酱油中苯甲酸含量的气相色谱法测定

酱油中苯甲酸含量的气相色谱法测定

实验目的 • 进一步熟悉CP-3800气相色谱仪的使用 • 掌握用标准曲线法（外标法）进行定量分析的方法

分离原理 根据样品各组分在流动相和固定相中的分配情况不同来进行分离保留时间– 定性分析峰面积 – 定量分析

气相色谱仪 气路系统汽化室进样装置进样系统填充柱毛细管柱色谱柱分离系统温控系统 TCD(1041) FID(1079) 检测记录系统

毛细管柱 • 不锈钢 玻璃  熔融硅 • 柔韧性及机械强度均较好 • 惰性好 • 内径：0.05 - 0.80 mm . • 长度：20-200 m。

检测器 • 通用型检测器（ Universal Detector) 热导检测器（TCD）氢火焰检测器（FID）

氢火焰检测器（FID） • 最常用的GC 检测器. • - 是有机物的通用型检测器。 • - 检出限 < 10 pg. • - 线性范围可达7个数量级 . • 破坏型检测器－－样品燃烧 • 信号值大小取决于碳原子数目及替代物的数量。

定量分析方法 基本公式： Mi– I组分的量；Ai–I组分的峰面积；fi– I组分的校正因子定量分析依据是被测组分的量与响应信号成正比校正因子：相同含量的物质由于物理、化学性质的差别，即使在同一检测器上产生的信号也不同，直接用响应信号定量，必然导致较大误差。故引入校正因子。物理意义：单位面积所代表的被测组分的量。

外标法（External Standard) －－标准曲线法用已知的标准品配成不同浓度的标准系列，在与被测样品相同的色谱条件下，取固定量标准溶液进样分析，测出响应信号（峰高或峰面积），绘制响应信号与质量分数的标准曲线；

外标法 优点：操作简单，计算方便，不需要校正因子不足：对分析条件及进样量要求十分严格适用于日常控制分析和大量同类样品分析

苯甲酸 传统防腐剂动物实验有毒副作用 FAO/WHO规定苯甲酸及其钠盐的每日允许摄入量ADI: 5-10mg/kg.体重我国卫生标准规定酱油中最大使用量: 1g/kg

苯甲酸检测方法 • 薄层色谱法 • 分光光度法 • 气相色谱法 • 液相色谱法

实验内容 1 溶液的配制 2 标准曲线的制作 3 样品处理 4 样品分析

标准溶液的配制 • 2mg/ml储备液 • 0.100、0.200、0.300、0.500、1.000mg/ml标准系列工作溶液

样品处理方法二 • 取2.5ml酱油置于25ml具塞刻度比色管中，盐酸溶液酸化 • 乙醚各提取，合并乙醚提取液于另一具塞刻度比色管，用NaCl酸性溶液洗涤，静置15min • 吸管吸取乙醚层通过无水Na2SO4过滤，乙醚定容 • 准确吸取5ml上溶液于试管中，40℃水浴去除乙醚，加入2ml氯仿溶解，供分析用。

实验条件 CP-3800气相色谱仪（VARIAN) 色谱柱：CP Sil 24CB 毛细管柱 (VARIAN) （25m*0.53mmID*0.25um）检测器：FID 载气：氮气进样量：0.6微升

数据处理 • 制作标准曲线得到回归方程和相关系数 • 确定酱油中苯甲酸含量

实验指导 • 外标法对进样量要求十分严格，进样时注意要赶走气泡。

实验要求 1 严格按照仪器操作规程操作 2 实验完毕清洗色谱柱15min 2 认真做好数据记录与处理 3 准备室和实验室卫生清扫

酱油中苯甲酸含量的 气相色谱法测定