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第十四章 唾液(斑)检验

第十四章 唾液(斑)检验. 一、           唾液(斑)的特点 唾液来源: 唾液腺的分泌物--- 腮 腺 、 颌下腺、舌下腺、小唾液腺 浆液 粘 液 唾液成分: 水分占99.4%, 有机物---粘/球蛋白质、氨基酸、尿素、尿酸、唾液淀粉酶、 麦芽糖酶、血型物质 无机物---钠、钾、氯、钙、铵、磷酸盐、碳酸盐、硫氰酸盐

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第十四章 唾液(斑)检验

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Presentation Transcript


  1. 第十四章 唾液(斑)检验

  2. 一、           唾液(斑)的特点 唾液来源:唾液腺的分泌物--- 腮 腺、颌下腺、舌下腺、小唾液腺 浆液 粘 液 唾液成分:水分占99.4%, 有机物---粘/球蛋白质、氨基酸、尿素、尿酸、唾液淀粉酶、 麦芽糖酶、血型物质 无机物---钠、钾、氯、钙、铵、磷酸盐、碳酸盐、硫氰酸盐 其余为固形物(口腔脱落上皮细胞、大量细菌、食物残渣) 唾液性状:无色、无味、接近中性(ph6.6-7.1),低渗粘蛋白多的时候 呈粘液状,粘蛋白少的时候较稀薄 唾液分泌:正常成年人每天分泌唾液1.0-1.5L。

  3. 一、 唾液(斑)的证明 淀粉酶+口腔黏膜上皮细胞 理由 :唾液中含有大量的淀粉酶,是进行唾液斑斑痕种类鉴定的依据之一,但淀粉酶分布极广(人类粪便、几乎所有的植物、真菌等都含有淀粉酶、人体的其他分泌液液含少量的淀粉酶),单纯检出淀粉酶不能确定唾液斑。 方法:淀粉酶检测:淀粉 + 碘 ----- 蓝色 (-)不含淀粉酶 淀粉酶(检材) 糖 + 碘 ----- 无色 (+)可能是唾液 + 碱性铜 ------ 棕红色沉淀 证明糖的存在 上皮细胞:检材—离心----涂片----HE染色 如果检出食物残渣,更支持是唾液斑的检测结论

  4. 三、唾液斑的遗传标记检测 ABO血型----漱口,自然流出唾液置于干净容器,水浴中煮沸10min。灭火血型分解酶 分 泌 型人的唾液斑-----中和试验测定ABO血型 非分泌型人的唾液斑----酶标抗体免疫测定的方法 蛋白/酶型----可以用特殊的双环杯提取腮腺液 多态性蛋白Pa腮腺酸性蛋白 Pb 腮腺碱性蛋白 Pn腮腺中性蛋白 Pm 腮腺中带蛋白 Ph腮腺重蛋白 Pr 唾液富含脯氨酸蛋白 Db唾液双带蛋白 GL 唾液糖蛋白 、 多态性酶 唾液淀粉酶、唾液酯酶、唾液酸性磷酸酶、 唾液过氧化物酶等 DNA分析----唾液中含有口腔粘膜脱落上皮细胞---提取DNA---基因组DNA/线粒体DNA 唾 液:漱口水或口腔式子,提取DNA 唾液斑:烟蒂(注意:取有唾液的部分进行DNA提取)

  5. 四、唾液(斑)的性别鉴定 分子杂交---男性特有的Y染色体DNA片断作为探针检测性别 特异性高、但费时耗力、对DNA的含量及其完整性要求较高 PCR技术---性染色体特异性片断---片断的有无 性染色体同源性片断---片断的数目 ZFP----锌指状蛋白基因:5’ZFYX+3’ZFY/ZFX,男340,女488 AMG--牙釉质蛋白基因:根据碱基缺失部位两侧的同源序列设计引物

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