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真菌学概论

真菌学概论. P 226. 适用教材《医学微生物学》第五版 陆德源主编 人卫2002年8月. 第21章 真菌学概述. 病毒界 原核生物界 原生生物界 真菌界 植物界 动物界. 接合菌门 担子菌门 子囊菌门 壶菌门 (原半知菌亚门归入前3门中 ). 自然生物分类(6界). 分类:界、门、纲、目、科、属、种. 真菌 ( fungus). 真菌 是一种真核细胞形微生物。有典型和完善的细胞器。不含叶绿素、无根、茎、叶的分化。 广泛分布、种类繁多，多数无害、少数有益（食用蕈、生产抗菌素、酿酒） 致病真菌：致病、条件致病、产毒、致癌等

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真菌学概论

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  1. 真菌学概论 P226 适用教材《医学微生物学》第五版 陆德源主编 人卫2002年8月

  2. 第21章 真菌学概述 病毒界 原核生物界 原生生物界 真菌界 植物界 动物界 接合菌门 担子菌门 子囊菌门 壶菌门 (原半知菌亚门归入前3门中) 自然生物分类(6界) 分类:界、门、纲、目、科、属、种

  3. 真菌(fungus) • 真菌是一种真核细胞形微生物。有典型和完善的细胞器。不含叶绿素、无根、茎、叶的分化。 • 广泛分布、种类繁多，多数无害、少数有益（食用蕈、生产抗菌素、酿酒） • 致病真菌：致病、条件致病、产毒、致癌等 • 感染率上升原因：菌群失调（滥用抗菌素）、免疫低下（激素、抗癌药物）

  4. 第一节 真菌的生物学性状 • 真菌分单细胞和多细胞两类： • 单细胞真菌呈圆形或椭圆形，称为酵母菌（yeast）或类酵母菌（如隐球菌、念珠菌）。 • 多细胞真菌由菌丝和孢子组成，菌丝分枝交织成团形成菌丝体,称丝状菌（filarmentous fungus），并长有各种孢子，这类真菌即一般称为霉菌（Mold) 。

  5. 一、真菌的形态与结构 二相性真菌（dimorphic） • 有些真菌在不同寄生环境和培养条件下出现两种形态，称二相性真菌。 • 即在机体内或含动物蛋白的培养中37℃孵育，呈现酵母型菌落，而在沙保氏培养基上室温或25℃孵育，则形成丝状菌落。（如球孢子菌、荚膜组织胞浆菌、皮炎芽生菌等。）

  6. 一、真菌的形态与结构 一、真菌的形态与结构 • 真菌比细菌大几倍至几十倍。 • 细胞结构比细菌复杂，细胞壁缺乏肽聚糖，其坚韧性主要依赖于多聚N-乙酰基葡萄糖构成的甲壳质(Chitin)（75%）和蛋白质（25%）。 • 由于不含肽聚糖，真菌不受青霉素或头孢菌素的作用。 • 真菌的细胞膜与细菌的细胞膜区别在于前者有固醇(sterol)而后者无。 • 细胞内有较为典型的核结构和细胞器。

  7. 一、真菌的形态与结构 A.单细胞真菌 • 单细胞真菌呈圆形或卵圆形，常见于酵母和类酵母菌，对人类有致病的主要有：新生隐球菌的白假丝酵母菌。 • 这类真菌以出芽方式繁殖， 芽生孢子脱落后形成新的 独立个体。

  8. 一、真菌的形态与结构 B.多细胞真菌 • 多细胞真菌能长出菌丝，菌丝延伸分枝，并可以长出孢子。 • 菌丝和孢子的形 态不同，常作为 鉴别多细胞真菌 的重要标志。

  9. 一、真菌的形态与结构 1、菌丝（hypha） • 真菌的孢子以出芽方式繁殖，在适宜的环境下由孢子长出芽管，芽管延长呈丝状，称菌丝。 • 菌丝又可长出许多分枝，交织成团称为菌丝体。 • 按功能分 • 营养菌丝 • 气生菌丝 • 生殖菌丝

  10. 1、菌丝 • 按物理性状分 • 有隔菌丝 • 无隔菌丝 • 按形态分 • 螺旋状 • 球拍状 • 结节状 • 鹿角状 • 梳状

  11. 一、真菌的形态与结构 2、孢子（spore） • 孢子系真菌的繁殖结构，按形成方式分为有性孢子和无性孢子两种 • 有性孢子 • 无性孢子 • 真菌孢子与细菌芽胞的区别(P227/P24)

  12. 一、真菌的形态与结构 无性孢子(1)分生孢子 • 由生殖菌丝末端的细胞分裂或收缩形成，也可在菌丝侧面出芽形成。 • 按形态分： • 大分生孢子 • 小分生孢子 图示：石膏样小孢子菌的梭状大分生孢子

  13. 一、真菌的形态与结构 无性孢子(2)叶状孢子 • 由菌丝内细胞直接形成 • 芽生孢子:菌丝体细胞出芽生成（假菌丝） • 厚膜孢子：菌丝体内胞浆浓缩，胞壁增厚，环境不利形成。环境转好，厚膜孢子又可以出芽生殖。 • 关节孢子：陈旧的培养物中，菌丝细胞变厚，形成长方形的节段，呈链状排列。

  14. 芽生孢子、厚膜孢子、关节孢子

  15. 一、真菌的形态与结构 无性孢子(3)孢子囊孢子 • 菌丝的末端膨大成孢子囊，内含许多小孢子，孢子成熟则破囊而出。多见于毛霉、根霉等。

  16. 二、培养特性 二、培养特性 • 沙保弱培养基： • 皮肤癣菌生长较慢，1-4周，腐生性真菌生长较快，<24小时。 • 成分：1%蛋白胨 4%葡萄糖 2%琼脂 pH5.5 • 抑菌剂：放线菌酮和氯霉素 • 前者抑制污染真菌，后都抑制普通细菌 • 但放线菌酮可以抑制部分致病性真菌如白假丝酵母菌、组织孢浆菌、新生隐球菌等的生长，故初次分离上述真菌，需使用不加放线菌酮的培养基。

  17. 二、培养特性 1、酵母型菌落 • 酵母型菌落，为单细胞真菌的菌落形态，菌落光滑湿润，柔软而致密。与一般细菌菌落相似，如新生隐球菌。 • 酵母样菌落（类酵母菌落），部分单细胞真菌在出芽繁殖后，芽管延长不与母细胞脱落，形成假菌丝。假菌丝由菌落向下生长，伸入培养基中，这样的菌落称酵母样菌落，如白假丝酵母菌。

  18. 酵母型菌落、酵母样菌落

  19. 二、培养特性 2、丝状菌落 • 是多细胞真菌的菌落形式，由许多疏松的菌丝体构成。菌落呈棉絮状、绒毛状或粉末状，菌落正背两面呈不同颜色。 • 其形态、结构、颜色常作为鉴定真菌的参考。 • 丝状真菌有形成圆形菌落的倾向，所以临床癣类疾病常表现为环形或多环形。 • 小培养

  20. 棉絮状菌落、环癣、小培养

  21. 三、抵抗力 三、抵抗力 • 真菌对干燥、阳光、紫外线及一般消毒剂有较强的抵抗力。 • 对常用的抗细菌感染的抗生素均不敏感。对部分消毒剂敏感。 • 灰黄霉素、制霉菌素、二性霉素、克霉唑、酮康唑、咪康唑、伊曲康唑、5-氟胞嘧啶等对多种真菌有良好的抑菌作用。

  22. 第二节 真菌的致病性与免疫性 • 致病条件 • 1、毒力：具有内毒素样活性的胞壁糖蛋白，烟曲霉、黄曲霉致组织出血坏死。 • 2、粘附力：白假细酵母菌，芽管形成，粘附力增强 • 3、抗吞噬作用：新生隐球菌荚膜可有效抵抗吞噬细胞的吞噬作用。 • 4、改变宿主细胞功能：烟曲霉和白假细酵母菌的热休克蛋白HSP90可与宿主细胞和血清蛋白结合使之功能改变。

  23. 第二节 真菌的致病性与免疫性 致病形式 • 1、致病性真菌感染：多见于外源性真菌感染。浅部真菌病如皮癣。 • 2、条件致病性真菌感染：多见于内源性真菌感染。深部真菌病如肺假丝酵母菌病。多见于机体抵抗力下降患者。 • 3、真菌超敏反应性疾病：食入或吸入某此真菌的孢子或菌丝体时引发的各种超敏反应。如荨麻疹、变应性皮炎、哮喘等。

  24. 第二节 真菌的致病性与免疫性 皮癣、肺真菌病、荨麻疹

  25. 第二节 真菌的致病性与免疫性 致病形式 • 4、真菌性中毒症：摄入真菌或其产生的毒素后引起急、慢性中毒。可引起肝肾功能损伤，或造血系统抑制，或神经系统功能紊乱。 • 5、真菌毒素与肿瘤的关系：黄曲霉 双呋喃氧杂萘邻酮的衍化物，毒性强，与致癌有密切关系

  26. 第二节 真菌的致病性与免疫性 免疫性 • 1、固有免疫：主要指机体粘膜的天然屏障作用，如果屏障机制不完善或被破坏，则易引发真菌感染。 • 如插管、破损、创伤 • 免疫力低下 • 菌群失调 • 儿童皮脂腺分泌不饱和和不饱和脂肪酸的水平较低，易患头癣；成人手足汗较多，且掌跖部缺乏皮指腺，故易患手癣。

  27. 第二节 真菌的致病性与免疫性 头癣和手癣

  28. 第二节 真菌的致病性与免疫性 免疫性 • 2、获得性免疫：因真菌细胞壁厚，所以感染后形成的抗体滴度较低，且很难发挥中和抗体的杀菌作用。但特异性抗体可阻止真菌转为菌丝体从而提高吞噬率，并抑制真菌粘附于体表。 • 主要是靠细胞免疫：抗原刺激→特异性淋巴细胞增殖→释放IFN-γ、IL-2 →激活巨噬细胞、NK细胞、CTL细胞→杀伤真菌 • 播散性真菌病多见于T细胞功能抑制。

  29. 第三节 真菌的微生物学检验法(P231) • 各种真菌的形态和结构有一定的特殊性,一般可用 直接镜检 分离培养 两种方法进行鉴定

  30. 第三节 真菌的微生物学检验法 一、标本采集 • 浅部真菌：75%乙醇棉球擦拭局部后取皮屑、毛发、指（趾）甲屑等 • 深部真菌：根据病情取痰、血液、脑脊液等

  31. 第三节 真菌的微生物学检验法 10%KOH 二、直接镜检和意义 方法： 皮肤癣菌：湿片，不染色； 假丝酵母菌：革兰染色； 隐球菌：墨汁染色

  32. 第三节 真菌的微生物学检验法 二、直接镜检和意义 • 意义： 1、直接阳性有诊断意义，但阴性并不能排除感染 2、组织中的分隔分枝菌丝为曲霉；粗大不分隔或不分枝菌丝多为毛霉；假丝酵母菌有假菌丝表示有活动性 3、皮肤癣菌菌丝肥大、粗长，提示活动状态 4、酵母型和二相真菌在组织内常呈现为孢子

  33. 第三节 真菌的微生物学检验法 刷子培养物的制备、头皮刷子样品的培养物，显示从刷子上每一点产生的菌落 受皮肤癣菌感染皮肤的KOH标本。菌丝的宽度是规则的，具有分隔并可有分枝

  34. 第三节 真菌的微生物学检验法 由犬小孢子菌引起的小孢子发外型和发内型感染的头发

  35. 第三节 真菌的微生物学检验法 被石膏样毛癣菌穿孔的毛发 在30%KOH中显示菌丝和酵母细胞的皮肤

  36. 第三节 真菌的微生物学检验法 短帚霉引起的甲感染和帚霉感染的典型厚壁分生孢子的甲的KOH涂片

  37. 第三节 真菌的微生物学检验法 多个出芽的酵母革兰染色和新生隐球菌墨汁染色

  38. 第三节 真菌的微生物学检验法 三、分离培养 • 皮肤、毛发、甲屑等标本经70%乙醇或2%石炭酸浸泡2-3min杀死杂菌，再用无菌生理盐水洗净后接种于沙保弱培养基中。 • 阴道、口腔粘膜标本接种于血平板上。 • 血液标本先增菌，脑脊液取沉淀物接种于血平板上。 • 疑为假丝酵母菌，需先做芽管生成试验。

  39. 第四节 真菌感染的预防(P232) • 大部分真菌基本都是通过孢子传播，因此阻断孢子的传播途径，破坏孢子的萌发环境犹为重要。 • 表皮破损、潮湿温暖环境、直接或间接接触。 • （黄曲霉的毒素作用）

  40. 真菌感染的治疗 • 局部用药（表浅局部感染） • 全身用药（深部或全身感染） • 皮肤科用药：5%硫磺软膏、咪康唑软膏、克霉唑软膏、0.5%碘伏 • 口服抗真菌药：二性霉素、制霉菌素、咪康唑、酮康唑、氟康唑、伊曲康唑等 （灰黄霉素对小鼠有致癌作用，需慎用。）

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