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El ADN y sus aplicaciones forenses y jurídicas. Dr. Juan Manuel Álvarez López Facultad de Ciencias Químicas B.U.A.P. Marcadores genéticos nucleares microsatélites.

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Presentation Transcript
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El ADN y sus aplicaciones forenses y jurídicas

Dr. Juan Manuel Álvarez López

Facultad de Ciencias Químicas B.U.A.P.

marcadores gen ticos nucleares microsat lites
Marcadores genéticos nucleares microsatélites
  • D8S1179, D2S11, D7S820, CSF1PO, D3S1358, TH01, D13S317, D16S539, D2S1338,D19S433, VWA, TPOX, D18S51, D5S818, FGA y AMELOGENINA.
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Se amplifican con oligonucleótidos específicos utilizando el sistema AmpF STR identifiler PCR Amplification kit de la compañía Applied Biosystems. Para la reacción de la PCR se utilizó un termociclador modelo 2400 de Perkin-Elmer.

particularidades del genoma
Particularidades del genoma
  • El genoma humano nuclear consiste en 22 pares de cromosomas autosómicos y un par de cromosomas sexuales, X e Y, cuya combinación determina el sexo femenino (XX) o masculino (XY).
  • En conjunto, cada célula somática contiene 46 cromosomas.
estructura del genoma humano
ESTRUCTURA DEL GENOMA HUMANO
  • El genoma humano está constituido por unos 3.000 millones de pares de bases.
  • Sólo el 2% del ADN humano es codificante, o sea, forma parte de los genes.
  • El 98% restante constituye el ADN no codificante al que se le atribuye, entre otras desconocidas, una función estructural y reguladora.
aplicaciones del estudio del adn
Aplicaciones del estudio del ADN
  • Análisis de paternidad
  • Análisis de maternidad
  • Estudios familiares
  • Estudios de hermandad
  • Estudios de paternidad y maternidad
  • Procesos penales
  • Identificaron de cadaveres y restos humanos
casos especiales para probar paternidad
Casos especiales para probar paternidad
  • Estudiando los restos fetales procedentes de abortos o infanticidios y supuestos padres biológicos.
  • Estudiando el liquido amniótico o los restos fetales procedentes del aborto, madre biológica y al sospechoso de la violación.
identificaci n de restos cadav ricos
Identificación de restos cadavéricos
  • La identificación de los restos cadavéricos procedentes de los accidentes de trafico, grandes catástrofes, personas desaparecidas, etc. constituye un tipo de análisis muy solicitado en el laboratorio de Biología forense desde que se incorporaron las técnicas del ADN a la pericia forense.
identificaci n por adn mitocondrial
IDENTIFICACIÓN POR ADN MITOCONDRIAL
  • Igual estructura genética mitocondrial en todas las generaciones que comparten un mismo linaje materno, circunstancia que responde a su transmisión hereditaria sólo por vía materna y sin sufrir modificaciones en su pasaje de madres a hijos
i indicaciones espec ficas para su utilizaci n
IIndicaciones específicas para su utilización:
  • Análisis de restos humanos de larga data o sometidos a situaciones externas altamente desfavorables

b) muestras con escasa cantidad de ADN nuclear disponible y/o en estado de degradación importante,

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c) identificación con familiares lejanos, siempre que el parentesco reclamado lo sea por vía materna

d) análisis de pelos hallados en el lugar de un hecho criminal.

identificacion por marcadores del cromosoma y haplotipo
IDENTIFICACION POR MARCADORES DEL CROMOSOMA "Y“ (haplotipo)

a) Es propio de cada individuo

b) Se transmite de padres a hijos sin sufrir modificaciones, por lo que los miembros masculinos de una familia compartirán el mismo haplotipo.

*Utilizado en casos de violación

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AMPLIFICACIÓN DE ADN POR PCR PARA EL

ESCLARECIMIENTO DE UN ASESINATO

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  • 100 pb Víctima A B C 100 pb
pelos con bulbo
PELOS CON BULBO
  • No se recomiendan como muestras de referencia, debe preferirse hisopados bucales o muestras sanguíneas.
  • De ser necesario, UN SOLO pelo con bulbo es suficiente, pero se recomienda recolectar no menos de tres mediante arrancado, y fijarlos mediante una cinta adhesiva a una placa de cartulina o plástico. Se sugiere no usar portaobjetos de vidrio, ya que pueden romperse durante el traslado.
cad veres
Cadáveres
  • EN BUEN ESTADO DE CONSERVACION
  • SANGRE post-mortem: 200 microlitros (anticoagulante tipo EDTA), colocar sobre papel de filtro.
  • MUSCULO ESQUELETICO: Aprox 1 gr. Se almacena en un recipiente de plástico y tapón de rosca. Conservar en refrigeración
  • PIEZAS DENTALES: 2 (molares). Dejar en reserva a temperatura ambiente, con el fin de evitar la exhumación si se requieren estudios de ADN meses o años después.
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EN AVANZADO ESTADO DE PUTREFACCION O ESQUELETIZADOS 

  • HUESO LARGO: Fémur, húmero…
  • PIEZAS DENTALES: 2 (molares). No dañados externamente ni sometidos a endodoncias.
hisopados bucales
HISOPADOS BUCALES
  • No se trata de “saliva” sino de células epiteliales retiradas de la mucosa bucal.
  • 2 Hisopos de ambos carrillos, que se colocan en sobres de papel –nunca de polietileno- para evitar la proliferación bacteriana. Los envoltorios de polietileno o celofán, condensan la humedad y favorecen la degradación.
quemados o parcialmente carbonizados
QUEMADOS O PARCIALMENTE CARBONIZADOS
  • Cuando la carbonización no es total es posible analizar MÚSCULO ESQUELÉTICO de zonas profundas.
  • Cuando la carbonización es total, es recomendable recolectar huesos o dientes, seleccionando aquellos que a simple vista se encuentren en mejor estado.
otras muestras de referencia de individuos fallecidos
OTRAS MUESTRAS DE REFERENCIA DE INDIVIDUOS FALLECIDOS
  • En hospitales (muestras de sangre, biopsias en parafina, o preparaciones histológicas. No utilizar tejidos fijados en formol.
  • Ámbito familiar (peines, maquinillas de afeitar, saliva en sellos o sobres…)