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THE EXPERIMENTAL COURSE OF CELL BIOLOGY. 细胞生物学实验教程. Welcome to Study on Cell Biology 任课老师:黄峙;王宏;凌钦婕. 实验三 : 细胞渗透平衡与溶血现象. 实验三 : 细胞渗透平衡与溶血现象. A. 蔗糖 ; B. 鬼臼毒素 ; C. 甘露醇 ; D. 阿拉伯糖 ; E. N- 甲基 - 烟碱酰胺 ; F. 氨甲蝶呤 ; G. 长春新碱 ; H. 尿素 ; I. 甲酰胺 ; J. 长春花碱 ; K. 箭毒 ;
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THE EXPERIMENTAL COURSE OF CELL BIOLOGY 细胞生物学实验教程 Welcome to Study on Cell Biology 任课老师:黄峙;王宏;凌钦婕
A.蔗糖; B.鬼臼毒素; C.甘露醇; D.阿拉伯糖; E. N-甲基-烟碱酰胺; F.氨甲蝶呤; G.长春新碱; H.尿素; I.甲酰胺; J.长春花碱; K.箭毒; L.硫脲; M.脱水半乳糖醇; N.甘油; O.5-FU; P.乙二醇; Q.乙酰胺; R.喃氟啶; S.甲氧甲基硝基咪唑乙醇 T.丙二醇; U.灭滴灵,甲硝哒唑; V. Spirohydantoin mustard W.甲基苄肼; X. PCNU; Y.安替比林; Z.咖啡硷;咖啡因;茶硷 BCNU卡莫司汀 CCNU洛莫司汀 正辛醇水分配系数
实验三:细胞渗透平衡与溶血现象 红细胞血影
1.1 实验目的 • 了解溶血现象及其发生机制; • 了解细胞膜的渗透性及各类物质进入细胞的速度。
1.2 实验原理 • 细胞膜是细胞与环境进行物质交换的选择通透性屏障,是一种半透膜,可选择性控制物质进出细胞。 • 将红细胞放在低渗盐溶液中,水分子大量渗到细胞内,可使细胞胀破,血红蛋白释放到介质中,由不透明的红细胞悬液变为红色透明的血红蛋白溶液,这种现象称为溶血。 • 将红细胞放在某些等渗盐溶液中,由于红细胞膜对各种溶质的通透性不同,有的溶质可进入,有的溶质不能进入,进入红细胞的溶质能提高红细胞的渗透压,使水进入红细胞,引起溶血。由于溶质透入速度不同,溶血时间也不同,因此,发生溶血现象所需时间长短可作为测量物质进入红细胞速度的一种指标。本实验选用红细胞作为细胞膜透性的实验材料,将其放入不同的介质溶液中,观察红细胞的变化。
1.3 材料与方法 • 器材: • 试剂: 0.17mol/L氯化钠、0.17mol/L氯化铵、0.17mol/L醋酸胺、0.17mol/L硝酸钠、0.12mol/L草酸铵、0.12mol/L硫酸钠、0.32mol/L葡萄糖、0.32mol/L甘油、0.32mol/L乙醇、0.32mol/L丙酮。 • 材料:兔血、红细胞 • 方法:
1.3 材料与方法 1、50%兔红细胞悬液的制备: 制备流程如下: 以无菌方法抽取兔子耳缘静脉血液(1 mL兔血加0.9%生理盐水9 mL)混匀,离心(3000rpm)5min 弃上清 取沉淀 加0.9%生理盐水, 离心(3000rpm)5min,重复3次 弃上清 取沉淀,用生理盐水稀释,制成 50%兔红 细胞悬液备用
1.3 材料与方法 2、溶血现象的观察: 取试管1支(0号管),加入纯水 ,再加入2滴制备好的50%兔红细胞悬液,注意观察溶液颜色的变化,由不透明的红色悬液变成透明的血红蛋白溶液(红细胞发生破裂,造成100%红细胞溶血,使光线比较容易透过溶液)。 3、红细胞的渗透性 (1)取试管1支(1号管) ,加入0·17mol/L氯化钠溶液3ml,再加入2滴制备好的50%兔红细胞悬液,轻轻摇动,混匀后静置于温室中,观察试管中发生溶血的时间及其变化。 注意是否有颜色变化?是否有溶血现象?为什么?
1.3 材料与方法 4、分别在下列几种等渗溶液中进行实验,步骤见表(2-10号管)。 0.32mol/L葡萄糖 、0.17mol/L氯化铵、 0.17mol/L醋酸铵、0.17mol/L硝酸钠 、 0.12mol/L草酸铵 、0.12mol/L硫酸钠、 0.32mol/L甘油 、0.32mol/L乙醇 、 0.32mol/L丙酮 六、注意事项: 1、离心机使用时,要将配平后的离心管对称放置在离心机内,禁止未配平就放入离心机和非对称放置离心管。 2、试管中有红细胞和测试溶液时,不应强力摇晃,以免造成人为的红细胞破裂。 3、目测法判断标准:快速溶血:+++;慢速溶血:++或+;不溶血:-。
1.4 实验结果 • 分析