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FAAz. Fragment Assembly Analyzer. Erico Teixeira e Francisco do Nascimento. Maio, 2003. Seqüenciamento. Leitura do DNA de um organismo Atividade realizada nos laboratórios biológicos Restrições das máquinas: Não suportam leitura longa (em média 600 bases) Fragmentos aleatórios.
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FAAz Fragment AssemblyAnalyzer Erico Teixeira e Francisco do Nascimento Maio, 2003
Seqüenciamento • Leitura do DNA de um organismo • Atividade realizada nos laboratórios biológicos • Restrições das máquinas: • Não suportam leitura longa (em média 600 bases) • Fragmentos aleatórios
CTTGCAAGAC ACAGCTGTTC TTCTCA TCTTGCG ACAGACCC TCACCTTGC TGCGCAACC CCAGACA A difícil arte de montar TTCTCA TCACCTTGC CTTGCAAGAC ACAGACCC CCAGACA ACAGCTGTTC TCTTGCG TGCGCAACC TTCTCACCTTGCAAGACAGACCCAGACAGCTGTTCTTGCGCAACC
TTCTCACCTT CCTTGCAATT CTTGCAATTG ATTGCAATTGC ATTGCAACGC CAACGCAACC TTCTCACCTTGCAATTGCAATTGCAACGCAACC Repetições – uma armadilha TTCTCACCTTGCAATTGCAATTGCAATTGCAATTGCAACGCAACC TTCTCACCTTGCAATTGCAATTGCAATTGCAATTGCAACGCAACC
Montadores • Vocabulário necessário • Fragmento = pequenas seqüências bases para serem alinhadas • Qualidade = cada base tem associado um inteiro correspondendo a confiabilidade • Contig = conjunto de fragmentos que têm trechos similares, de modo que possam ser alinhados • Consenso = a superseqüência gerada pelos elementos do contig • Montadores de estudo • PHRAP – Phragment Assembly Program • CAP3 – Contig Assembly Program
Procedimento comum de um montador • Alinhar dois fragmentos quaisquer • Se a similaridade entre eles for boa, eles fazem parte de um mesmo contig e será gerado um consenso deste contig • Se não, formarão dois contigs diferentes • Alinhar um novo fragmento com os consensos de cada contig e com o que tiver maior similaridade, ele será agrupado • E assim por diante
MONTADOR Um montador
FAAz – Fragment Assembly Analyzer • Objetivos • Auxiliar na detecção de possíveis erros de montagens • Fornecer indicativos de erro através de uma interface amigável • Comparar diferentes montadores de fragmentos
PHRAP Contig X CAP3 Contig Y Procedimentos do FAAz • Comparar os consensos gerados por cada montador(PHRAPe CAP3)
Procedimentos do FAAz • Após a identificação das regiões fazer uma análise quantitativa delas • Fragmentos que as compõem • Número de fragmentos por posição • Tamanho • Localização no consenso • Média de cobertura e as sub-regiões que estão acima desta média
Saídas • Regiões similares encontradas nos contigs gerados por cada montador
Saídas • Representação gráfica das sobreposições das regiões
FAAz Fragment AssemblyAnalyzer Erico Teixeira e Francisco do Nascimento Maio, 2003