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抗微生物药物敏感试验的 质量控制

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抗微生物药物敏感试验的 质量控制 - PowerPoint PPT Presentation


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抗微生物药物敏感试验的 质量控制. 上海市临床检验质量控制中心 娄 峥. 抗微生物药物敏感试验分类. 抗细菌的 抗需氧菌的 抗苛氧菌的 抗厌氧菌 的 抗真菌的 抗其它微生物的. 抗微生物药物敏感试验分类. 纸片法 稀释法 仪器法 E-test 法 分子生物学方法. 药物敏感试验影响因素. 操作步骤的规范性 技术人员素质 质控菌株污染与变异 0.5 号麦氏标准管不匀或变质 细菌悬液的浓度 试验用培养基、药敏纸片,药敏板条的质量问题 错误的孵育时间、温度或孵育气体 结果判读错误 数据录入时的抄写错误.

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抗微生物药物敏感试验的质量控制

上海市临床检验质量控制中心 娄 峥

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抗微生物药物敏感试验分类
  • 抗细菌的
  • 抗需氧菌的
  • 抗苛氧菌的
  • 抗厌氧菌 的
  • 抗真菌的
  • 抗其它微生物的
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抗微生物药物敏感试验分类
  • 纸片法
  • 稀释法
  • 仪器法
  • E-test法
  • 分子生物学方法
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药物敏感试验影响因素
  • 操作步骤的规范性
  • 技术人员素质
  • 质控菌株污染与变异
  • 0.5号麦氏标准管不匀或变质
  • 细菌悬液的浓度
  • 试验用培养基、药敏纸片,药敏板条的质量问题
  • 错误的孵育时间、温度或孵育气体
  • 结果判读错误
  • 数据录入时的抄写错误
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一、药敏试验操作规程(1)
  • 方法名称,原理,适用范围
  • 实验材料的规格(编号)、品牌、供应商
  • 操作步骤,注意事项,结果判断标准,报告方式
  • 质控方法,结果判断标准,失控处理
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药敏试验操作规程(2)
  • 用仪器开展药敏试验的要编写使用仪器的操作规程
  • 用与仪器配套的药敏试验板条的要按照仪器商的规定编写质控方法和失控处理。
  • 编写者,编写日期
  • 科室负责人对该检验项目的认可签字
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二、人员要求
  • 接受过病原微生物学方面的教育。
  • 具有临床微生物检验相关理论和基本操作技能。
  • 掌握NCCLS制定的标准方法,按文件规定对结果作判断、解释。
  • 熟悉临床微生物检验质控理论和方法。
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三、仪器设备的质控
  • 培养箱
  • 二氧化碳培养箱
  • 冰箱

每天观察并作记录

  • 仪器的质控应按照制造商的要求定期进行
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四、检验材料的质控
  • 培养基
  • 药敏纸片
  • 药敏板条
  • 0.5麦氏浊度标准管
  • 标准菌株
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培养基种类
  • MH琼脂:用于需氧菌药敏试验(纸片法和琼脂稀释法)
  • 调节好阳离子的MH肉汤:用于需氧菌药敏试验(肉汤稀释法)
  • HTM培养基:用于流感嗜血杆菌的药敏试验
  • GC琼脂:用于淋病奈瑟菌的药敏试验
  • 含5%脱纤维羊血的MH培养基:用于肺炎链球菌及其它链球菌的药敏试验(纸片法)
  • 添加马血的阳离子调整过的MH肉汤:用于链球菌的药敏试验(稀释法)
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(一)培养基的质量控制
  • 一般性状
  • 无菌试验
  • 培养基性能测试
  • MH平板中胸腺嘧啶或胸腺嘧啶核苷含量的测定

复方新诺明纸片-粪肠球菌(ATCC29212或33186)

  • 对二价阳离子含量的测定

氨基糖苷类或四环素纸片-铜绿假单胞菌-钙镁离子

头孢碳烯类-细菌-锌离子

  • 使用期限
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(二)药敏纸片的质控
  • 新批号药敏纸片使用前用质控菌株测试
  • 平时使用前1~2小时,从冰箱取出放室温平衡
  • 低温贮存

-20℃保存:

  • 大量的,近期不用的
  • 性能不稳定的:亚胺培南,头孢克洛,克拉维酸复合剂

4 ℃保存:

少量的,正在使用的,性能稳定的

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(三)药敏板条的质控
  • 按照生产厂商的要求,定期对同一批号的药敏板条进行质控。
  • 更换批号时应作质控。
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(四)0.5麦氏浊度标准管的质控

每月用分光光度计测吸光度,OD值应在

0.08~0.10之间

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(五)标准菌株的质控
  • 种类与应用范围
  • 菌株的保存
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需氧菌药敏试验的标准菌株
  • 大肠埃希菌 ATCC 25922

用于肠杆菌科细菌、霍乱弧菌药敏试验的质控

  • 金黄色葡萄球菌 ATCC 25923

用于葡萄球菌属或肠球菌属细菌药敏试验的质控(纸片法)

  • 金黄色葡萄球菌 ATCC 29213

用于葡萄球菌属细菌药敏试验的质控(稀释法)

  • 粪肠球菌 ATCC 29212

用于肠球菌属细菌药敏试验的质控(稀释法)

  • 铜绿假单胞菌 ATCC 27853

用于铜绿假单胞菌和不动杆菌属细菌药敏试验的质控

  • 大肠埃希菌 ATCC 35218

用于β-内酰胺酶抑制剂复合药药敏试验的质控

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苛养菌药敏试验质控菌株
  • 流感嗜血杆菌 ATCC 49247 / 49766

用于流感嗜血杆菌属细菌药敏试验的质控

  • 淋病奈瑟菌 ATCC 49226

用于淋病奈瑟菌药敏试验的质控

  • 肺炎链球菌 ATCC 49619

用于肺炎链球菌及其它链球菌的药敏试验的质控

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质控菌株可用三种方法保存
  • 冷冻干燥
  • 冷冻
  • 冷藏
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质控菌株的使用
  • 质控菌株对药物敏感性测试应按NCCLS规定的标准方法进行。
  • 使用与临床分离株相同的抗微生物药物。
  • 日常使用的质控菌应放冰箱冷藏,每周移种。
  • 每月必须用冷冻菌株或冻干菌株作更换。
  • 不使用变异的菌株。
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五、质控方法与规定(一)
  • 建立药敏质控系统
  • 每种药物/细菌组合的30个数据中,允许3个数据超出规定范围。
  • 满足上述要求可将质控频率改为每周一次。
  • 每周质控时,如果有一个数据超标,要查找原因。
  • 5日数据在控表明找到原因。
  • 找不到原因时,应恢复每日质控。
  • 在恢复每周质控之前,应再有30日连续质控数据。
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质控方法与规定(二)
  • 使用新批号的药敏纸片、MH培养基、药敏板条时应做质控试验。
  • 参加能力比对试验时,应做质控。
  • 检测时应开展质控:

三级医院每天做,二级医院每周做。