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Bacteria

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Eucariote (con membranas internas). Procariote (sin membranas internas). Bacteria. Célula animal. Célula Vegetal. Herramientas clave en el estudio de la biología celular: - microscopía óptica - microscopía electrónica: alta resolución, técnicas de fijación,

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Presentation Transcript
slide1

Eucariote

(con membranas internas)

Procariote

(sin membranas internas)

Bacteria

slide2

Célula animal

Célula Vegetal

slide3

Herramientas clave en el estudio de la biología celular:

-microscopía óptica

- microscopía electrónica: alta resolución, técnicas de fijación,

histoquímica de membranas

- genética de levaduras: (mutantes)

- bioquímica: reconstitución in vitro e identificación de

componentes involucrados

- inmuno-histoquímica generación de anticuerpos

- biología molecular

- microscopía fluorescencia

- proteína verde fluorescente (GFP)

- microscopía confocal, FRAP (fluorescence recovery after bleaching)

- cámaras de alta resolución …...

slide4

Cytoplasm

Nucleus

Poro

Nuclear

Núcleo(esquema)

Función: Regulación

- Expresión genes

- Replicación DNA

- Transducción de señales

…..

slide5

COMPARTIMENTOS DEL NUCLEO

Intercromatina:

- proteínas y RNP’s

- nuclear speckles (spliceosome)

- Cajal bodies (snRNP biogenesis)

- PML nuclear bodies (transcriptional

regulators)

...

slide6

Clase I:Lámina nuclear

Tipo filamentos intermedios

Clase II:Contacto NE con

lámina y cromatina

Clase III: Transporte

núcleo-citoplasma

Clase IV:Asociación DNA

slide7

PORO NUCLEAR

Función: Transporte núcleo-citoplásmico

slide8

Transporte núcleo-citoplásmico

(bi-direccional)

Pasivo:

5,000 MW are freely diffusable

17,000 MW-- take 2 min to establish equilibrium

44,000 MW--take 30 min to establish equilibrium

60,000 MW--cannot move in by diffusion

“Facilitado”:

Rápido y selectivo

Regulado

40-60kDA-MDa

Proteínas de transcripción, replicación, estructurales

Ribosomas ensamblados

tRNA’s….

slide9

Modelos de Funcionamiento del

Complejo del Poro Nuclear

Brownian motion

Selective phase model

Oily-Spaghetti

slide10

Transporte núcleo-citoplásmico

Proteínas

Karioferinas

Importina a / Importina b

Exportina 1 (crm1)

(Ran-GTP binding proteins)

NES (Nuclear Export Signal)

NLS (Nuclear Localization Signal)

Ran-GTP / Ran-GDP

(Núcleo / Citoplasma)

RanGAP (Citoplasma)

(GTPase Activating Protein)

RanGEF o RCC1 (Núcleo)

(Guanine Nucleotide

Exchange Factor)

slide11

Señales de Transporte Nucleo-citoplásmico

(Proteínas)

B: Básico (K o R)

J: Hidrofílico

Z: Hidrofóbico

X: Cualquiera

M9: hnRNP A1

slide12

Importación:

Proteínas a Núcleo

Importinas a y b

5

4

3

6

2

8

7

1

slide15

Transporte Nucleo-citoplásmico

Exportación de RNA’s (Crm1)

slide16

Transporte Nucleo-citoplásmico

Exportación de mRNA’s

slide17

ORGANIZACION DE CROMATINA

(dinámico)

Heterocromatina

- condensada a lo largo del

Ciclo celular

- estructura compacta inanccesible a

factores de modificación de DNA

- no genes

- NO transcripción

- periferia núcleo (cromosomas con

baja densidad genes)

Eucromatina

- no condensada en interfase

- transcripcción activa

- interior del núcleo (cromosomas con

alta densidad genes)

Localización de factores de regulación?

slide19

splicing

snRNA

SPLICING

slide20

Ciclo Celular en Células Diploides

(mitosis en células mamífero)

Membrana Nuclear

se fragmenta

Estructura de dos

membranas nucleares

Mitosis

~1 hora

~16 horas

Interfase (4n)

~3 horas

Interfase (2n)

~5 horas

(Síntesis DNA)

~7 horas

Go

slide22

Importin -Exportina?

Mitosis abierta vs cerrada