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Iniciación de la replicación en procariotas

Iniciación de la replicación en procariotas. Elementos en el origen de replicación bacteriano. ¿En qué lugar del oriC únese la proteína iniciadora?. DNAsa footprinting del oriC y la dnaA. Ubicación de sitios de unión de dnaA en el oriC. La proteína dnaA se une a los sitios R (R1-R4).

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Iniciación de la replicación en procariotas

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Presentation Transcript

  1. Iniciación de la replicación en procariotas

  2. Elementos en el origen de replicación bacteriano

  3. ¿En qué lugar del oriC únese la proteína iniciadora?

  4. DNAsa footprinting del oriC y la dnaA

  5. Ubicación de sitios de unión de dnaA en el oriC La proteína dnaA se une a los sitios R (R1-R4)

  6. ¿Es la proteína iniciadora suficiente para provocar la apertura del oriC? ¿En qué sitio se produce el “open complex”?

  7. Linealización del plásmido con la nucleasa P1

  8. Presencia de proteínas accesorias

  9. Presencia de proteínas inhibitorias

  10. Identificación de una proteína con actividad helicasa

  11. Sustrato para determinar la actividad helicasa

  12. ¿En qué dirección la helicasa su actividad ejerce?

  13. Esquema de la iniciación a partir del oriC

  14. DNA polimerasas, sustratos necesarios: • DNA templado • Nucleótidos • Extremo -OH libre • Imposibilidad que cualquier DNA polimerasa inicie la síntesis de DNA en la replicación • Intervención de una RNA polimerasa que sintetice un primer de RNA primasa = dnaG

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