Download
1 / 10
100 likes | 278 Views
ריאקצית ה PCR. Polymerase Chain Reaction. מה מטרת הריאקציה. הגברת כמותית של קטע ספציפי של DNA פי יותר ממיליארד. משתמשים במערכת הלקוחה מהחי ומחקים אותה במבחנה – in-vitro. מתי משתמשים בריאקציה זו?. פיענוח פשעים – DNA מזירת הפשע בכמות מזערית משמשת לזיהוי הקרבן או הפושע.
E N D
ריאקצית הPCR Polymerase Chain Reaction
מה מטרת הריאקציה • הגברת כמותית של קטע ספציפי של DNA פי יותר ממיליארד. • משתמשים במערכת הלקוחה מהחי ומחקים אותה במבחנה – in-vitro.
מתי משתמשים בריאקציה זו? • פיענוח פשעים – DNA מזירת הפשע בכמות מזערית משמשת לזיהוי הקרבן או הפושע. • זיהוי חיידקים, וירוסים או אפילו DNA ממאובנים או מענבר וכד' • בדיקות גנטיות – הגברה כמותית של גן מסויים. • בדיקה של רצף DNA כלשהו למטרות ידע, מחקר. • שימוש בהנדסה גנטית – "השתלה" של DNA ממין אחד למין אחר כדי שיתבטא שם.
צעדים חוזרים על עצמם בין 30-40 פעמים מהי הריאקציה? דהנטורציה – הפרדת גדילי הDNA זה מזה חיבור התחלים – רצפי DNA ספציפיים המתאימים לקטע המסויים אותו רוצים להגביר. הארכת הDNA על ידי Taq Polymerase
מה צריך לביצוע הריאקציה? • תחלים - רצפי נוקליאוטידים קצרים (b8-20) המתאימים למקום ספציפי בDNA שאותו רוצים להגביר. • אנזים Taq Polymerase המיוחד בכך שהוא עמיד בטמפרטורות הגבוהות והטמפרטורה האופטימלית לפעילותו היא 72°C. • בופר המתאים לאנזים. • נוקליאוטידים – בצורה של dNTP’s. • מקור לDNA בכמות מזערית.
מכשיר הPCR במכשיר מוכנסות המבחנות עם החומרים הנחוצים לריאקציה. המכשיר מעלה ומוריד טמפרטורה במהירות לפי תכנית.
הרצה של תוצרי PCR על ג'ל אלקטרופוריזה (שדה חשמלי) גילוי מוטציה לβתלסמיה
