实验三稻棉种子活力的快速测定

实验三稻棉种子活力的快速测定

一、目的要求 • 学习和掌握稻、麦、棉等种子活力的快速测定方法。 • 二、仪器用品及实验材料 • 1．材料：水稻、小麦、棉花经贮藏后部分丧失生活力的种子，或经过处理的种子，新鲜的种子。 • 2．仪器设备：培养皿、刀片、镊子、培养箱等 • 3．试剂：0.1％TTC溶液（TTC应避光保存，且不宜久存，若溶液变红色不可再用）、5%红墨水溶液。

种子活力 • 种子活力是指种子的健壮度，包括迅速、整齐萌发的发芽潜力、生长潜力。 • 种子活力的大小取决于遗传基础和发育状态，当种子成熟时，活力水平达到高峰，随后在采收、加工、贮藏过程中，种子会发生不同程度的劣变，引起活力的衰退，进而在播种时，直接影响农作物的产量。 • 快速测定种子活力可以及时的鉴定种子的健壮度，对是否还具有发芽的潜力及其使用价值作出尽可能切合实际的判断。

三、实验内容 学习和掌握几种快速测定稻棉种子活力的原理和方法。（一）T.T.C法快速鉴定种子生活力（二）红墨水法快速测定种子生活力

（一）T.T.C法快速鉴定种子生活力 1、实验原理凡是有生命活力的种子胚，在呼吸作用过程中都有氧化还原反应，而无生命活力的种子胚则没有此反应。当TTC（氯化三苯基四氮唑）深入种子胚的活细胞内时，被种胚中的脱氢辅酶还原成不溶性的红色稳定不扩散的TTF（三苯甲基赞）。

2、材料和用具 （1）实验材料：水稻、棉花久经贮藏后部分丧失生活力的种子（陈种）和新鲜的种子（新种）。（2）实验用具：培养皿、烧杯、镊子、滤纸、刀片、温箱、天平、蒸馏水、小木板等。（3）实验试剂： 0.1%T.T.C溶液：称取T.T.C 0.1克，加入95%酒精少量溶于小烧杯中，然后加蒸馏水至100ml。避光保存，若溶液变红色不可再用。

3、实验步骤： ①浸种：取待测水稻或棉花种子50粒预浸，小麦种子浸2-3小时，籼稻种子浸6-8小时，粳稻种子浸24小时。水稻种子应剥除谷壳，并保持浸种温度在30-35℃，以增强种胚的呼吸强度，加速种子吸水，是的染色更加迅速。 ②染色：将浸种的水稻、棉花种子，剥去种皮，用刀片沿腹沟纵切两半，水稻种子沿胚的中心线纵切为两半（测定的一半一定要带胚），取其中的一半置于培养皿中，培养皿要编号。在培养皿中加入适量的0.1%T.T.C溶液，以覆盖种子为度，然后置于40 ℃恒温箱中约0.5-1小时，然后观察结果，根据种子胚部是否产生红色反应以鉴定其生活力。 ③计算：种子活力(%)=有活力的种子数/种子总数×100%

（二）红墨水法快速测定种子生活力 1、实验原理凡是有活力的种子胚细胞的原生质膜具有半透性，选择性吸收物质的能力，一般染料不能进入细胞内，胚部不染色。而丧失活力的种子，其胚部细胞原生质膜会丧失选择吸收能力，于是染料便能自由进入死细胞内而染色，所以可根据种子胚部是否被染色来判断种子的活力。

2、实验材料和用具 （1）实验材料：水稻、棉花久经贮藏后部分丧失生活力的种子，新鲜的种子。（2）实验用具：恒温箱、烧杯、培养皿、漏斗、镊子（3）实验试剂：5%的红墨水溶液：红墨水5ml加水95ml即可。

3、实验步骤 ①浸种：同上述TTC法。 ②染色：取经过浸泡的种子，沿胚的中心线纵切为两半，将一半置于培养皿中，加入少量5%的红墨水（以淹没种子为度），染色10-15分钟（如果温度高可短些）。染色后取出洗净，至冲洗液无色为止。检查种子的死活，凡种胚不着色或着色很浅者为活种子；凡种胚与胚乳着色程度相同的为死种子。（不论是活种子或死种子的胚乳均染成红色） ③计算：种胚不着色或是着色浅的种子数，算出活种子的百分率。种子活力(%)=有活力的种子数/种子总数×100%

4、注意事项 以上介绍的两种方法都是以细胞对该物质的渗透为前提的，因此只能快速的了解种子具有的发芽潜力，为急需之用。

三、作业 1、比较TTC法与红墨水法两种测定方法的优缺点。 2、列表格比较两种方法测定的水稻与棉花的新种与陈种的测定结果。

实验三 稻棉种子活力的快速测定