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Serie Blanca: Morfolo gía y Citoquímica

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Serie Blanca: Morfolo gía y Citoquímica . Kevin Goad Katherine Miranda Moisés Serrano. Morfología de la Serie Blanca. Moisés Serrano. Morfología de células halladas en frotis de sangre periférica de un individuo normal. Célula madre. Monoblasto. Linfoblasto. Mieloblasto. Promielocito.

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Presentation Transcript
serie blanca morfolo g a y citoqu mica

Serie Blanca: Morfología y Citoquímica

Kevin Goad

Katherine Miranda

Moisés Serrano

slide4

Morfología de células halladas en frotis de sangre periférica de un individuo normal.

slide5

Célula madre

Monoblasto

Linfoblasto

Mieloblasto

Promielocito

Promonocito

Prolinfocito

Mielocito

Metamielocito

Célula en banda

Monocito

Linfocito

Célula segmentada

slide6

Estadios de Maduración en la Granulopoyesis

MIELOBLASTO

PROMIELOCITO

MIELOCITO

METAMIELOCITO

BANDA

SEGMENTADO

slide10

Mielocito

Mieloblasto

Promielocito

Mielocito

Metamielocito

Célula en banda

Célula segmentada

slide17

Metamielocito

Mieloblasto

Promielocito

Mielocito

Metamielocito

Célula en banda

Célula segmentada

slide23

Célula en Banda

Mieloblasto

Promielocito

Mielocito

Metamielocito

Célula en banda

Célula segmentada

slide29

Célula segmentada

Mieloblasto

Promielocito

Mielocito

Metamielocito

Célula en banda

Célula segmentada

monoblasto
Monoblasto
  • Tamaño celular:Diametro de 15 – 20 um
  • Núcleo:-Irregular. -Presenta muesca o circunvalacion-Cromatina fina y nucleolos
  • Citoplasma:-Basófilo-Puede presentar vacuolas.
promonocito
Promonocito
  • Núcleo:-Cromatina mas condensada
  • Citoplasma:-Basófilo
monocito
Monocito
  • Tamaño celular:Diametro de 15 – 20 um
  • Núcleo:-Grande e irregular. -Presenta muesca o circunvalacion-Cromatina finamente reticulada que se tiñe con suave intensidad.
  • Citoplasma: -Abundante-Ligeramente basófilo con o sin vacuolas-Granulaciones azurofilas finas.
linfoblasto
Linfoblasto
  • Tamaño celular:Diametro de 15 – 20 um
  • Núcleo:-Grande y redondo. -Cromatina fina-Frecuente observar nucleolos
  • Citoplasma:-Basófilo-Sin granulaciones.
prolinfocito
Prolinfocito
  • Tamaño celular: diámetro de 15 um.
  • Núcleo: -Cromatina mas finamente dispersa que la del linfocito-nucleolos
  • Citoplasma:-Basófilo-Sin granulaciones.
linfocito
Linfocito
  • Tamaño celular: 5 – 12 um los de escaso citoplasma. 15 – 20 um los de abundante citoplasma.Núcleo:-Redondo u oval-Cromatina densaCitoplasma:-Ligeramente basofilo-Escaso o abundante -Pueden presentarse escasa granulacion de color rojo purpura o azurofilas, denominadas perforinas.
citoqu mica
Citoquímica
  • La citoquímica estudia la composición química de la célula y permite detectar la localización topográfica de algunos principios inmediatos, enzimas, metales pesados y otras sustancias. Se considera como un nexo de unión entre la morfología y la bioquímica.
  • Los componentes celulares que son posibles revelar con el estudio citoquímico son:
  • Enzimas (oxidantes e hidrolíticas)
  • Glucógeno
  • Lípidos
peroxidasa
Peroxidasa
  • La demostración citoquímica de esta enzima se basa en la acción oxidante de la peroxidasa sobre el substrato, bencidina, en presencia de peróxido de hidrógeno, apareciendo un precipitado amarillo ocre en el lugar del citoplasma en donde se ha producido la reacción.
  • La mieloperoxidasa se sintetiza en el retículo endoplasmático rugoso, de donde pasa a las cisternas del aparato de Golgi quedando localizada fundamentalmente en la granulación 1ª o azurófila. Se localiza sobre todo, en los gránulos primarios de los neutrófilos y precursores, así como en los gránulos de los eosinófilos y monocitos.
negro b de sud n
NEGRO B DE SUDÁN
  • Es una coloración no enzimática útil en patología mieloide. Tiñe los fosfolípidos y otros lípidos, colorea los gránulos azurófilos y específicos de los granulocitos y tiene la ventaja de que con el tiempo no disminuye la actividad. Los neutrófilos segmentados y sus precursores muestran unos gránulos gruesos en el citoplasma de color gris muy oscuro.
fosfatasas alcalina
Fosfatasas Alcalina
  • La fosfatasa alcalina hidroliza monoésteres del ácido fosfórico, actuando a un pH de 9,1 a 9,6. La demostración citoquímica se basa en la hidrólisis de ciertos substratos, de los cuales se liberan unos productos intermedios que combinados con una sal diazoica dan un precipitado coloreado en el citoplasma celular.
  • Se encuentra actividad FA en algunas células maduras y semimaduras de la granulopoyesis neutrófila (bandas y segmentados).
  • Su Utilidad primordial es distinguir síndromes mieloproliferativos ( FAG disminuido) Versus las reacciones neutrofilas secundarias a procesos infeccioso(FAG aumentado) .
fosfatasa alcalina
Fosfatasa Alcalina
  • No todos los granulocitos presentan el mismo grado de positividad; en función de este dato se establece un índice de actividad de FA. Se pueden distinguir 5 tipos de reacción:
fosfatasa alcalina1
Fosfatasa Alcalina
  • Se realiza un recuento sobre 100 granulocitos asignando a su valor según grado .Se suman los valores y el número obtenido es el índice de FAG, que tiene un valor mínimo de 0 y máximo de 400. El índice normal oscila entre 20 y 100.
fosfatasa cida
Fosfatasa Ácida
  • Es una enzima hidrolítica perteneciente al grupo de las fosfomonoesterasas, que actúa sobre los ésteres del ácido fosfórico; su pH óptimo de actuación oscila entre 4,7 y 5,5. Se trata de una enzima de ubicación lisosómica.
  • La demostración citoquímica se basa en la hidrólisis del substrato naftol-AS-Bi-fosfato, liberándose unos productos intermedios que al combinarse con una sal diazoica dan un precipitado de color rojo anaranjado en el citoplasma.
fosfatasa cida1
Fosfatasa Ácida
  • La tricoleucemia (o leucemia de células peludas es un síndrome linfoproliferativo crónico de células B) es un proceso linfoproliferativo en que el estudio de la FA ofrece un particular interés por cuanto la actividad enzimática a pesar de ser una célula linfoide es difusa, intensa y tartrato resistente. Se utiliza para demostrar la isoenzima 5 en el tricoleucocito.
  • De todas formas, con el advenimiento de los anticuerpos monoclonales, la técnica citoquímica en el estudio de los síndromes linfoproliferativos crónicos ha perdido predicamento.
esterasas
Esterasas
  • Esterasas Específicas
  • Esterasas No específicas
esterasas espec ficas
Esterasas Específicas
  • Se realiza mediante la tinción de Naftol AS-D Cloroactetato esterasa (NASD) , el reactivo actúa sobre esterasas cloradas y que precipitan como gránulos gruesos.
  • Prueba + linea celular Mielocitica.
  • Los cuerpos de auer son positivos por que la tinción es similar en sensibilidad a la Negro B Sudán.
esterasa inespec fica
Esterasa Inespecífica
  • La mayoria de las tinciones no específicas se observan en la línea Monocitica.
  • Esta tinción utiliza el Naftil Butirato que precipita las esterasas en forma de gránulos coloreados , observandose mayor presencia en MONOCITOS.
pas reacci n del cido peryodico de schiff
PAS- Reacción del ácido peryodico de Schiff.

La reacción de PAS se basa en la rotura de los enlaces -C-C- presentes en los carbohidratos(glucogeno) por la acción del ácido peryódico, potente agente oxidante, liberándose grupos aldehído que al combinarse con el reactivo de Schiff dan un compuesto de color rojo púrpura intenso. Identifica al glucógeno en el citoplasma celular.

tinciones citoqu micas
Tinciones Citoquímicas

Peroxidasa / Negro Sudán

+

-

Leucemia Mielocitica Aguda

Leucemia Monocitica Aguda

Leucemia Linfocitica

Esterasas

PAS +

Específica

No Inespecífica

Marcadores celulares

+

+

Linfocitos B

Leucemia Monocitica aguda

Leucemia Mielocítica aguda

+

CélulasNK

Linfocitos T

Leucemia Mielomonocitica aguda

valoraci n del sistema inmune

Valoración del Sistema Inmune

Por: Katherine Miranda

slide75

INMUNIDAD

HUMORAL

CELULAR

PMN

M

CPA

LB

TH

TD

TS

TC

slide76

1ª línea de defensa.

> Acción sobre bacterias piógenas

Función fagocítica, pinocítica y bactericida.

NEUTRÓFILOS

Gránulos azurófilos o primarios:

mieloperoxidasa, proteasas neutras, betaglucoronidasa, hidrolasas ácidas, fosfatasa ácida, catepsinas, defensinas

Gránulos secundarios,

más pequeños:

lisozima, fosfatasas alcalina, lactoferrina, colagenasa

slide78

2ª línea de defensa

  • Principales productores de citocinas del S.I. Innato (IL-1, IL-6, IL-8, IL-12, TNF-α)
  • Funciones:
  • Fagocitosis
  • CPA
  • Moderan la R.I.
  • Hemostasia
  • Intervención en metabolismo de hierro

Macrófagos

el sistema inmunitario sólo reconoce lo "ajeno" si es presentado por lo "propio".

slide79

Distribución de los

macrófagos

Macrófagos de los Ganglios linfáticos

Macrófagos de la microglia

Macrófagos alveolares

Células de Kupffer (hepáticas)

Macrófagos esplénicos (sinusoidales)

Macrófagos mesangiales

Osteoclastos

Macrófagos peritoneales

Células A (sinoviales)

slide82

Los linfocitos T colaboradores reconoce el antígeno y se liga al macrófago  estimula la producción de sustancias químicas (IL-1, TNF/ IL-2, INF-ץ)

eosin filos
Eosinófilos
  • La mayoría son atraídos por quimiotaxis.
  • Regulan la respuesta alérgica y las reacciones de hipersensibilidad mediante la neutralización de la histamina por la histaminasa.
  • Receptores para IgE.
  • Acción en alergia y en la defensa contra parásitos.
eosin filos1
Eosinófilos
  • Juegan un papel de defensa del huésped frente a microorganismos no fagocitables, poseen:
    • función citotóxica (por sus proteínas granulares).
    • inmunorreguladora (por las citocinas que libera).
    • son capaces de participar en la reparación y remodelación tisular (liberando TGF-β).
preguntas
Preguntas ????

¡Gracias!

referencias
Referencias
  • Libro Cuestiones en Hematología edición 2002, editorial Elsevier, España, ISBN: 8481746088
  • Manual Amir Hematología – edición 2009
  • Manual CTO Hematología séptima edición, autor grupo CTO.
  • Manual de Laboratorio de Hematología de la facultad de medicina de la Universidad de Panamá. Autor: Dr. Altafulla 2003.

Imágenes cortesía de www.telmeds.org