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KAI1 基因在人肺癌细胞株中表达水平及调控机制的研究 ＊. 尤嘉琮 1 赵颖 2 陈 军 1 马 力 1 朱大兴 1 周清华 1 1 、天津医科大学总医院天津市肺癌研究所 2 、四川大学华西医院肿瘤中心. ＊ 本研究受到国家自然科学基金重点项目（ N0.30430300 ）和天津市科技支撑计划重点项目（ No. 06YFSZSF05300 ） 资助. 研究目的. 一、研究不同组织学类型的人肺癌细胞株和正常人肺成纤维细胞株 MRC-5 中 KAI1 的 mRNA 表达水平及其差异.
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KAI1基因在人肺癌细胞株中表达水平及调控机制的研究＊KAI1基因在人肺癌细胞株中表达水平及调控机制的研究＊ 尤嘉琮1 赵颖2陈 军1马 力1朱大兴1周清华1 1、天津医科大学总医院天津市肺癌研究所 2、四川大学华西医院肿瘤中心 ＊本研究受到国家自然科学基金重点项目（N0.30430300）和天津市科技支撑计划重点项目（No. 06YFSZSF05300）资助
研究目的 • 一、研究不同组织学类型的人肺癌细胞株和正常人肺成纤维细胞株MRC-5中KAI1的mRNA表达水平及其差异 二、研究不同转移潜能的人大细胞肺癌细胞株中KAI1的mRNA表达水平，探讨KAI1与nm23-H1在调控肺癌转移中的相互关系 三、研究甲基化抑制剂5-杂氮脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对肺癌细胞株L9981、GLC-82和NCI-H460中KAI1的mRNA表达水平和体外增殖能力的影响
主要材料与方法 • 实验用细胞株： • MRC-5：正常人肺成纤维细胞株 • L9981：人高转移大细胞肺癌细胞株 • L9981-nm23-H1：稳定转染nm23-H1基因的L9981细胞株 • NL9980：人低转移大细胞肺癌细胞株 • 肺腺癌细胞株：A549、GLC-82、A2，SPCA-1和LTEP--2 • 人大细胞肺癌细胞株：NCI-H460 • 人小细胞肺癌细胞株：SH-77和NCI-H446 • 肺鳞癌细胞株：YTMLC-90 甲基化抑制剂：5-杂氮脱氧胞苷 (5-Aza-CdR) • 主要实验方法： • 实时荧光定量PCR • MTT法绘制细胞生长曲线
比较MRC-5与不同组织类型肺癌细胞株间KAI1基因mRNA表达水平比较MRC-5与不同组织类型肺癌细胞株间KAI1基因mRNA表达水平 P=0.000~0.002 1. MRC-5 , 正常人肺成纤维细胞株； 2. L9981, 人高转移大细胞肺癌细胞株；3. NL9980,人低转移大细胞肺癌细胞株； 4. L9981-nm23-H1-pEGFP，稳定转染nm23-H1的L9981细胞株； 5. A549，6. GLC-82，7. A2，8. SPCA-1，肺腺癌细胞株； 9. NCI-H460，人大细胞肺癌细胞株； 10. SH-77，11. NCI-H446，人小细胞肺癌细胞株； 12. LTEP--2，肺腺癌细胞株; 13. YTMLC-90，肺鳞癌细胞株；
不同细胞株间KAI1基因表达水平比较的P值表 1. MRC-5 , 正常人肺成纤维细胞株；2. L9981, 人高转移大细胞肺癌细胞株；3. NL9980,人低转移大细胞肺癌细胞株； 4. L9981-nm23-H1-pEGFP，稳定转染nm23-H1的L9981细胞株； 5. A549，6. GLC-82，7. A2，8. SPCA-1，肺腺癌细胞株； 9. NCI-H460，人大细胞肺癌细胞株； 10. SH-77，11. NCI-H446，人小细胞肺癌细胞株； 12. LTEP--2，肺腺癌细胞株; 13. YTMLC-90，肺鳞癌细胞株；
在L9981细胞中转染nm23-H1可显著上调KAI1的mRNA表达水平在L9981细胞中转染nm23-H1可显著上调KAI1的mRNA表达水平 1. L9981；2. NL9980；3. L9981-nm23-H1-pEGFP
比较L9981细胞与不同组织学类型的人肺癌细胞株间KAI1的mRNA表达水平比较L9981细胞与不同组织学类型的人肺癌细胞株间KAI1的mRNA表达水平 1.L9981；2. A549；3. GLC-82；4. A2；5. SPCA-1；6. NCI-H460；7. SH-77； 8. NCI-H446；9. LTEP--2；10. YTMLC-90
比较NL9980与不同组织学类型的人肺癌细胞株间KAI1的mRNA表达水平比较NL9980与不同组织学类型的人肺癌细胞株间KAI1的mRNA表达水平 1. NL9980；2. L9981-nm23-H1-pEGFP；3. A549；4. GLC-82；5. A2； 6. SPCA-1；7. NCI-H460；8. SH-77；9. NCI-H446；10. LTEP--2；11. YTMLC-90
比较A549细胞与不同组织学类型的人肺癌细胞株间KAI1的mRNA表达水平比较A549细胞与不同组织学类型的人肺癌细胞株间KAI1的mRNA表达水平 1.A549；2. GLC-82；3. A2；4. SPCA-1；5. NCI-H460；6. SH-77； 7. NCI-H446；8. LTEP--2；9. YTMLC-90
比较GLC-82细胞与不同组织学类型的人肺癌细胞株间KAI1的mRNA表达水平比较GLC-82细胞与不同组织学类型的人肺癌细胞株间KAI1的mRNA表达水平 1.GLC-82；2. A2；3. SPCA-1；4. NCI-H460；5. SH-77； 6. NCI-H446；7. LTEP--2；8. YTMLC-90
比较A2细胞与不同组织学类型的人肺癌细胞株间KAI1的mRNA表达水平比较A2细胞与不同组织学类型的人肺癌细胞株间KAI1的mRNA表达水平 1. A2；2. SPCA-1；3. NCI-H460；4. SH-77；5. NCI-H446；6. LTEP--2；7.YTMLC-90
比较SPCA-1细胞与不同组织学类型的人肺癌细胞株间KAI1的mRNA表达水平比较SPCA-1细胞与不同组织学类型的人肺癌细胞株间KAI1的mRNA表达水平 1. SPCA-1；2. NCI-H460； 3. SH-77；4. NCI-H446； 5. LTEP--2；6.YTMLC-90
比较NCI-H460细胞与不同组织学类型的人肺癌细胞株间KAI1的表达水平比较NCI-H460细胞与不同组织学类型的人肺癌细胞株间KAI1的表达水平 1. NCI-H460；2. SH-77；3. NCI-H446；4. LTEP--2；5.YTMLC-90
比较SH-77细胞与不同组织学类型的人肺癌细胞株间KAI1的mRNA表达水平比较SH-77细胞与不同组织学类型的人肺癌细胞株间KAI1的mRNA表达水平 1. SH-77；2. NCI-H446；3. LTEP--2；4.YTMLC-90
比较NCI-H446、 LTEP- -2和YTMLC-90细胞株间KAI1的mRNA表达水平 1. NCI-H446；2. LTEP--2；3.YTMLC-90
5-Aza-CdR上调了NCI-H460 和L9981细胞中KAI1的mRNA表达水平 NCI-H460 cells L9981 cells 1. Control ；2. 2μmol/L 5-Aza-CdR ；3. 10μmol/L 5-Aza-CdR 1. Control ；2. 2μmol/L 5-Aza-CdR ；3. 10μmol/L 5-Aza-CdR NCI-H460和L9981细胞株对照组与实验组间KAI1基因表达水平比较的P值表
5-Aza-CdR对GLC-82细胞中KAI1的mRNA表达水平无显著影响5-Aza-CdR对GLC-82细胞中KAI1的mRNA表达水平无显著影响 1. 对照组 ；2. 2μmol/L 5-Aza-CdR ；3. 10μmol/L 5-Aza-CdR GLC-82细胞株对照组与实验组间KAI1基因表达水平比较的P值表
5-Aza-CdR能够抑制人肺癌细胞株NCI-H460、L9981的增殖5-Aza-CdR能够抑制人肺癌细胞株NCI-H460、L9981的增殖 5-Aza-CdR对人肺癌细胞株GLC-82的增殖无显著影响
结 论 1、不同组织学类型人肺癌细胞株中KAI1基因mRNA表达水平均显著低于正常人肺成纤维细胞株MRC-5； 2、不同转移潜能人大细胞肺癌细胞株中KAI1基因mRNA表达水平有明显差异，nm23-H1基因转染能显著上调人高转移大细胞肺癌细胞株中KAI1基因mRNA表达水平； 3、5-Aza-CdR能显著上调人肺癌细胞株L9981和NCI-H460中 KAI1基因mRNA表达水平，并能够抑制其体外增殖能力。
