410 likes | 598 Views
Curriculum Vitae KMA. Education : FoM Unsri 1977 FoM Unair 1982 FoM Monash Univ. 1983 Post : Professor Andrology & MB Former Dean FoM Unsri WHO Temporary Advisor Members Executive council PANDI President PANDI President PERSANDI Member of Indonesian Andrology Collegium
E N D
Curriculum Vitae KMA • Education : • FoM Unsri 1977 • FoM Unair 1982 • FoM Monash Univ. 1983 • Post : • Professor Andrology & MB • Former Dean FoM Unsri • WHO Temporary Advisor • Members Executive council PANDI • President PANDI • President PERSANDI • Member of Indonesian Andrology Collegium • Dean FoM Muhammadiyah University Palembang KMA, HIGERI SURABAYA,2011
UJI IN-VIVO DAN IN-VITRO CAIRAN SERVIKS DAN KAITAN DENGAN RESPON IMUN DAN KAPASITASI SPERMA Kiagus Muhammad Arsyad Fakultas Kedokteran Universitas Sriwijaya KMA, HIGERI SURABAYA,2011
Pokok bahasan • Pendahuluan • Faktor Imunologik Infertilitas • Fertilisasi dan implantasi • Kapasitasi Sperma • Uji In-vivo dan Invitro KMA, HIGERI SURABAYA,2011
1. PENDAHULUAN • Faktor Etiologi PIA : • Suami, 23 % • Istri, 49 % • Unexplained, 28 % • Dari 28 % unexplained , 10 – 15 % disebabkan oleh faktor immunologik, dengan banyak komponen sistem imun sebagai penyebab. KMA, HIGERI SURABAYA,2011
In infertile women ・Autoimmunity to ovaries ― autoimmune oophoritis ― antibodies to zona pellucida ・ Isoimmunity to sperm ― antibodies to sperm ・ autoimmune diseases ― autoimmune thyroiditis ― antiphospholipid antibody syndrome ・ Endometriosis ― inflammatory cytokines and chemokines In infertile men ・ Autoimmunity to testis ― autoimmune orchitis ― antibodies to sperm Faktor Immunologik Infertilitas KMA, HIGERI SURABAYA,2011
KATEGORI RESPON IMUN PADA WANITA • Di dalam tubuh wanita ada 5 kategori Respon imune : • HLA (Human Leukocyte Antigen) • APA (Antiphospholipid Antibodies) • ANA (Antinuclear Antibodies) • ASA (Antisperm Antibodies) • N K cell (Natural Killer Cell) KMA, HIGERI SURABAYA,2011
FERTILISASI DAN IMPLANTASI KMA, HIGERI SURABAYA,2011
FERTILISASI DAN IMPLANTASI KMA, HIGERI SURABAYA,2011
3 FASE PENETRASI Oocyte OLEH SPERMA KMA, HIGERI SURABAYA,2011
REAKSI ACROSOME KMA, HIGERI SURABAYA,2011
REAKSI ACROSOME KMA, HIGERI SURABAYA,2011
PEMERIKSAAN INTERAKSI SPERMA DAN LENDIR SERVIKS • Pemeriksaan interaksi spermatozoa dengan lendir serviks ada 2 : IN VIVO Uji pasca senggama IN VITRO Simplified slide test Sperm Penetration test KMA, HIGERI SURABAYA,2011
UJI PASCA SENGGAMA • TUJUAN : 1. Menentukan jumlah spermatozoa aktif dan menilai sperm survival di dalam lendir serviks (Sobrero & Mc Leod, 1962), 2. Meevaluasi perilaku sperma beberapa jam setelah coitus (peran resevoir lendir servisk (Moghissi, 1976). 3. Penilaian adanya antibodi sperma pada pria atau wanita. 4. Menilai lendir seriks KMA, HIGERI SURABAYA,2011
UJI PASCA SENGGAMA • WAKTU : • Waktu pemeriksaan Uji Pasca Senggama dilakukan sedekat mungkin dengan waktu Ovulasi tetapi tetap sebelum ovulasi. • Penentuan didasarkan pada : • Siklus haid , BBT, Perubahanan cairan serviks, • Sitologi vaginal, Pemeriksaan Hormon LH dan Estrogen . • Cairan serviks diperiksa di lab antara 9 – 14 jam setelah senggama KMA, HIGERI SURABAYA,2011
UJI PASCA SENGGAMA • INSTRUKSI UNTUK PIA : • Abstinensia seksualis 2 hari, • Senggama dilakukan pada malam sebelum tanggal pemeriksaan, • Tidak boleh memakai pelicin KMA, HIGERI SURABAYA,2011
UJI PASCA SENGGAMA • PROSEDUR PEMERIKSAAN : • Masukkan speculum tanpa pelicin ke dalam vagina, • Ambil sebanyak mungkin cairan semen di fornix posterior vagina dengan : spuit tuberclin tanpa jarum, ataupipet pasteur • Dengan pipet atau spit lain diisap secukupnya cairan seviks dari canalis endocervicalis, • Teteskan cairan serviks ke atas objek glass dan tutup dengan gelas penutup • Periksa di bawah mikroskop dengan pembesran 400 x. KMA, HIGERI SURABAYA,2011
UJI PASCA SENGGAMA • YANG DIPERIKSA ; • Vaginal pool semen sample • Lendir seviks • Hasil uji pasca senggama KMA, HIGERI SURABAYA,2011
UJI PASCA SENGGAMA • YANG DIPERIKSA ; • Vaginal pool semen sample - spermatozoa mati dalam waktu 2 jam di dalam vagina - periksa preparat basah dari vaginal pool untuk memeriksa adanya spermatozoa KMA, HIGERI SURABAYA,2011
UJI PASCA SENGGAMA • YANG DIPERIKSA ; 2. Lendir seviks - jumlah spermatozoa dibagian bawah canalis cervicalis yang dinyatakan per ul - jumlah spermatozoa per x 400 HPF = 10 spermatozoa /20 nl lendir serviks atau = 500 spermatozoa /ul - Motilitas spermaatozoa di dalam lendir serviks di rangking sbb: PR = progressive motility NP = non progressive motility IM = Immotile Spermaozoa KMA, HIGERI SURABAYA,2011
UJI PASCA SENGGAMA Hasil uji pasca senggama • Interpretasi : • Uji negatif jika tidak dijumpai spermatozoa, • Jika dijumpai PR spermatozoa di endocervik AB (-) (Oei et al, 1995) • Jika dijumpai NP spermatozoa dengan shaking phenomenon > AB (+) di cairan serviks atau di spermatozoa KMA, HIGERI SURABAYA,2011
FORM UJI PASCA SENGGMA KMA, HIGERI SURABAYA,2011
PEMERIKSAAN IN - VITRO • Uji In vitro dilakukan jika Uji Psaca Senggama Negatif, • Menjadi lebih informatif jika di lakukan dengan uji silang memakai sperma donor dan lendir serviks donor, • Memakai lendir serviks tengah siklus • Dikerjakan 1 jam setelah pengambilan sampel sperma KMA, HIGERI SURABAYA,2011
PEMERIKSAAN IN - VITRO • Tujuan pemeriksaan in-vitro : • Untuk membandingkan berbagai kualitas berbagai macam lendir serviks, • Untuk menilai berbagai kualitas sample sperma • Ada 2 : • In-vitro simplified slide test • Capillay tube test KMA, HIGERI SURABAYA,2011
1. SIMPLIFIED SLIDE TEST • Prosedur : • Teteskan lendir servikke atas objek glas kemudian t berutup dengan gelas penutup agar lendir merata di bawah glas ppenutup, • Teteskan semen di tiap sisi gelas penutup sehingga semen bis berkontak dengan lendir servik • Masukkan ke dalam inkubator selama 3 ment pada temperatur 37 C ( gelas objek di taruh pada • Petri dish di alaskertas basah dan di tutup • Periksa interface dengan mikroskop phase kontras 400 x KMA, HIGERI SURABAYA,2011
1. SIMPLIFIED SLIDE TEST • Pengamatan : • Penetrasi semen ke lendir servik • Penetrasi semen ke lendir serviks tetap terjadi meskipun Azoospermia, • Spermatozoa masuk ke dalam lendir serviks melalaui penetrasi ini yang berbentuk phalanges • Diamati adanya sperma di dalamlendir serviks, jarak tempuh dan motilitasnya KMA, HIGERI SURABAYA,2011
1. SIMPLIFIED SLIDE TEST • Interpretasi : • Normal jika spermatozoa yang menembus lendir serviks 90% motil, • Buruk : jika spermatozoa tidak mampu menembus lendir serviksepanjang 500u, ini menujukkan adanya masala pada interaksi semen dan lendir serviks, KMA, HIGERI SURABAYA,2011
1. SIMPLIFIED SLIDE TEST • Interpretasi : • Abnormal : • 1. spermatozoa berhasil menembus lendir servikstetapi segera menjadi immotile atau shaking phenomenon, atau • 2. spermatozoa tidak menembus semen- lendir servisk interfase dan phalanges tidak terbentuk. Ini menunjukka adanya Anti bodi antisperm I lendir servis atau di membrane spermatozoa. KMA, HIGERI SURABAYA,2011
CAPILLARY TUBE TEST • Capilary tube test aslinya didesain oleh Kremer (1965), dan saat ini ada banya modifikasinya • Tes ini mengukur kemampuan spermatozoa untuk menembus colum lendir serviks yang ada dalam tabung kapiler. • Prosedur terdiri dari : • Peralatan • Teknis pemeriksaan • Observasi • Interpretasi KMA, HIGERI SURABAYA,2011
2. CAPILLARY TUBE TEST • Peralatan KMA, HIGERI SURABAYA,2011
2. CAPILLARY TUBE TEST 2. Prosedur : 1. Masukkan 100ul semen yang telah likuefaksi 1 jam setelah ejakulasi ke dalam reservoar , 2. Isap lendir serviks ke dalam kapiler, dan tutup salah satu ujungnya dengan dempul 3. Masukkan ujung kapiler yang terbuka ke tabung reservoar dengan jarak 0,5 cm 4. letakkan dalam posisi horizontal dalam inkubator dengan suhu 37o C selama 2 jam, 5. Amati pipa kapiler dengan mikroskop pembesaran 100 x 6 . Masukkan kembali keinkubator dan amati kembal setelah 24 jam KMA, HIGERI SURABAYA,2011
2. CAPILLARY TUBE TEST 3. Pengamatan : Setelah 2 jam periksa jarak migrasi kepadatan penetrasi, pengurangan migrasi dan spermatozoa dengan forward motility, a. Jarak migrasi : catat jarak dari ujung kapiler yang ada dalam reservoar sampai jarak terjauh spermatozoa di dalam kapiler, b. Kepadatan penetrasi : ukur di 1 dan 4,5 cm dari ujung kapiler dalam reservoar. Pada tiap jarak tersebut catat jumlah spermatozoa/lpb x 100 c. Baca hasl ditiap jarak sesusai tabel 3.3. KMA, HIGERI SURABAYA,2011
2. CAPILLARY TUBE TEST 3. Pengamatan : KMA, HIGERI SURABAYA,2011
2. CAPILLARY TUBE TEST 4. Interpretasi : KMA, HIGERI SURABAYA,2011
KESIMPULAN • Adanya respon imun dari wanita pada lendir servik dapat mencegah penetrasi spermatozoa melalaui lendir serviks untuk proses fertilisasi di tuba, • Adanya antibodi pada sperma menyebabkan sperma tidak dapat menembus lendir serviks • Kegagalan dalam proses penetrasi sperma karena tidak baiknya proses reaksi acrosome KMA, HIGERI SURABAYA,2011
KESIMPULAN KMA, HIGERI SURABAYA,2011
KESIMPULAN KMA, HIGERI SURABAYA,2011
S A R A N • UJI REAKSI SPERMA LENDIR SERVIKS PADA PIA HARUS DILAKUKAN UNTUK MENCARI FAKTOR IMUN SEBAGAI PENYEBAB, • UJI YANG DIANJURKAN : • UJI PASCA SENGGAMA DAN • SIMPLIFIED SLIDE TEST KMA, HIGERI SURABAYA,2011
Thank You for your kind attention KMA, HIGERI SURABAYA,2011