1 / 24

Extracció d’ADN

Extracció d’ADN. PRÀCTICA DE L’EXTRACCIÓ D’ADN. OBJECTIU. Mitjançant una tècnica molt senzilla podem extraure ADN de teixit animal i comprovar la seva estructura filamentosa.

morwen
Download Presentation

Extracció d’ADN

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

  1. Extracció d’ADN

  2. PRÀCTICA DE L’EXTRACCIÓ D’ADN

  3. OBJECTIU • Mitjançant una tècnica molt senzilla podem extraure ADN de teixit animal i comprovar la seva estructura filamentosa. • L’extracció es basa en el fet que els ions salins són atrets cap a les càrregues negatives de l’ADN permetent la seva dissolució i posterior extracció.

  4. MATERIAL • Tisores • Homogeneïtzador (batedora o morter) • Tela per filtrar (Gasa espessa) • Vareta de vidre • Vas de precipitats • Pipeta • Tub d’assaig

  5. PRODUCTES QUÍMICS • Detergent líquid comercial • NaCl 2M • Alcohol etílic de 96º • Aigua destil·lada

  6. PRODUCTE NATURAL • 20g de timus de vedella

  7. PROTOCOL Triturar els 20g de timus amb 100ml d’aigua a la batedora fins obtenir una massa homogènia i semilíquida. Deixar reposar, que sedimentin les partícules més grans. Passos 1r Amb les gases o tela filtrar repetides vegades el sobrenadant que no quedin partícules sòlides. 2n Afegir un volum igual de NaCl 2M per tal de produir un mitjà hipertònic. Afegir sabó líquid diluït 6ml i barrejar amb la vareta de vidre. 3r Amb la pipeta afegir lliscant per la paret del tub d’assaig 60ml d’alcohol. 4t

  8. LA POSADA EN MARXA DE LA CLASSE PRÀCTICA VEGEM-HO EN IMATGES

  9. VEGEM-HO EN IMATGES

  10. QUÈ HA SUCCEÏT A CADASCUN DELS PASSOS? 1 En la tasca de filtratge del sobrenadant el que estem fent és retirar les partícules sòlides: fibres conjuntives, cèl·lules musculars, vasos sanguinis, etc...

  11. QUÈ HA SUCCEÏT A CADASCUN DELS PASSOS? Amb la solució de NaCl 1M el que aconseguim és crear un medi hipertònic on farà que s’hi produeixi la ruptura dels embolcalls nuclears. 2

  12. QUÈ HA SUCCEÏT A CADASCUN DELS PASSOS? 3 Amb el sabó líquid diluït alliberem el DNA de les proteïnes ja que el detergent forma un complex amb aquestes.

  13. QUÈ HA SUCCEÏT A CADASCUN DELS PASSOS? 4 Quan per les parets afegim l’alcohol fred creem dues capes i a la interfase, l’ADN es desenrotlla i precipita distingint-se un embull de fibres blanques gelatinoses.

  14. COMPLETEM LA PRÀCTICA AMB UNA PREPARACIÓ Amb la vareta dipositem alguns d’aquests filaments sobre un portaobjectes i afegim unes gotes d’orceïna acètica i es deixa 8 minuts que es tenyeixin, rentem amb aigua destil·lada, muntem amb gota de glicerina i cubre i ho portem a observar al microscòpi.

  15. REALITZACIÓ: DEPARTAMENT DE CIÈNCIES EXPERIMENTALS Han participat en la realització de la pràctica: Professors: Ignacio Pujals Gemma Balasch Alumnes: Javier Bermudez Laia Forner Saman Iqbal

More Related