1 / 27

Onkocytogenetika

Onkocytogenetika. Cytogenetická laboratoř OLG FN Brno. Historie nádorové cytogenetiky. 1914 - Boveri: chromozomová teorie vzniku nádorů nádorové buňky vznikají z původně normálních buněk, abnormální chování je zakotveno uvnitř buňky, ne v jejím okolí

montana
Download Presentation

Onkocytogenetika

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

  1. Onkocytogenetika Cytogenetická laboratoř OLG FN Brno

  2. Historie nádorové cytogenetiky 1914 - Boveri: chromozomová teorie vzniku nádorů nádorové buňky vznikají z původně normálních buněk, abnormální chování je zakotveno uvnitř buňky, ne v jejím okolí nádorové buňky mají abnormální obsah chromatinu, každý nádor je založen jednou, jedinou buňkou

  3. První cytogenetický nález • 1962 - Ph chromosom CML • 1972 - nalezena reciproká translokace t(9;22) • princip: vznik fuzního genu (bcr/abl) produkce nádorového proteinu ( chimerický protein) • t(9;22)(q34;q11) 95% CML, 2% AML, 25-30% ALL

  4. Současné hypotézy nádorové transformace • Příčina: • ztráta regulace buněčné proliferace, nesmrtelnost (inaktivace TU supresorů nebo buněčných inhibitorů, aktivace onkogenů) mutace, delece, poziční efekt • diploidní buňka - omezený počet dělení, zkracování telomer • transformovaná - neomezený růst a dělení

  5. Používané cytogenetické metody Klasická cytogenetika G-pruhy FISH typy sond CGH delece, amplifikace M-FISH SKY M-bandy

  6. Význam cytogenetických vyšetření • Součást diagnostiky • výsledky přispívají: • ke stanovení prognozy • k volbě léčebného postupu • monitorování průběhu onemocnění • sledování minimální residuální choroby

  7. Hematoonkologickáonemocnění Charakter klonální - postihují kmenové krvetvorné buňky rozdělení: leukemie (difuzní) lymfomy (ložiskovitá) etiologie multifaktoriální mutace v 1 hemopoetické buňceneoplastická proliferaceklon myeloblastické leukemie - mutace v multipotentní kmenové b. se schopností diferenciace do linie: erytroidní, granulocytární, monocytární, megakaryocytární lymfoblastické leukemie - prekurzor s diferenciací do T nebo B leukemie bifenotypické- diferenciace do obou řad akutní- týdny až měsíce chronické - měsíce až roky

  8. Klinické projevy leukemií důsledkem proliferace leukemických buněk a jejich infiltrace do tkání, narušení funkce orgánů Vysoké nároky na metabolismus infiltrace kostní dřeně anemie, neutropenie trombocytopenie projevy onemocnění: únava, infekce horních cest dýchacích nereagující na standartní antibiotickou léčbu, zvýšené teploty, krvácivé projevy kožní a slizniční, petechie, krvácení z nosu a dásní, bolesti kloubů, vysoké teploty Diagnoza AL:morfologicky, imunohistochemicky, histologicky, cytogeneticky, mol. gen.

  9. Význam cytogenetickýchvyšetření uleukémií Cytogenetické výsledky přispívají: - ke stanovení prognozy - k volbě nejvhodnějšího léčebného postupu - k hodnocení léčebné odpovědi - k monitorování průběhu onemocnění AML potvrzen vztah mezi CHA, podtypem AML a prognozou CH změny klonálního charakteru u 60 - 90% nemocných Dobrá prognoza: t(15;17)(q22;12) 99% AML M3 promyelocytární PML/RARa-podporuje účinek kys.-trans-retinové změna prognozy na nejlepší, 90% kompl. remisí t(8;21)(q22;q22) - 40% AML M2 inv(16)(p13q22) - AML M4 eo, t(16;16)(p13;q22), del(16)(q22) Špatná prognoza: tMLL(11q23) s různými CH 10-20%AML aberace: -5/5q-, -7/7q-, 3q, komplexní karyotypy

  10. Myeloblastické leukemie Poruchy vyzrávání buněk myeloidní řady více než 20% blastů v KD výrazná převaha erytroidní proliferace Blasty - nezralé buňky obsahující granula Chromozomové změny korelují s podtypem prognosticky významné cytogenetická remise

  11. Akutní myeloidní leukemie Frekvence vzniku nových onemocnění: 4/100 000/rok převaha u dospělých Charakteristika: akumulace nezralých nonlymfoblastických bb v: kostní dřeni, periferní krvi, ostatních tkáních Důvod: 1. Zvýšená proliferační aktivita, blokáda vyzrávání, narušení norm. diferenciace myeloidních buněk 2. Redukce apoptozy FAB klasifikace: AML skup. M0 - M7 podle převládající diferenciace a stupně vyzrávání

  12. Myeloproliferativní syndrom MPD CML, polycytemia vera, esenciální trombocytemie, myelofibroza patologická transformace pluripotentní buňky  diferenciace v řadu granulocytární, erytroidní, megakaryocytární konečné stadium - blastická fáze ( akutní sekundární leukemie ) CML nadprodukce granulocytů a megakaryocytů v KD vznik nových CML 1/ 100 000 / rok I. Chronická fáze - až 3 roky, II. akcelerace, III. blastická krize II. a III. zvýš. počet nezralých bb v KD a PK, progresivní anemie a trombocytopenie t(9;22) = Ph = bcr/abl sekund.: +8, i(17q), +19 méně časté: +21,-Y,-7,-17, +17 !! 5-10% bez Ph s bcr/abl, horší prognoza, odlišné klin. příznaky, +8,-7, i(17q),+17

  13. Polycytemia vera (PV) Charakteristika: zvýšená produkce červených krvinek-poruchy cirkulace, trombotické stavy cyto: 20q-, +8, +9, 1q+, 13q-, t(X;1) Esenciální trombocytémie)(ET) zvýšení trombocytů, červených krvinek, deficience Fe prognoza nezávislá na přít. CHA cyto: t(9;22), +9, -7, +8, 13q-, 20q-, přestavby 1 Idiopatická myelofibroza (IMF) zmnožení vayiva v KD na úkor krvetvorné tkáně,snížená tvorba červených+bílých krvinek 10-15% riziko AML cyto:-7, +8, +9, aberace 1q, 5q, 13q, 20q

  14. Myelodysplastický syndrom (MDS) Dysfunkce KD, heterogenní skupina-dysplastická hematopoeza ve 2 a více buněčných liniích, kompletní ztráta kontroly proliferace a diferenciace hemopoetické buňky klinický obraz: periferní pancytopenie 20-40% přechod do AML 1/3 pacientů umírá na dysfunkci kostní dřeně bez vývoje AML 1/3 " “ na jiné příčiny hematologické nálezy: anemie, leukopenie, granulocytopenie, trombocytopenie I. Refrakterní anemie RA s prstenčitými sideroblasty s excesem blastů RAEB v transformaci RAEBt II. chronická myelomonocytární leukemie CMML

  15. MDS - chromozomální změny Strukturní: 5q31 tumorový supresor del 5q ( terminální, intersticiální) prognoza ! del 7q, del 20q Numerické: -5, -7, +8, +9, +19, +21, -X, -Y CMML počet blastů 5 - 20% cyto: -7, +8, -Y Sekundární MDS důsledek terapie jinách maligních onemocnění cyto: -7, del 5q, -5, del 7q, +8, -12, t(1;7), der(3p), der(6p), der(12p),der(17p), der(21q)

  16. Lymfoidní malignity Chromozomové změny - prognostický faktor u ALL korelují s podtypem definovaným morfologicky a imunologicky detekce u 70 - 95 % případů ALL 70% dětských ALL dosahuje kompletní remise

  17. Akutní lymfoblastická leukemie - ALL Akumulece maligních nezralých lymfoidních buněk v KD, často i v periferní krvi výskyt: nová onemocnění 3/100 000/rok častěji děti 3-5let, dospělí pod 30 let FAB klasifikace ( cytomorfologicky) L1 - L3 cyto: numerické zmeny:hyperdiploidie 51-60 dobrá prognoza 47-50 střední trisomie 18, 21, X, 4, 6, 10, 14, 17, 20 hypodiploidie špatná progn., 8%dospělých 5%dětí monosomie 20

  18. Strukturní změny u T-ALL t(9;22) velmi špatná progn., 17-30% dosp., 2-6%dětí přestavby v oblasti minor t(1;19)(q23;p13) ; fuzní gen E2A/PBX1, příznivá progn. dlouhodobá kompl. remise po intenzivní chemoterapii t(4;11) MLL/AF4 velmi nepříznivá progn., 50% kojenců 2% dosp., 5%dětí všechny přestavby 11q23 (MLL) velmi špatná progn. t(12;21) TEL/AML1 30% dětí, dospělí vzácně, rychlá remise, dobrá progn. detekce FISH B-ALL: 25-30% norm. karyotyp, změny postihují 1 z T-buněč. receptorů TCR , ( 14q11), TCR(7p15), TCR (7q35) detekce mol. gen., t(8;14) u T i B-ALL stejná cyto: del 6q, 9p, 12p

  19. Chronická lymfatická leukemie CLL % změn variabilní, závislost na použité technice +12 (15%) samostatná změna, jen B-lymfocyty, pokročilé st. nepříznivá progn. del(13)(q14) gen RB1 tumor-supresor, dobrá progn. (samost.) del p53 tumor-supresor, špatná progn., kratší přežití, B-CLL nezávislý faktor B-CLL: nízká proliferační aktivita používané metody FISH a CGH

  20. Solidní nádory dětského věku Spolupráce s Odd. dětské onkologie FN Brno vyšetřovaný materiál: kostní dřeň otisky tumorů parafinové bločky kultivovaná tkáň TU

  21. Nejčastější typy nádorů Materiál z ODO FN Brno Neuroblastom rhabdomyosarkom (RMS) lymfomy ( HL, NHL) Ewing. sarkom

  22. Neuroblastom Nálezy: Nmyc amplifikace 2p24 (10% TU) del(1)(p36) zmnožení 17q (gain 17) dobrá prognoza polyploidie: 3n, 5n, 6n aneuploidie: zmnožení 6, 7, 17 nebo ztráta 11,14, X - špatná prognoza 2n, 4n, del 1p36, del 11q, dup 17q21-qter

  23. Rhabdomyosarkom RMS RMS 5-8% dětských malignit: embryonální E-RMS x alveolární A-RMS A-RMS t(2;13)(q35;q14) t(1;13)(p36;q14) E-RMS: hyperdiploidie (2, 7, 8, 12, 13, 17, 18, 19) hypodiploidie - monosomie: 10, 14, 15, 16

  24. Ewingův sarkom t(11;22)(q24;q12) FLI 1/EWSR 1 90%, ESWR1 22q12 - maligní melanom t(12;22) t(21;22)(q21;q12) ERG /EWSR 1 t(7;22)(p22;q12) ETV1/EWSR 1 t(17;22)(q12;q12) E1AF/EWSR 1

  25. Maligní lymfomy NHL x HL, heterogenní skupina NHL - chromos. změny až 90%, nevznikají fuzní geny, mění se exprese protoonkogenů del13q14 RB1 tumor-supresor t(11;14) Mantle cell lymfom 11q13 gen BCL-1 t(8;14), t(8;22), t(2;8) Burkit.ly. 8q24 c-myc přestavba 18q21(BCL-2) nejčastější t(14;18) folikulární ly. 3q27(BCL-6) t(3;14), t(3;22), t(3;4), t(3;6) anaplastický velkobuněčný u dětí t(2;5) 30-50%

  26. Hodgkinův lymfom Nízká úspěšnost kultivace, nízká frekvence mitoz cyto: nálezy cytogenetických změn variabilní 20 - 80% hyperdiploidie strukturní změny: • 1p, 1q, 2q, 6q, 11p, 11q, 14q • změny komplexní, prognoza nepříznivá

  27. Závěr • Typické geny - mol. gen. metody • onkogeny, tu supresorové geny • typické chromoz. aberace - cytogenetika • fuzní geny(chimerické proteiny), poziční efekt-aktivace protoonkogenů • sekundární změny - cytogenetika

More Related