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大豆抗原蛋白与仔猪过敏性腹泻

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大豆抗原蛋白与仔猪过敏性腹泻 - PowerPoint PPT Presentation


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大豆抗原蛋白与仔猪过敏性腹泻. 游金明 博 士 江西农业大学动物科技学院 上海源耀生物科技有限公司 2012 年 5 月 16 日 中国 · 南京. 1. 2. 3. 4. 仔猪腹泻与产生原因. 日粮致敏性腹泻与大豆抗原蛋白. 大豆抗原蛋白的消除. 大豆抗原蛋白的分析检测. 内容提要. 仔猪腹泻发生的原因. 传染性病因 1.1 病毒性腹泻 传染性胃肠炎、 轮状病毒感染 1.2 细菌性腹泻 仔猪黄痢、 仔猪白痢、仔猪副伤寒、仔猪红痢. 8. 2. 免疫系统因素. 被动免疫(母乳). 6. 免疫力. 主动免疫. 4.

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Presentation Transcript
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大豆抗原蛋白与仔猪过敏性腹泻

游金明 博 士

江西农业大学动物科技学院

上海源耀生物科技有限公司

2012年5月16日

中国·南京

slide2

1.

2.

3.

4.

仔猪腹泻与产生原因

日粮致敏性腹泻与大豆抗原蛋白

大豆抗原蛋白的消除

大豆抗原蛋白的分析检测

内容提要
slide3
仔猪腹泻发生的原因
  • 传染性病因

1.1 病毒性腹泻

传染性胃肠炎、轮状病毒感染

1.2 细菌性腹泻

仔猪黄痢、仔猪白痢、仔猪副伤寒、仔猪红痢

slide4

8

2. 免疫系统因素

被动免疫(母乳)

6

免疫力

主动免疫

4

2

周龄

6

7

1

2

3

4

5

slide5
3. 应激因素

3.1 温度骤变

  • 皮下脂肪薄,被毛稀少:保温能力差;糖原水平低,产热能力不足,因此仔猪对冷相当敏感
slide6

3.2 断奶应激

8

被动免疫(母乳)

6

免疫力

主动免疫

断奶

4

2

周龄

6

7

1

2

3

4

5

slide7

饲料(营养)因素

4.1 营养消化不良

胃酸分泌不足,消化酶活性不高 母乳→ 饲料

slide8

饲料(营养)因素

4.2 日粮抗原过敏

日粮抗原蛋白过敏

——导致仔猪腹泻的一个重要因素

slide9

仔猪日粮抗原蛋白的来源

大 豆

大豆制品

植物性饲料

slide10

大豆抗营养因子

蛋白酶抑制因子

脲  酶

凝 集 素

植  酸

寡  糖

单 宁

抗 原 蛋 白

抗维生素因子

其 他

 (热 敏 性)

( 热 稳 定 性 )

大豆中含多种抗营养因子

slide11

大豆抗原蛋白

 大豆抗原蛋白是由 Duke等(1934)首次发现 —— 婴儿过敏

 Castimapoolas和Ekenstam(1969)从大豆中分离出4种抗原

蛋白:

大豆球蛋白(glycinin)

-伴大豆球蛋白(-conglycinin)

-伴大豆球蛋白(-conglycinin)

-伴大豆球蛋白( -conglycinin)

slide12

酸性多肽

碱性多肽

 Glycinin 由6个酸性多肽和6个碱性多肽组成的

大分子蛋白(360kDa)

占大豆总球蛋白的40%(李德发,2003)

Glycinin

晶体结构

slide15

Glycinin水平

SEM

P-值

0%

2%

4%

8%

十二指肠

10.53

21.09

20.15

17.17

2.60

0.05

2.01

0.04

空 肠

10.93

20.10

17.76

17.08

回 肠

10.25

19.97

14.54

10.89

1.93

0.01

Glycinin对仔猪小肠内肥大细胞数量及组胺含量的影响

 日粮中添加 2%或 4%的glycinin可显著增加仔猪空肠、回肠内组胺的释放量。

孙鹏等,2008

slide16

大豆抗原蛋白与仔猪断奶腹泻

饲喂含与不含大豆抗原蛋白的仔猪腹泻情况(Miller,1994)

slide17

大豆抗原蛋白与仔猪生长性能

大豆抗原蛋白使仔猪在断奶后第一周生长速度明显下降(P<0.05)

Li等(1990,1991)

slide18

纯样品

Glycinin对仔猪(24-28日龄)生长性能影响

孙鹏等(2008)

slide19

β-conglycinin对断奶仔猪(38日龄)生长性能的影响β-conglycinin对断奶仔猪(38日龄)生长性能的影响

pigs

slide20

大豆抗原蛋白通过诱发幼龄动物的过敏反应,影响机体消化系统和免疫功能,导致腹泻,最后抑制动物生长大豆抗原蛋白通过诱发幼龄动物的过敏反应,影响机体消化系统和免疫功能,导致腹泻,最后抑制动物生长

  • 减少豆粕用量是减轻断奶仔猪过敏反应的有效措施
  • 正确的饲喂制度

免疫耐受的产生需要一定时间(断奶后7-10d)

教槽料应持续用到断奶后10天

slide21

在使用前,对大豆抗原蛋白进行消除是提升大豆及其制品质量,避免仔猪腹泻的关键。

slide22

大豆抗原蛋白的消除

微生物发酵

外源酶水解

基因工程技术

有机溶剂萃取

多种措施结合

slide24

抗原活性降低

微生物发酵

寡 肽

生物活性肽

大豆抗原蛋白

slide26
发酵过程控制

乳酸菌

枯草芽孢

酵母菌

PH值

α-半乳糖苷酶

酸性蛋白酶

温度

水分

降解

降解

……

不良寡糖

大豆抗原

slide27

豆粕生物发酵的优势

大豆蛋白在进入动物体内之前降解为小分子蛋白,提高蛋白质的利用率;

降低大豆抗原蛋白的抗原活性;

降解不良寡糖(棉籽糖、水苏糖);

产生有益代谢产物(乳酸>2.5%);

具有发酵香味,提高适口性和采食量;

slide30

β-conglycininα´-亚基对大鼠肠道超微结构的影响β-conglycininα´-亚基对大鼠肠道超微结构的影响

正常组:上皮细胞微绒毛结构清晰

试验组:上皮细胞微绒毛结构模糊

——郭鹏飞(2007)

slide31

结果表明,β-conglycinin的α´-亚基同样有较强的致过敏活性。结果表明,β-conglycinin的α´-亚基同样有较强的致过敏活性。

slide32

Transgenic Soybean Seeds

基因敲除(沉默)

’

RNA Gel Blot Shows Conglycinin Cosuppression

——Kinney等,2001

slide33

但研究表明,大豆β-conglycinin含量的减少,将伴随着glycinin含量的增加。但研究表明,大豆β-conglycinin含量的减少,将伴随着glycinin含量的增加。

而glycinin同样是一种

抗原蛋白

slide35

因 此

生物发酵技术

是目前降低大豆抗原蛋白的最佳方法

slide36

发酵豆粕的质量差异及

大豆抗原蛋白的含量检测

slide37

SDS-PAGE (定性)

    •  抗血清测定(特异性问题)
  •  高效液相色谱分析(设备、前处理问题)
  •  以抗大豆β-conglycinin单克隆抗体为介质的
  • 免疫学检测方法
slide38

电泳图谱

Marker

豆粕对照

发酵豆粕

1

发酵豆粕

2

发酵豆粕

3

发酵豆粕

4

发酵豆粕

5

发酵豆粕

6

slide40

结 语

热处理是应用较为广泛的日粮抗原消除方法,但对于热稳定性高,热加工不足以有效地灭活的抗营养因子,人们必须要不断地研究新的方法加以消除。

微生物发酵是目前改善大豆及其制品营养价值和饲喂价值,减少仔猪致敏性腹泻的有效途径!

13479121859 youjinm@163 com

谢谢!

游金明 博 士

江西农业大学

手机: 13479121859

邮箱: youjinm@163.com