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Exemple de démarche d’une recherche expérimentale

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Exemple de démarche d’une recherche expérimentale. Jean Mantz Service d’Anesthésie Réanimation SMUR, INSERM U676 Hôpital Beaujon. Impact Factors 2001 : Pain: 4,54 Anesthesiology: 3,38 Anaesthesia: 2,37 Anesth Analg: 2,27 Br J Anaesth: 2, 20 .

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Presentation Transcript
exemple de d marche d une recherche exp rimentale

Exemple de démarche d’une recherche expérimentale

Jean Mantz

Service d’Anesthésie Réanimation SMUR, INSERM U676

Hôpital Beaujon

slide3

Impact Factors

2001:

Pain: 4,54

Anesthesiology: 3,38

Anaesthesia: 2,37

Anesth Analg: 2,27

Br J Anaesth: 2, 20

slide4

Pathophysiology of neuronal death: excitotoxicity

VOCC

Ca++

Ca/calmodulin kinase

PKC

NO synthase

PLA2

Calpains

Free radicals

Lipid peroxydation

DNA damage

Proteolysis

Cell death:

AMPA-R

Na+

NMDA-R

Ca++

cAMP

cGMP

GLUm-R

Ca++

stores

PLC

hypoth se de d part
Hypothèse de départ
  • Le glutamate joue un rôle fondamental dans la mort neuronale ischémique
  • Les anesthésiques volatils ont un effet neuroprotecteur in vitro et in vivo.
  • Cet effet pourrait être transitoire et ne concerner que la mort neuronale par nécrose (non apoptotique).
question
Question
  • Les anesthésiques préviennent-ils ou retardent-ils simplement la mort neuronale ischémique ?
but de l tude
But de l’étude
  • Etudier les effets des anesthésiques (isoflurane) sur la mort neuronale retardée après lésion ischémique neuronale.
  • Tester l’hypothèse d’une action sur la transmission glutamatergique (réduction)
choix du mod le exp rimental
Choix du modèle expérimental
  • Destiné à répondre à la question posée (et non l’inverse!...)
  • In vivo vs in vitro
  • La culture de tranche organotypique d’hippocampe.
    • Modèle in vitro
    • Préserve les connexions physiologiques interneuronales
    • Contient du glutamate
    • Permet de tester des effets à long terme (plusieurs jours ou semaines)
m thodes
Méthodes

Durée de l’ischémie: 45 min

Effets d’un Placebo (saline) vs MK 801 (10 µM) vs Isoflurane (1%, 30 min) sur la mort neuronale induite par l’ischémie ou une charge de glutamate

slide12

Sullivan BL et al.

Anesthesiology 2002; 96: 189-95

quelques commentaires
Les objectifs sont atteints

Le choix du modèle

La rigueur méthodologique

La netteté des effets

Les concentrations faibles d’isoflurane

La concision de la discussion

Absence de dose-réponse

Absence de calcul de puissance

Absence d’exploration de la mort apoptotique

Limites du modèle:

- pertinence clinique

- durée d’observation

Quelques commentaires

Points faibles

Points forts

lecture critique d un article scientifique les points essentiels
Lecture critique d’un article scientifique: les points essentiels
  • La question est-elle clairement posée?
  • La méthode est-elle adaptée aux objectifs ?
  • La population étudiée est-elle clairement identifiée ?
  • La population témoin est-elle clairement identifiée ?
  • La taille des échantillons est-elle adaptée ?
  • Les variables analysées sont-elles clairement identifiées ?
  • Le choix des variables est-il adapté aux objectifs ?
  • La durée de suivi est-elle suffisante ?
  • Les méthodes statistiques sont-elles appropriées ?
  • Les résultats sont-ils présentés de façon claire, détaillée et objective ?
  • Les conclusions sont-elles valides ?
  • L’impact de l’article est-il réel ?