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儿童 EBV 感染及其 相关疾病的实验室诊断

儿童 EBV 感染及其 相关疾病的实验室诊断. 四川大学华西第二医院检验科. EBV 简介：. EBV 是人疱疹病毒 4 型，在淋巴细胞中潜伏。 EBV 在正常人群中感染非常普遍，约 90% 以上的成人血清 EBV 抗体阳性 EBV 主要通过唾液传播，也可经输血传染 EBV 原发感染后，大多数无临床症状， 4-6 岁以下儿童大多表现为隐性或轻型发病，多发生传染性单核细胞增多症。 一旦感染， EBV 在人体 B 细胞建立潜伏感染，受感染者将成为终生带毒者 在机体免疫功能下降和某些因素触发下，潜伏的 EBV 可以被再激活，引起病毒复制及临床疾病. EBV 相关疾病.

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儿童 EBV 感染及其 相关疾病的实验室诊断

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Presentation Transcript

  1. 儿童EBV感染及其相关疾病的实验室诊断 四川大学华西第二医院检验科

  2. EBV简介： • EBV是人疱疹病毒4型，在淋巴细胞中潜伏。 • EBV在正常人群中感染非常普遍，约90%以上的成人血清EBV抗体阳性 • EBV主要通过唾液传播，也可经输血传染 • EBV原发感染后，大多数无临床症状，4-6岁以下儿童大多表现为隐性或轻型发病，多发生传染性单核细胞增多症。 • 一旦感染，EBV在人体B细胞建立潜伏感染，受感染者将成为终生带毒者 • 在机体免疫功能下降和某些因素触发下，潜伏的EBV可以被再激活，引起病毒复制及临床疾病

  3. EBV相关疾病 • 传染性单核细胞增多症（Infectious mononucleosis,IM) • 慢性活动性EB病毒感染（Chronic active EBVinfection，CAEBV） • EB病毒相关性嗜血细胞综合征（EBV-associated hemophagocytic syndrome, EBVAHS) • Burkitts淋巴瘤 • 何奇金淋巴瘤

  4. 临床需要回答的问题 • 是否感染EBV? • EBV感染的时相？ • 是否EBV活动性感染？ • 疾病是否与EBV感染相关？

  5. EBV感染的实验室诊断方法简介 原发性EBV感染过程中首先产生针对衣壳抗原（capsid antigen,CA)的 IgM和IgG 在急性感染的晚期，抗早期抗原（early antigen,EA)抗体出现 在恢复期晚期，抗核抗原（nuclear antigen,NA)抗体产生 抗CA-IgG和抗NA-IgG可持续终生 • EBV特异性抗体检测

  6. 5%新近EBV感染不出现CA-IgM抗体 在罕见的病例中抗CA-IgM会持续存在 抗EBNA-IgG抗体可能呈现阴性，由于： - 慢性活动性EBV感染 - 细胞免疫被抑制 约20-30%的新近感染不出现EA-IgG抗体 传统检测策略的问题

  7. EBV抗体检测结果分析1 NA-IgG (+) CA-IgG(+)和EA-IgG(+)和/或CA-IgM(+)或CA-IgA强阳性 复发 只是高亲合力的CA-IgG 既往感染

  8. EBV抗体结果分析2 NA-IgG(-) • NA-IgG阴性 CA-IgG和IgM（-） 未感染EBV CA-IgG(+) CA-IgM(+)和低亲和力CA-IgG,EA-IgG可能阳性 原发感染 CA-IgM(-)和高亲和力的CA-IgG EA-IgG(+) NA-1抗体丢失的复发 EA-IgG(-) NA-1抗体丢失的既往感染

  9. EBV病毒核酸检测 • 实时荧光定量PCR是目前最主要的监测EBV载量的方法 • 鉴别EBV健康携带者的低水平复制与EBV相关疾病患者高水平活动性感染。

  10. 不同EBV相关疾病中EBV病毒载检测的标本选择

  11. 传单的EBV感染实验室诊断 • 血清学检测： • 同时满足下列2条者可以诊断为EBV-IM: • 1.下列临床症状中的3项：发热、咽峡炎、颈淋巴结肿大、肝肿大、脾肿大； • 2.原发性EBV感染的血清学证据，满足下列2条中任一项： • （1）抗EBV-CA-IgM和抗EBV-CA-IgG抗体阳性，且抗EBV-NA-IgG阴性 • （2）抗EBV-CA-IgM阴性，但抗EBV-CA-IgG阳性，且为低亲和力抗体

  12. 传单的EBV感染实验室诊断 • DNA检测: • IM患者外周血中EB病毒载体在2周内达到峰值，随后很快下降。 • 至病程14天，多数EBV-IM患者血清中已检测不到病毒核酸，病程22天后，所有EBV-IM患者血清中均检测不到病毒核酸。 • IM患者不推荐进行EB病毒载量检测

  13. 慢性活动性EBV感染的实验室诊断 • EBV抗体检测

  14. 慢性活动性EBV感染的实验室诊断 • DNA检测: • 绝大多数CAEBV患者PBMC中EBV-DNA水平高于102.5拷贝/ug DNA • 部分CAEBV患者血浆/血清中EBV-DNA阴性 • CAEBV患者血浆/血清中EBV-DNA水平与病情严重程度和预后有关

  15. EB病毒相关噬血淋巴组织细胞增生症 • EBV-HLH可以发生在原发性EBV感染时期，既往EBV感染再激活时期 • EBV-HLH患者血清中EBV抗体反应呈多种反应类型，单纯血清EBV抗体检测对EBV-HLH的诊断意义不大。

  16. EB病毒相关噬血淋巴组织细胞增生症 • DNA检测: • EBV-HLH患者外周血单个核细胞和血浆/血清均含有很高的EBV-DNA载量，结合血清学抗体检测，有助于EBV-HLH的诊断。 • 监测EBV-HLH患者血清中EBV-DNA载量有助于评估治疗效果。

  17. 小结 • 人群EBV感染普遍，EBV与许多疾病相关 • EBV血清学抗体检测有助于判断是否EBV感染，以及感染的大致时相 • EBV-DNA定量检测有助于判断是否存在活动性感染

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