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神经母细胞瘤组织 MYCN 扩增水平 与 Ki-67 LI 等生物学指标的关系

神经母细胞瘤组织 MYCN 扩增水平 与 Ki-67 LI 等生物学指标的关系. 王会娟 王焕民 宫丽平 伏利兵 秦红 吕蓓蓓. 神经母细胞瘤 (NB). 儿童最常见的颅外实体恶性肿瘤 具有自然消退和快速进展两种截然不 同的生物学特点. N-Myc 基因. N-Myc 基因扩增 主要发生于进展期 NB 中，与肿瘤的侵袭行为和不良预后密切相关 为 NB 危险度的评估、治疗方案的选择、预后的判断提供分子学依据. Ki-67 抗原. 是一种具有代表性的细胞增殖标记， Ki-67 LI 定量地反映肿瘤的增殖情况。

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神经母细胞瘤组织 MYCN 扩增水平 与 Ki-67 LI 等生物学指标的关系

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Presentation Transcript

  1. 神经母细胞瘤组织MYCN扩增水平与Ki-67 LI等生物学指标的关系 王会娟 王焕民 宫丽平 伏利兵 秦红吕蓓蓓

  2. 神经母细胞瘤(NB) 儿童最常见的颅外实体恶性肿瘤 具有自然消退和快速进展两种截然不 同的生物学特点

  3. N-Myc基因 N-Myc基因扩增主要发生于进展期NB中，与肿瘤的侵袭行为和不良预后密切相关 为NB危险度的评估、治疗方案的选择、预后的判断提供分子学依据

  4. Ki-67抗原 是一种具有代表性的细胞增殖标记， Ki-67 LI定量地反映肿瘤的增殖情况。 Ki-67标记指数( Labeling Index, LI)： 指肿瘤细胞中Ki-67阳性细胞所占的百分比。

  5. N-Myc扩增与Ki-67 LI N-Myc 扩增与Ki-67 LI和NB的临床病理因 素间分别有何关系？ N-Myc 扩增与Ki-67 LI 间有何关系？

  6. 研究对象 2008.9至2009.3 30例石蜡包埋组织标本 神经母细胞瘤（NB） 节细胞性神经母细胞瘤(GNB)

  7. 研究对象 性别：男：19例，女：11例； 年龄：2月～9岁6月 ＜18个月 13例， ≥18个月 17例 原发部位：肾上腺 23例， 非肾上腺 7例

  8. 研究对象 病理分型： NB： 分化型 8例，分化差型 7例， 未分化型 1例，不明确型 7例 . GNB: 7例 临床参照INSS系统分期： 1期 5例， 2期 4例， 3期 6例， 4期 11例， 4S期 4例

  9. 研究内容 • N-Myc 扩增与Ki-67 LI分别与 NB的临床病 理因素(性别 、年龄、原发部位、分期、分 型、NSE、VMA)间的关系。 2. N-Myc 扩增与Ki-67 LI 间的关系。

  10. 实验方法 N-Myc基因的检测：FISH 探针：位点特异性 N-myc/CEP2双色探针 N-Myc基因 获得：拷贝数4～9个； 扩增：拷贝数≥10个。

  11. 实验方法 Ki-67 LI:免疫组化二步法 抗体:鼠抗人Ki-67抗原免疫组化单克隆抗体 阳性细胞是指细胞核内出现棕黄色颗粒 <10% （－） 10%～30% ( + ) ≥30% (++)

  12. 统计学分析 SPSS 11.5软件 确切概率法。 秩和检验(Mann-Whitney U test， Kruskal–Wallis test)。 P＜0.05认为有统计学意义。

  13. 1、2、4S期 15.38%（2/13） 1 扩增率 P＞0.05 3、4期 17.65%（3/17） FISH检测N-Myc拷贝数的结果 1.1 5例出现扩增（拷贝数≥10个），扩增率为16.67% 病理诊断: NB 均为男性，就诊时年龄均＞18个月 3例为进展期，2例为早期分化差型

  14. 1 FISH检测N-Myc拷贝数的结果 表1.5例扩增病例的临床资料

  15. 2 N-Myc拷贝数水平与临床病理因素的关系 表2. 病例数 Pa：N-Myc扩增组和N-Myc无异常组之间的P值 ; Pb : N-Myc获得组和N-Myc无异常组之间的P值 ; Pc : N-Myc增多组（获得组+扩增组）与无异常组之间的P值。

  16. 2 N-Myc拷贝数水平与NB临床病理因素的关系 2.1N-Myc扩增水平在另外6组（包括患者性别、年 龄、肿瘤原发部位、是否接受化疗以及血清 NSE、24小时尿VMA水平）中的差异均无统计 学意义（P＞0.05）。

  17. 附图 N-Myc无异常，40×100 绿色信号代表N-Myc基因

  18. N-Myc扩增 40x100 绿色信号代表N-Myc基因

  19. Ki-67 LI与NB其它临床因素间的关系 3 表3. Ki-67 标记指数与肿瘤组织学类型之间的关系 P<0.05，说明两组的Ki-67 LI有显著差异。由于NB组的平均秩次是18.13大于GNB组的平均秩次6.86，故NB组的Ki-67 LI明显大于GNB组。

  20. Ki-67 LI与NB其它临床因素间的关系 3 表4. Ki-67 LI与NB病理类型之间的关系 P<0.05，说明两组的Ki-67 LI有显著差异。由于未分化+分化差型组的平均秩次是5.88，大于组分化型组的平均秩次11.13，故Ki-67在未分化型和分化差型中的表达明显高于分化型

  21. Ki-67 LI与NB其它临床因素间的关系 3 表5. Ki-67 LI与化疗的关系 P<0.05，说明两组的Ki-67 LI有显著差异。由于化疗组的平均秩次是8.93，小于未化疗组的平均秩次16，故化疗组Ki-67表达低于未接受化疗组。

  22. Ki-67 LI与NB其它临床因素间的关系 3 Ki-67 LI 在年龄、性别、肿瘤的分期各组中的 差异无统计学意义

  23. Ki-67 （－） 4x10 附图

  24. Ki-67 LI （+） 10x10

  25. Ki-67 LI （++） 10x10

  26. Ki-67 LI >50% 10x10

  27. 4 MYCN扩增水平与Ki-67 LI之间的关系

  28. 总之，N-Myc扩增与Ki-67 LI在NB分期、分型中的意义并不是完全一致的。 N-Myc扩增率仅为20-25%，而 Ki-67 LI 容易受化疗的影响，因此，两者结合分析肿瘤的侵袭行为和恶性程度会更加合理。

  29. 2 1 3 结 论 N-Myc基因拷贝数增多在NB中较GNB中多见，在进展期（3、4期）NB中较早期（1、2、4S期）NB中多见。 Ki-67 LI在NB中明显高于GNB，在NB分化差型中的表 达明显高于分化型；化疗影响Ki-67的表达。 Ki-67 LI在N-Myc基因扩增组明显高于非扩增组。

  30. 5 4 N-Myc基因拷贝数水平与Ki-67 LI两者结合分析、评估NB的侵袭行为和恶性度更加合理。 应该将N-Myc、Ki-67 LI的检测作为NB的常 规检查。

  31. 感谢聆听 敬请指导

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