流。 进口 单向阀

18. 输液系统--输液泵 ---双柱塞并联输出泵 原理： 双柱塞并联输出泵是由二个相同结构的泵头按照并联接法而构成，由于凸轮的凸点差180度，所以两根柱塞杆的运动永远相反，使色谱系统内的流动 相的脉动减小，流量平稳。 优点： 两个泵头结构对称，输出流量脉动小。 缺点： 结构较复杂，维护麻烦，成本较高。 液体 出口 液体 进口

19. 输液系统--输液泵 ---双柱塞串联输出泵 原理： 同样采用凸轮、双柱塞结构，但是两个泵头 的腔体体积差一倍，有单向法的泵头称为主 泵头，无单向阀的泵头称为副泵头，副泵头 的体积比主泵头小一倍。整个泵运行时，主 泵头泵出的液体有一半进入了色谱系统另一 半储存在副泵头内，主泵头在吸液时，副泵 头将储存的液体泵出进入色谱系统，这样周 而复始，使色谱系统内的流动相脉动减小， 流量平稳。 优点： 结构较并联泵简单，维护容易，装配简单， 成本低。 缺点：脉动比并联泵略大。 液体 出口 液体 进口

20. 输液系统--等度&梯度 等度洗脱： 流动相为单一或者混合溶剂 梯度洗脱： 当样品混合物组分的容量因子范围很宽，采用梯度冲洗方式，可以缩短分离时间，改善分离度与峰形，提高样品的最小检测量。

21. 输液系统--梯度效果图

22. 输液系统--高压&低压梯度系统 梯度洗脱装置： 高压梯度：用两台高压输液泵将两种溶剂输入 低压梯度：在常压下将四种溶剂（或多元溶剂）混合，然后用高压输液泵将流动相输入到色谱柱

23. 进样系统--进样器 ㈠ ㈡ ㈢ 注射器柱头进样： 样品直接注入高压流动相中，或者停泵进样，这样操作困难，精度差，会损坏微量注射器，进样量也受到限制（〈8μL）。 自动进样器： 自动进样器是由计算机自动控制取样、进样、复位、管路清洗等，从机械设计上增加重复性和进样准确性，低残留，亦可实现无人值守。 手动进样器： 由定子和转子组成的六通阀，通过手动切换进样器，实现在高压状态下用手推动进样针进样，重复性好，进样量准确。

24. 进样系统--进样器

25. 分离系统--柱温箱 • 分析结果重现性好 • 提高柱效 • 降低柱压 • 保证检测稳定性

26. 分离系统--色谱柱 结构：（厂家之间略有不同） 柱体：不锈钢，玻璃，聚四氟乙烯等 填料：化学键合的硅胶，树脂，凝胶等 滤帽：不锈钢烧结成不同孔径的筛板+PEEK帽子 柱头螺丝：与柱体匹配的螺帽 塑料堵头：各种颜色的塑料螺钉

27. 分离系统--色谱柱 • 反相（非极性）键合相 • 不同链长的烷基（C1 ~ C30 ）、苯基（氟代苯基、苯丙基、苯基己基等）等 • 正相（极性）键合相 • 硅胶（SiO2）、氨基（NH2）、二醇基（Diol）、氰基（CN）等 • 离子交换键合相 • 阳离子交换剂（磺酸基或羧酸基）、阴离子交换剂（季铵基或氨基） • 手性键合相 • 蛋白类，环糊精及其衍生物类、糖类、 纤维素类、淀粉类等 • 等

28. 检测系统--紫外检测器 • 原理：基于被分析组分对特定波长紫外光的选择性吸收 • 定量基础：朗伯－比耳定律，A＝εCl • 优点：1）对温度和流速不敏感 2）可用于梯度洗提 3）灵敏度高 • 缺点：仅适用于测定有紫外吸收的物质

29. 检测系统--紫外检测器 光 源：氘灯（190nm~600nm) 光电转换：光电池 单色器：滤光片 信号处理：对数放大器 光栅分光 用微机进行A＝logIo/It计算 流过池：分析型 控制电路：对整机进行控制 制备型

30. 检测系统--紫外检测器 噪音：没有样品时检测器的最大输出信号 漂移：检测器在一段时间内响应值的变化 重现性：检测器有关分析的参数的稳定性 线性动态范围：最大线性响应与最小检出限之比 最小检测限：样品产生两倍或三倍于噪音信号的浓度 信噪比 注意：最小检测限不是一个单纯的检测器指标，它实际上是评比 整个色谱系统的指标，包括了色谱系统、分离机理、色谱柱在内 的综合性指标，信噪比亦是如此

31. 数据处理系统--数据处理 色谱工作站是一种辅助色谱仪器采样、收集色谱检测器当中的电压信号数据分析处理的工作站辅助软件。

32. ㈢福立液相介绍

33. FL2200系列高效液相色谱仪 我公司FL2200-II四元低压梯度液相 色谱仪获得由中国分析测试协会主办， 中华人民共和国科学技术部批准的第十 三届北京分析测试学术报告会及展览会 (BCEIA2009) 金奖。 获奖理由： 采用四元低压梯度泵，泵前低压汇 流，泵后高压混合，性能良好。

34. FL2200色谱仪--淋洗架 点击添加标题文字 不锈钢烧结 耐酸 10um 过滤沉子 耐碱 1000mL容量瓶 耐腐蚀

35. FL2200色谱仪--管路

36. FL2200色谱仪--接头

37. FL2200色谱仪--输液泵 双柱塞串联式往复泵

38. 采用串联式泵头连接方式，减少单向阀数量的同时，降低成本和故障率采用串联式泵头连接方式，减少单向阀数量的同时，降低成本和故障率 • 往复柱塞泵液缸容积小，易于清洗和更换溶剂，适合于梯度淋洗 • 泵头以不锈钢为材料，耐酸耐碱，抗腐蚀，提高泵的使用寿命 • 采用创新的压力反馈技术，降低输液泵脉冲，提高泵流量的稳定性 • 精确的流量补偿校正功能

39. 1-主泵头、2-进口单向阀、3、18-M4紧固螺钉、4-出口单向阀、5-紧固螺钉和密封刃环、6-泵头连接不锈钢毛细管、7- M3紧固螺钉、8-清洗泵头、9-清洗头连接聚四氟乙烯管、10-清洗泵头管接头、11-密封圈、12-清洗密封圈、13-垫圈、14-弹簧、15-柱塞杆组件、16-导销、17- 左导销座

40. 聚醚醚酮(PEEK)材料的密封圈具有良好的化学稳定性和耐高温性能。聚醚醚酮(PEEK)材料的密封圈具有良好的化学稳定性和耐高温性能。 柱塞杆通常是人造红宝石材料，表面的光洁度和同心度高，与密封圈的密封性好，保证即使在高压下都不会出现漏液。 单向阀响应快、刚性和精度高,稳定性和密封性能好

41. 在线清洗蠕动泵 独特的在线柱塞杆清洗功能，可设 置时间程序实现自动清洗，极大地防止了因缓冲盐的析出导致柱塞杆的磨损及因流动相中极微吸附物在泵头的积累，提高泵的使用寿命的同时，增加泵的可靠性。 高压静态混合器 是混合效率高、稳定性好、死体积小，混合器便于清洗。滞后时间短，重复性好。

42. 不同的配置选择余地：

44. FL2200色谱仪--7725i手动进样器 1、Rheodyne的不断流（MBB）结构设计专利，可以在取样和进样切换时保持流动的连续性，极大的降低了瞬时压力冲击对系统的干扰。 2、单点压力调节，减少了转子密封垫和定子间的摩擦，延长使用寿命。 3、内置位置传感开关，实现自动开始采集信号的联动功能 4、不锈钢材质，耐酸、耐碱、耐压，最高温度可达80℃ 5、选配不同规格的定量环，满足不同客户的需求

45. FL2200色谱仪--自动进样器 独特的专利液相自动进样装置（ZL 2010 2 0540360.8），在提高效率、减少进样交叉污染的同时，确保自动进样器进样准确性和稳定性； ★ 具有X、Y、Z、I轴开机自检功能 ★ 采用双CPU控制的自动进样器，可自由实现多种进样方式、清洗方式，保证了进样系统的低残留及高重复性。 自动进样重复性高，适合大量样品分析，节省人力，可实现自动化操作。

46. FL2200色谱仪--柱温箱 采用大面积半导体控温技术，控温快速高效 卧式箱体结构，设有不同柱长的安装位置，最多可放置2根色谱柱 柱温箱内保温棉，温度稳定性 0.1℃ 六通进样阀累计使用次数、进样阀本次开机次数、柱温箱累计使用时间及本次开机时间。 超温报警，自动断电 最高设置温度：80℃

47. FL2200色谱仪--紫外检测器

49. ▲ 采用进口氘灯、光电池，1200条/mm凹面光栅组成的双光束单色器，精密加工的双透镜流过池，高精度微处理器控制波长调节，双路高速采样的24位A/D，确保了检测器的低噪声、低漂移及超高灵敏度 ▲ 检测器平衡时间短 ▲ 单波长检测模式、停流波长扫描检测模式和时间波长程序检测模式 ▲ 摒弃传统的丝杆结构，采用进口5步电机系统驱动光栅结构，在减少零部件组合误差的同时，确保了波长准确性、重复性、可靠性，降低故障率。 ▲ 具有波长自动校正功能