نجات جنین درگیاه باقالا ارقام Faba و Narbonensis

1. نجات جنین درگیاه باقالا ارقام Faba و Narbonensis تهیه کننده : فریبا فرمانی استاد راهنما : 1

2. مقدمه • باقالا گیاهی است دولپه ای از خانواده بقولات بومی مناطق معتدله جهان • رقم ناربورنسیس،رقم A207 وحشی و مقاوم به شرایط سخت از ارقام باقلا میباشد • رقم Faba ارقام Polycarp و A107 رقم رایج باقالا میباشد • تلاقی این دوگیاه باگرده افشانی منجر به سقط جنین بعد از 5 روز شد. • هدف این مقاله بدست آوردن پروتوکلی برای کشت جنین این دو رقم باهم است. 2

3. مواد و روش ها • دوگیاه مذکور از مراکز تهیه نشا و بذر تهیه شدند • گیاهان در اتاقک رشد تحت شرایط زیر نگهداری شدند: • تناوب دمایی22 درجه در روز و 16 درجه در شب بود • تناوب نوری 16-8 روشنایی به تاریکی اعمال شد • شدت نور 250 umos/m/s بود. 3

4. نور توسط لامپ مهتابی سرد و لامپ تنگستن ایجاد شد • بعد ازگلدهی،غلاف ها در رقم وحشی بعد از 2،4،6،8،10 روز بعداز گرده افشانی برداشت شد • غلاف رقم Faba هم 7،8،9،10،11،14،16،18 روز بعد از گرده افشانی برداشت شد • برای مقایسه، ازسنین مختلف ابتداغلاف ها کشت وسپس جنین رشدکرده آن جداو کشت شد • وهمینطورجداگانه تخمدان جنین به صورت مستقیم کشت شد. 4

5. غلاف ها وتخمدان هاجهت مقایسه زنده مانی جنین حاصله هر دو در محیط های کشت زیربا مواد ویتامین های استاندارد کشت شدند • محیط های کشت MS)،SH،PC،B5،BN) با عناصر استاندارد میباشد • غلاف هاو تخمدان ها هردوبا الکل 70 درصد ضدعفونی شده و 2 بار با آب مقطر شستشو داده شد. 5

6. جنین ها درپتری دیش حاوی 3 میلی لیتر محیط مایع مذکور روی یک فیلترکاعذی قرارگرفتند • غلاف ها هم داخل 10میلی لیتر پتری دیش ها پوشیده با پارافیلم قرارداده شد. 6

7. در هر پتری دیش 2 الی 4 غلاف و جنین گذاشته شد. • پتری دیش ها جهت جوانه زنی در انکوباتور گذاشته شدند • دمای 23 درجه سانتی گرادبرای روز و21 درجه برای شب تنظیم شد • فتوپریود هم 16ساعت روشنایی بود • شدت نور هم 50 میکروموس لامپ مهتابی سرد بود 7

8. نتایج و بحث • جنین درهردو رقم دربستر MSو B5 فقط زمانی جوانه زدند که بیش از9 روزبرای رقم وحشی و15 روز برای ارقم فابا عمرداشت. • درکشت ،جنین درارقام fabaباعمرکمتر از 5 روز ودررقم وحشی کمتر از 9 روز زنده میماند • جنین دراین سن برای انتقال به محیط مایع پرآوری هنوز کوچک بودند 8

9. طبق نتایج جوانه زنی و رشدجنین فقط در بستر MSM و SH اختلاف معنی داری داشت • زنده مانی جنین رقم وحشی درطی 20 روزدر بستر B5 ازهمه بیشتر و 96 بود • زنده مانی در60 روزفقط برای ارقام وحشی در بستر MS و B5 اختلاف معنی دار بود • کمترین جوانه زنی هم مربوط به ارقام Polycarp و 107 گونه ی faba بود. 9

10. 10

11. طبق جدول2 کشت غلاف در مقایسه با کشت جنین در هر دورقم زنده مانی را بهبود داد • وقتی غلاف های رقم وحشی درمحیط SHکشت شد جوانه زنی ورشد بیشتر مشاهده شد • به طور کلی کشت غلاف موجب نجات جنین 11 روزه رقم فابا و 4 روزه رقم وحشی شد 11

12. 12

13. نتیجه گیری • این پروتوکل به همراه ایجاد ژنوتیپ های مقاوم از دو رقم میتواند راه را برای ایجاد هیبرید های بین گونه ای بیشتر باز کند • طبق نتایج کشت غلاف وسپس جداکردن و کشت جنین آن بیشترین زنده مانی را بین ارقام مذکور دارد • محیط کشت SH بیشترین جنین زنده مانده و رشد کرده را به همراه داشت 13

14. پیشنهادات برای مقاوم شدن و درنتیجه افزایش توید باقالا، از هیبرید های آن با ارقام وحشی استفاده شود. برای روش های کشت جنین هم میتوان از پروتوکل بدست آمده استفاده کرد. 14

15. منابع 15

16. با سپاس از صبر و حوصله ی شما 16