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Spettrometria di massa. Tecnica molto sensibile che consente di calcolare la massa esatta di una molecola con precisione molto elevata. Il P.M. è così preciso che è la carta d’identità della molecola IDENTIFICAZIONE DELLA SOSTANZA. 3 FASI. Camera di ionizzazione o sorgente

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spettrometria di massa

Spettrometria di massa

Tecnica molto sensibile che consente di calcolare la massa esatta di una molecola con precisione molto elevata.

Il P.M. è così preciso che è la carta d’identità della molecola

IDENTIFICAZIONE DELLA SOSTANZA

3 fasi
3 FASI
  • Camera di ionizzazione o sorgente
  • Analizzatore di massa (campo elettrico o campo magnetico)
  • Rivelatore
  • PRINCIPI TEORICI: vi è la formazione di una forma ionizzata della molecola (ione molecolare) e di frammenti di essa ionizzati. Gli ioni carichi vengono separati tra loro in base ai rapporti m/z e la loro massa è calcolata dall’analizzatore e dal rilevatore.
fase di ionizzazione
Fase di ionizzazione
  • EI, electron impact ionization (impatto elettronico)
  • ESI, electron spray ionization (evaporazione ionica)
  • MALDI, matrix assisted laser desorption ionization (ionizzazione per desorbimento laser assistita da matrice)
maldi
MALDI
  • La tecnica consiste nell'assorbire il campione su di una matrice, e una volta portata in soluzione viene successivamente bombardata con un fascio laser (spesso un laser ad azoto). La matrice deve possedere determinate caratteristiche chimico-fisiche, tra le quali: deve essere facilmente evaporabile ma tale evaporazione non deve essere significativa durante la preparazione del campione o prima dell'effettuazione delle misurazioni, deve avere un certo carattere acido in modo da fungere da fonte di protoni incoraggiando la ionizzazione dell'analita, possedere un forte assorbimento ottico nella regione UV tale che le permetta di assorbire la radiazione laser in modo efficiente.
  • Grazie al fenomeno del desorbimento, il campione viene rilasciato in forma "clusterizzata", ovvero complessato con la matrice. La matrice smorza gli effetti del fascio laser assicurando un'adeguata protezione all'analita che viene ionizzato e vaporizzato tramite l'energia in eccesso ceduta secondariamente dalla matrice stessa. Vengono così ottenuti ioni molecolari generalmente a singola carica, come quelli creati dall'acquisizione o dalla perdita di un protone. Molto spesso la tecnica MALDI viene abbinata a spettrometri dotati di analizzatore a tempo di volo (Time of flight, TOF).
analizzatore a settore magnetico
Analizzatore a settore magnetico

Piastra collettrice con fenditura

(serve a raccogliere gli ioni)

analizzatore tof time of flight
Analizzatore TOF (time of flight)
  • È associato alla ionizzazione MALDI
  • Con un laser a impulsi si può produrre un flusso di ioni desorbiti non tutti insieme, bensì a scatti, in gruppi
  • L’analizzatore TOF effettua analisi sequenziale di tali pacchetti di ioni e misura I tempi che occorrono a questi ioni di massa diversa per percorrere una data distanza nello spazio in linea retta, ossia il cosiddetto tempo di volo.
  • Lo spazio di volo è un tubo sottovuoto lungo 10-200 cm