对人有致病性的球菌主要引起化脓性炎症 , 又称化脓性球菌。 G + C ：葡萄球菌、链球菌、肺炎链球菌 G - C ：脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、卡他布兰汉菌

第十七章病原性球菌及检验 对人有致病性的球菌主要引起化脓性炎症,又称化脓性球菌。 G+C：葡萄球菌、链球菌、肺炎链球菌 G-C：脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、卡他布兰汉菌

学习目的与要求 1. 了解病原性球菌的概念及种类。 2. 熟悉常见病原性球菌的主要生物学特性、致病性和免疫性。 3. 掌握葡萄球菌、链球菌、脑膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌的检验程序和检验方法。

第一节葡萄球菌属(Staphylococcus)

一、生物学特性 （一）形态与染色 G+，球形，无鞭毛、无芽孢，呈葡萄串状排列。

（二）培养特性 营养：要求不高，耐盐。液体：均匀浑浊生长普通琼脂平板：血液琼脂平板：　高盐甘露醇平板：金黄色葡萄球菌为淡橙黄色菌落；　　　　　　　　其他葡萄球菌为白色菌落。　

（三）生化反应 活泼分解多种糖类、蛋白质、氨基酸。(如：葡萄糖，麦芽糖，蔗糖，甘露醇）触酶（＋）（区别于链球菌属）

（四）抗原构造 　１、蛋白抗原（ＳＰＡ）　２、多糖抗原金黄色葡萄球菌：核糖醇磷壁酸　　　　（检测磷壁酸Ａｂ有助于金葡菌感染诊断）　　凝固酶（－）：甘油磷壁酸

（五）分类:　　　３２个种及亚种 　１、按色素分类：金、白、柠　２、按凝固酶分类：　　　凝固酶阴性、凝固酶阳性葡萄球菌　３、按噬菌体分类：金葡菌分为5群26型 4. 据色素、生化反应分：金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌

三种葡萄球菌的主要性状

（六）抵抗力 无芽胞菌中最强，耐干燥，对石炭酸、升汞、龙胆紫敏感。易产生耐药性变异，如：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）。MRSA常呈多重耐药，对青霉素、氧氟沙星及红霉素的敏感率分别为1.3%、3%及14%。

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA） 长期住院、反复使用各种广谱抗菌药物、烧伤或有伤口的病人及与MRSA定植或感染的病人接触都是造成院内MRSA流行的危险因素。MRSA定植或感染的人员及院内环境污染是引起院内流行的主要来源。 MRSA定植或感染的人员及院内环境污染是引起院内流行的主要来源。

二、致病性和免疫性 (一)致病物质金黄色葡萄球菌产生多种侵袭性酶与外毒素。 1．血浆凝固酶（coagulase)：分：结合型凝固酶、游离型凝固酶。鉴别金黄色葡萄球菌的重要指标。 2．葡萄球菌溶血素（staphylolysin）

3．杀白细胞素（leukocidin） 4．肠毒素（enterotoxin）：（A、B、C1、C2、C3、D、E、G、H 9个血清型） 5．表皮剥脱毒素（exfoliative toxin） 6. 毒性休克综合征毒素1（toxic shock syndrome toxin 1, TSST1）

（二）所致疾病 1．侵袭性疾病：　（1）皮肤软组织感染特点：病灶局限且脓汁粘稠（2）内脏器官感染（3）全身感染（4）尿路感染

2．毒素性疾病 （1）食物中毒（2）烫伤样皮肤综合征由表皮剥脱毒素引起。（3）毒性休克综合征　　由TSST1引起（4）假膜性肠炎

3、凝固酶阴性葡萄球菌的致病性 人类凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）感染中以表皮葡萄球菌的感染最为常见。 CNS主要引起以下几种感染：泌尿系感染，细菌性心内膜炎，败血症等，其中大多为医院内感染。此外，心脏起搏器安装、置换人工心脏瓣膜、长期腹膜透析、静脉滴注等亦可造成凝固酶阴性葡萄球菌的感染。

三、微生物学检验 • （一）标本采集 • （二）检验程序 • （三）检验方法

三、微生物学检验 （一）标本采集　　　根据病情采集标本种类：脓液、伤口分泌物、穿刺液、血液、尿液、痰液、脑脊液、粪便等。注意：无菌操作，避免污染。

（二）葡萄球菌检验程序 脓液、咽拭子、穿刺液尿液、痰液粪便、呕吐物脑脊液　　　血液分离培养（高盐甘露醇平板）直接涂片染色分离培养（血平板）增菌培养初报涂片染色血浆凝固酶耐热核酸酶其他鉴定试验取可疑菌落鉴定试验　　　　　药敏试验报　告

（三）检验方法 1、直接涂片适用于：正常情况下无菌的标本（如脑脊液）伴有炎症细胞的其他体液标本、脓液等初步报告： “查见革兰阳性葡萄状排列球菌，疑为葡萄球菌” 　或：“查见类似葡萄球菌的革兰阳性球菌”

2、分离培养 50ml葡萄糖肉汤（增菌）血液标本5ml 脑脊液、脓液、穿刺液、咽拭、尿液粪便、呕吐物浑浊无菌（7天）高盐甘露醇平板血平板报告：无菌生长

（三）检验方法 3、鉴定试验（1）血浆凝固酶试验：金黄色葡萄球菌（+）（2）甘露醇发酵试验：金黄色葡萄球菌（+）（3）耐热核酸酶试验：金黄色葡萄球菌（+）（４）肠毒素测定：金黄色葡萄球菌产生（5）SPA检测：金黄色葡萄球菌（6）凝固酶阳性和凝固酶阴性的葡萄球菌鉴定（7）API葡萄球菌鉴定试剂盒

（四）结果评价和报告 • 1、金黄色葡萄球菌：无论任何标本中分离到均应鉴定并报告临床。 • 2、表皮葡萄球菌及腐生葡萄球菌：从输液导管、人工植入组织中分离到，应视为致病菌。 • 3、尿培养计数：>103-104为阳性菌尿标准。 • 4、其他凝固酶阴性葡萄球菌：引起感染流行或治疗失败时，应鉴定到种。 • 5、金黄色葡萄球菌（MRSA)：头孢菌素类抗生素体外药敏试验为敏感时，不应报告，因体内试验已证实MRSA对该类抗生素耐药。

第二节链球菌属(Streptococcus)

一、链球菌

一、生物学特性 （一）形态与染色 G+，球形或椭圆形，呈链状排列，无鞭毛、无芽胞，有荚膜。

一、生物学特性 （二）培养特性条件：营养要求较高，多数为兼性厌氧菌，少数专性厌氧。液体：沉淀生长（絮状或颗粒状）。普通琼脂平板：不生长。血液琼脂平板：　

（三）生化反应 活泼分解多种糖类、蛋白质、氨基酸。　菊糖（-）胆汁溶菌试验（-） optochin敏感试验（-）　　触酶（-）（区别于葡萄球菌属）（区别甲链与肺链）

（四）抗原构造 １、多糖抗原（C抗原）：群特异性。　２、蛋白抗原（M、T、R、S）型特异性，与致病有关的是M蛋白抗原。 3、核蛋白抗原：无特异性。

链球菌抗原构造模式图 核蛋白抗原多糖抗原蛋白质抗原荚膜

（五）分类 40个种及亚种 １、按溶血情况分类：（1）甲型溶血性链球菌：菌落周围有1～2mm宽的草绿溶血环，称甲型溶血或α溶血。为条件致病菌。（2）乙型溶血性链球菌：菌落周围形成一个2～4mm宽的透明溶血环，称乙型溶血或β溶血。又称溶血性链球菌。致病力强，引起多种疾病。（3）丙型链球菌：无溶血环，不致病

（五）分类 ２、按抗原结构分类：按C抗原分群：ABCD…20群，对人致病的以A群为主。按M蛋白分型：如A群：100个型，B群：4型，C群：13个型。

（六）抵抗力 不强，60℃30min杀死，对多种消毒剂敏感。乙链：对青霉素、四环素、红霉素等敏感。

二、致病性和免疫性 （一）致病物质 1、链球菌溶血素（1）链球菌溶血素O (SLO) SLO抗体抗链球菌溶血素O试验：协助诊断风湿热（>1:400) （2）链球菌溶血素S (SLS)：无抗原性。 2、致热外毒素（猩红热毒素/红疹毒素） 3、M蛋白

4、透明质酸酶 5、链激酶 6、链道酶

（二）所致疾病 主要由A群链球菌引起。 1、化脓性感染：由皮肤伤口侵入，经呼吸道侵入，其他途径（如产褥热、蜂窝组织炎）特点：病灶界限不清,脓汁稀薄 2．中毒性疾病：猩红热由产生致热外毒素的A族链球菌所致的急性呼吸道传染病。

二、致病性和免疫性 3．变态反应性疾病：风湿热急性肾小球肾炎 4．其他疾病：甲型（草绿色）链球菌：引起亚急性细菌性心内膜炎。

三、微生物学检验 • （一）标本采集 • （二）检验程序 • （三）检验方法

（一）标本采集 　　　根据病情采集标本种类：脓液、鼻咽拭子、血液等风湿热查血清抗体

（二）　链球菌的检验程序 痰、脓、穿刺液咽拭子等脑脊液血液增菌培养 (5%CO2葡萄糖肉汤) 分离培养直接涂片染色测抗原血平板（5%CO2）初步报告可疑菌落鉴定试验血清学鉴定（分群）杆菌肽试验optochin 胆汁溶菌试验其他鉴定敏感试验试验

（三）　链球菌的检验方法 （1）直接镜检：（痰、脓、穿刺液、咽拭子等）初报：发现G+球菌，呈链状排列

（2）分离培养： ① 血液、脑脊液肉汤增菌 ② 脓液、咽拭子等血平板分离

（3）鉴定链球菌的主要试验： 根据形态、菌落、溶血情况进行： ①杆菌肽敏感试验：A群敏感(d>10mm) ②Optochin敏感试验：肺炎链球菌d>18mm， d<15mm为阴性。 ③胆汁溶菌试验：肺炎链球菌+ ④CAMP试验：Ｂ群无乳链球菌为＋

⑤血清学鉴定： 试剂盒STREPTEX。用亚硝酸抽提待测菌的群特异性抗原，分别与包被有抗体的胶乳颗粒反应。 ⑥抗O试验：风湿性关节炎、急性肾小球肾炎，效价>400为+

二、肺炎链球菌(S.pneumoniae) 属链球菌科，链球菌属。广泛分布于自然界，主要寄生于人类上呼吸道，多数不致病。

一、生物学特性 （一）形态与染色 G+，矛头状，成双（或短链）排列，无鞭毛、无芽胞，有荚膜。

（二）培养特性 条件：营养要求较高，兼性厌氧菌， 5-10% C02生长最好。产生自溶酶。液体：培养24h呈均匀混浊，后期因产生自溶而变得澄清。普通琼脂平板：不生长。血液琼脂平板：灰白色，圆形，扁平，较小，周围有草绿色溶血环（α溶血）

（三）生化反应 活泼分解多种糖类。　　菊糖（多数 + ）胆汁溶菌试验（+）　　 Optochin试验(+) 区别甲链与肺链

（四）抗原构造 １、荚膜多糖抗原：据此将肺炎链球菌分85型，对人致病的有20多型。 Ⅰ-Ⅲ型引起大叶性肺炎。２、菌体多糖抗原：可与CRP反应，产生沉淀。 3、M蛋白抗原：型特异性。

（五）抵抗力 较弱，加热56℃ ，20min即死亡。对一般消毒剂敏感，对干燥抵抗力较强。（六）变异性 • 荚膜变异：有荚膜的光滑（S）型菌有毒力，失去荚膜的粗糙（R）型毒力减低或消失。

对人有致病性的球菌主要引起化脓性炎症 , 又称化脓性球菌。 G + C ：葡萄球菌、链球菌、肺炎链球菌 G - C ：脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、卡他布兰汉菌