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大豆抗原蛋白与仔猪过敏性腹泻

大豆抗原蛋白与仔猪过敏性腹泻. 游金明 博 士 江西农业大学动物科技学院 上海源耀生物科技有限公司 2012 年 5 月 16 日 中国 · 南京. 1. 2. 3. 4. 仔猪腹泻与产生原因. 日粮致敏性腹泻与大豆抗原蛋白. 大豆抗原蛋白的消除. 大豆抗原蛋白的分析检测. 内容提要. 仔猪腹泻发生的原因. 传染性病因 1.1 病毒性腹泻 传染性胃肠炎、 轮状病毒感染 1.2 细菌性腹泻 仔猪黄痢、 仔猪白痢、仔猪副伤寒、仔猪红痢. 8. 2. 免疫系统因素. 被动免疫（母乳）. 6. 免疫力. 主动免疫. 4.

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大豆抗原蛋白与仔猪过敏性腹泻

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  1. 大豆抗原蛋白与仔猪过敏性腹泻 游金明 博 士 江西农业大学动物科技学院 上海源耀生物科技有限公司 2012年5月16日 中国·南京

  2. 1. 2. 3. 4. 仔猪腹泻与产生原因 日粮致敏性腹泻与大豆抗原蛋白 大豆抗原蛋白的消除 大豆抗原蛋白的分析检测 内容提要

  3. 仔猪腹泻发生的原因 • 传染性病因 1.1 病毒性腹泻 传染性胃肠炎、轮状病毒感染 1.2 细菌性腹泻 仔猪黄痢、仔猪白痢、仔猪副伤寒、仔猪红痢

  4. 8 2. 免疫系统因素 被动免疫（母乳） 6 免疫力 主动免疫 4 2 周龄 6 7 1 2 3 4 5

  5. 3. 应激因素 3.1 温度骤变 • 皮下脂肪薄，被毛稀少：保温能力差；糖原水平低，产热能力不足，因此仔猪对冷相当敏感

  6. 3.2 断奶应激 8 被动免疫（母乳） 6 免疫力 主动免疫 断奶 4 2 周龄 6 7 1 2 3 4 5

  7. 饲料（营养）因素 4.1 营养消化不良 胃酸分泌不足，消化酶活性不高 母乳→ 饲料

  8. 饲料（营养）因素 4.2 日粮抗原过敏 日粮抗原蛋白过敏 ——导致仔猪腹泻的一个重要因素

  9. 仔猪日粮抗原蛋白的来源 大 豆 大豆制品 植物性饲料

  10. 大豆抗营养因子 蛋白酶抑制因子 脲　　酶 凝　集　素 植　　酸 寡　　糖 单 宁 抗 原 蛋 白 抗维生素因子 其 他 　（热　敏　性） （　热　稳　定　性　） 大豆中含多种抗营养因子

  11. 大豆抗原蛋白  大豆抗原蛋白是由 Duke等（1934）首次发现 —— 婴儿过敏  Castimapoolas和Ekenstam（1969）从大豆中分离出4种抗原 蛋白: 大豆球蛋白（glycinin） -伴大豆球蛋白（-conglycinin） -伴大豆球蛋白（-conglycinin） -伴大豆球蛋白（ -conglycinin）

  12. 酸性多肽 碱性多肽  Glycinin 由6个酸性多肽和6个碱性多肽组成的 大分子蛋白（360kDa） 占大豆总球蛋白的40%（李德发，2003） Glycinin 晶体结构

  13. -Conglycinin是大豆中的一种主要贮藏蛋白

  14. 仔猪对glycinin的过敏反应 孙鹏等，2008

  15. Glycinin水平 SEM P-值 0% 2% 4% 8% 十二指肠 10.53 21.09 20.15 17.17 2.60 0.05 2.01 0.04 空 肠 10.93 20.10 17.76 17.08 回 肠 10.25 19.97 14.54 10.89 1.93 0.01 Glycinin对仔猪小肠内肥大细胞数量及组胺含量的影响  日粮中添加 2%或 4%的glycinin可显著增加仔猪空肠、回肠内组胺的释放量。 孙鹏等，2008

  16. 大豆抗原蛋白与仔猪断奶腹泻 饲喂含与不含大豆抗原蛋白的仔猪腹泻情况（Miller，1994）

  17. 大豆抗原蛋白与仔猪生长性能 大豆抗原蛋白使仔猪在断奶后第一周生长速度明显下降(P<0.05) Li等（1990，1991）

  18. 纯样品 Glycinin对仔猪（24-28日龄）生长性能影响 孙鹏等（2008）

  19. β-conglycinin对断奶仔猪（38日龄）生长性能的影响β-conglycinin对断奶仔猪（38日龄）生长性能的影响 pigs

  20. 大豆抗原蛋白通过诱发幼龄动物的过敏反应，影响机体消化系统和免疫功能，导致腹泻，最后抑制动物生长大豆抗原蛋白通过诱发幼龄动物的过敏反应，影响机体消化系统和免疫功能，导致腹泻，最后抑制动物生长 • 减少豆粕用量是减轻断奶仔猪过敏反应的有效措施 • 正确的饲喂制度 免疫耐受的产生需要一定时间（断奶后7-10d） 教槽料应持续用到断奶后10天

  21. 在使用前，对大豆抗原蛋白进行消除是提升大豆及其制品质量，避免仔猪腹泻的关键。

  22. 大豆抗原蛋白的消除 微生物发酵 外源酶水解 基因工程技术 有机溶剂萃取 多种措施结合

  23. 微生物发酵

  24. 抗原活性降低 微生物发酵 寡 肽 生物活性肽 大豆抗原蛋白

  25. 微生物发酵工艺： 生产工艺：

  26. 发酵过程控制 乳酸菌 枯草芽孢 酵母菌 PH值 α-半乳糖苷酶 酸性蛋白酶 温度 水分 降解 降解 …… 不良寡糖 大豆抗原

  27. 豆粕生物发酵的优势 大豆蛋白在进入动物体内之前降解为小分子蛋白，提高蛋白质的利用率； 降低大豆抗原蛋白的抗原活性； 降解不良寡糖（棉籽糖、水苏糖）； 产生有益代谢产物（乳酸>2.5%）； 具有发酵香味，提高适口性和采食量；

  28. 大豆基因工程改良

  29. 据报道，三亚基的抗原活性： >  > ’

  30. β-conglycininα´-亚基对大鼠肠道超微结构的影响β-conglycininα´-亚基对大鼠肠道超微结构的影响 正常组：上皮细胞微绒毛结构清晰 试验组：上皮细胞微绒毛结构模糊 ——郭鹏飞（2007）

  31. 结果表明，β-conglycinin的α´-亚基同样有较强的致过敏活性。结果表明，β-conglycinin的α´-亚基同样有较强的致过敏活性。

  32. Transgenic Soybean Seeds 基因敲除（沉默） ’    RNA Gel Blot Shows Conglycinin Cosuppression ——Kinney等，2001

  33. 但研究表明，大豆β-conglycinin含量的减少，将伴随着glycinin含量的增加。但研究表明，大豆β-conglycinin含量的减少，将伴随着glycinin含量的增加。 而glycinin同样是一种 抗原蛋白

  34. 不同加工工艺大豆蛋白比较

  35. 因 此 生物发酵技术 是目前降低大豆抗原蛋白的最佳方法

  36. 发酵豆粕的质量差异及 大豆抗原蛋白的含量检测

  37. SDS-PAGE （定性） •  抗血清测定（特异性问题） •  高效液相色谱分析（设备、前处理问题） •  以抗大豆β-conglycinin单克隆抗体为介质的 • 免疫学检测方法

  38. 电泳图谱 Marker 豆粕对照 发酵豆粕 1 发酵豆粕 2 发酵豆粕 3 发酵豆粕 4 发酵豆粕 5 发酵豆粕 6

  39. 以单抗为介质的ELISA（定量）

  40. 结 语 热处理是应用较为广泛的日粮抗原消除方法，但对于热稳定性高，热加工不足以有效地灭活的抗营养因子，人们必须要不断地研究新的方法加以消除。 微生物发酵是目前改善大豆及其制品营养价值和饲喂价值，减少仔猪致敏性腹泻的有效途径！

  41. 谢谢！ 游金明 博 士 江西农业大学 手机: 13479121859 邮箱: youjinm@163.com

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