ПРОЕКТ для комиссии при Президенте РФ по инновационной экономике

1. ПРОЕКТ для комиссии при Президенте РФ по инновационной экономике «СОЗДАНИЕ ГЕННО-ТЕРАПЕВТИЧЕСКИХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ЗАБОЛЕВАНИЙ, ОБУСЛОВЛЕННЫХ НЕДОСТАТОЧНЫМ КРОВОСНАБЖЕНИЕМ ТКАНЕЙ И ОРГАНОВ». Головной исполнитель: Факультет Фундаментальной Медицины Московского государственного Университета им. М.В. Ломоносова. Соисполнители: ГУ НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф. Гамалеи , ООО «МОНА», ООО «Генная и клеточная терапия» Цель: Получение лекарственных препаратов, состоящих из рекомбинантных плазмид и векторных псевдовирусных конструкций, несущих в своем составе гены ангиогенных факторов роста, для терапии ишемических заболеваний; проведение предклинических и клинических испытаний и организация опытно-промышленного производства этих препаратов. Цель: Получение лекарственных препаратов, состоящих из рекомбинантных плазмид и векторных псевдовирусных конструкций, несущих в своем составе гены ангиогенных факторов роста, для терапии ишемических заболеваний; проведение предклинических и клинических испытаний и организация опытно-промышленного производства этих препаратов. Получаемые продукты: Группа новых лекарственных препаратов для генной терапии сердечно-сосудистых заболеваний, технология их производства и применения в клинике. Препараты представляют собой генетические конструкции в виде рекомбинантных плазмид («голой ДНК») и псевдовирусных векторных частиц, несущих гены факторов роста, стимулирующих образование новых сосудов в тканях с недостаточным кровоснабжением

2. Механизм действия:При введении в ткань или орган получаемые препараты проникают в клетки и индуцируют в них продукцию факторов роста, которые секретируются (выделяются) клеткой в окружающую среду и стимулируют роста сосудов. Инновационный потенциал:Будет получена группа генно-терапевтических препаратов с шестью различными генами факторов роста, которые действуют на различные этапы образования новых сосудов и обладают взаимодополняющим влиянием на этот процесс, что значительно увеличивает эффективность лечения. Задел по проекту:Получены прототипы лекарственных препаратов на основе рекомбинантных плазмид, несущих гены факторов роста (VEGF, HGF, uPA, Ang-1, PDGF-BB), проведены предклинические испытания этих препаратов, показавшие их эффективность на моделях у экспериментальных животных, разработан лабораторный регламент получения этих препаратов в препаративных количествах, начаты клинические испытания одного из препаратов, получены дефектные по репликации (невирулентные) псевдовирусные частицы для эффективного переноса генов в ткани. Сфера применения:Лечение социально-значимых заболеваний, прежде всего сердечно-сосудистых (ишемической болезни сердца, ишемии нижних конечностей, ишемии мозга, сосудистых осложнений диабета (диабетической стопы), а также нейродегенеративных заболеваний, ожогов, ускорение ранозаживления при травмах, лечение облысения и возрастных изменений кожи.

3. ГЕННАЯ ТЕРАПИЯ– лечение болезней путем введения ДНК или РНК специфических генов в клетки организма Введение генав ткань или орган ДНК мРНК белок Доставка гена в клетку с помощью вектора Экспрессия генаи продукция белка – фактора роста. Секреция продукта гена Стимуляция роста сосудов

4. Схема генной терапии ишемии нижних конечностей Ген фактора роста Продукция фактора роста Рост сосудов

5. Предклиническая оценка эффективности генной терапии на моделях у животных % 80 HGF+VEGF 70 60 VEGF HGF 50 40 Относительная перфузия 30 Контроль 20 10 0 0 7 14 21 Восстановление кровотока в конечности (Лазерное допплеровское сканирование) Дни после операции Улучшение перфузии конечности Красный цвет – нормальная перфузия Контроль ген VEGF

6. Структурная организация аденовирусной частицы Ген чужеродного антигена Фибер - Содержит делетированный геном, неспособен к размножению in vitro и in vivo. - Представляет собой физическую самособирающуюся частицу. - Обеспечивает доставку и экспрессию чужеродного генетического материала в клетке. 70 -90 нм ДНК Гексон Для решения этих проблем в НИИЭМ им.Н.Ф.Гамалеи РАМН разработан ряд технологий. Сегодня остановимся на одной, которая дала к настоящему времени наиболее значимые результаты, позволяющие в ряде случаев приступить к клиническим испытаниям. Для этого генно-инженерными методами на основе аденовирусов были сконструированы частицы способные доставлять нужные гены (определяющие синтез полезных белков) в строго определенные клетки и ткани организма человека.

7. Выявление участка белка оболочки нановирусной частицы позволяющий проведение различных модификаций белок оболочки нановирусной частицы Суперкомпьютер участок молекулы белка оболочки нановирусной частицы, в котором возможно проведение модификаций Сотрудниками нашего института были проведены биоинформационные исследования для выявления участка оболочки вирусной частицы, позволяющего проводить модификации без нарушения общей структуры частицы. В результате математически рассчитанной модификации была изменена специфичность проникновения. Если исходный вирус проникал в эпителиальные клетки, то созданный нами - в клетки мышцы (миоциты). Другая модификация вируса приводила К тому, что вирус становился практически не видимым для предсуществующего иммунитета.

8. Терапевтические препараты, которые будутсозданные на основе аденовирусной наноструктуры для лечения ишемических заболеваний ген фактора роста эндотелия ген Ангиопоэтина-1 ген Фактора роста гепатоцитов 1 3 2

9. Этапы реализации проекта 2009 2010 2011 2012 2013 Организация лабораторного комплекса для разработки и наработки суб- станций генно-терапевтических препаратов 85 Госзакупки, госпрограммы. Помощь с выходом на рынки СНГ и др. стран Завершение предклинических исследований; токсикологические исследования 30 130 Проведение клинических испытаний Отработка технологий производства Организация опытно-промышленного производства и контрольных лабораторий 320 35