Download
1 / 31
320 likes | 655 Views
Elektronmikroskopija. Caurstarojošā un skanējošā elektronu mikroskopa uzbūve un sagatavošana darbam. Elektronu mikroskopa palielinājuma un izšķirtspējas regulācija. Caurstarojošā elektronu mikroskopa Philips 301 uzbūve. Augstsprieguma kabelis. Vakuuma kolonna.
E N D
Caurstarojošā un skanējošā elektronu mikroskopa uzbūve un sagatavošana darbam.Elektronu mikroskopa palielinājuma un izšķirtspējas regulācija. Caurstarojošā elektronu mikroskopa Philips 301 uzbūve. Augstsprieguma kabelis. Vakuuma kolonna. Objekta novietojuma līmenis kolonnas iekšienē. Luminiscents ekrāns.
Filaments atdala elektronus. Tie veido kūli, kas pārvietojas uz leju cauri paraugam. Elektronu kūli regulē ar gredzenveida magnētiem. Objekts tiek krāsots ar smagajiem metāliem. Tās šūnas daļas, kas pievienos metālu uz luminiscējošā ekrāna būs tumšas, jo metāli nolieks vai absorbēs elektronus. Pārējās daļas ir gaišas.
Kolonnas elementiem ir atšķirīgas funkcijas atkarībā no palielinājuma.
Izvēlas attēla eksponēšanas laiku. Preparāta pārskatīšanai nepieciešams izvēlēties īsu ekspozīcijas laiku, bet fotografēšanai - garu.
Izvēlas fotografēšanas režīmu. Tas nosaka saglabātā attēla punktu skaitu.
Fotogrāfijas tiek iegūtas izmantojot funkciju “Snapshot”. • Fotogrāfiju saglabāšanai nepieciešams norādīt fotografēšanas laikā izmantoto palielinājumu.
Kopā ar attēlu tiek sagabāta informācija par fotografēšanas apstākļiem. • Tas ļauj izmantot šo informāciju attēlu analīzē un citu eksperimentu veidošanā.
6. Skenējošā elektronu mikroskopa uzbūve un sagatavošana darbam. • Ieslēdz dzesēšanu. • Ieslēdz mikroskopu. • Ieslēdz datoru. • Izslēdz datoru. • Izslēdz mikroskopu. • Izslēdz dzesēšanu. Hitachi S-4800 uzbūve.
Elektronu un parauga mijiedarbība. Elektronu stars Rentgenstari Primārie atstarotie elektroni Katodluminiscence Sekundārie elektroni Augeja elektroni Paraugs Parauga strāva
Paraugi ir: • novietoti uz palikņa ar augstu elektrovadītspēju, • dehidratēti, • paliknis ir pielīmēts pie paraugu turētāja. Darbu veic cimdos, lai nodrošinātu parauga tīrību! Parauga augstums nedrīkst pārsniegt 0,5 mm!
7. Elektronu mikroskopa palielinājuma un izšķirtspējas regulācija.
8. Elektronmikroskopiskie attēli un to aberācijas. 3.0 kV 20.0 kVSprieguma ietekme uz attēla kvalitāti.Palielinot spriegumu palielinās attēla spilgtums.
Palielinoties signāla stiprumam, samazinās attēla izšķirtspēja. • Skenējamā reģiona lieluma nozīme.
Astigmatisms var pasliktināt vienas dimensijas izšķirtspēju.
Sausā piena granulas. • Granulu izmērs raksturo parauga kvalitāti. • Istabas temperatūrā žāvēti paraugi pielīmēti pie parauga turētāja un ievietoti mikroskopā.
Putekšņi. • Forma un lielums parāda piederību sugai. Bojājumi raksturo putekšņu kvalitāti. • Istabas temperatūrā žāvēti paraugi pielīmēti pie parauga turētāja un ievietoti mikroskopā.
Fluorescences mikroskopija un skenējošā elektronmikroskopija. hloroplastu raksturošanai. A - hloroplasts fluorescences mikroskopā, B – tas pats hloroplasts skenējošā elektronmikroskopā. Pierāda, ka SEM redzamais veidojums ir hloroplasts, jo redzama hlorofila fluorescence. Parāda, ka tumšie plankumi bez hlorofila fluorescences rodas no hloroplasta iedobumiem. No saberztā lapām iegūta hloroplastu suspensija. Paraugi fiksēti, uzpilināti uz parauga turētāja un žāvēti istabas temperatūrā.
Hloroplasti lapas parenhīmas šūnās. Lapas šķērsgriezums. Raksturo auga genotipu, šūnu vecumu un audzēšanas apstākļus. • Paraugs fiksēts ar glutaraldehīdu un postfiksēts ar OsO4 nātrija kakodilāta buferšķīdumā. Griezumi iegūti uz saldējamā galdiņa. Griezumi macerēti 0,1 % OsO4 šķīdumā 72 stundas. Audi atūdeņoti pieaugošas koncentrācijas metanola un acetona šķīdumos. Ultraplānie griezumi pielīmēti pie parauga turētāja.
Literatūra • http://en.wikipedia.org/wiki/Transmission_electron_microscopy • http://en.wikipedia.org/wiki/Scanning_electron_microscopy
11. Seminārs “Elektronu mikroskopija”. Seminārā paredzēts prezentēt iegūtos un rediģētos attēlus, kas iegūti ar caurstarojošās un skanējošās elektronu mikroskopijas palīdzību.
