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我科研能力培养的三步曲

我科研能力培养的三步曲. 张永莲 中国科学院，上海生命科学院，生化与细胞研究所. 大学毕业从事 研究工作 后的变化 【1】 学科观念：化学－ 生物学－医学 单分子 多分子 细胞 整体. 清洁？. 接受已知. 广. （活）. 探索未知！不断学习！. 深入. （－－组织－－器官）. 【2】 实验： 重复 已成功的安排好的实验. 独立地 用实验观察 未知 的现象. 科研能力三步曲 解决 问题 总结 问题 提出 问题. 自然科学研究. 了解自然现象 认识自然规律 改造自然 为人类造福. 科研的动力. 小我 －为自己－领导表扬已满足

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我科研能力培养的三步曲

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Presentation Transcript

  1. 我科研能力培养的三步曲 张永莲 中国科学院，上海生命科学院，生化与细胞研究所

  2. 大学毕业从事研究工作后的变化 【1】学科观念：化学－生物学－医学 单分子 多分子 细胞 整体 清洁？ 接受已知 广 （活） 探索未知！不断学习！ 深入 （－－组织－－器官）

  3. 【2】实验： 重复已成功的安排好的实验 独立地 用实验观察未知的现象

  4. 科研能力三步曲 解决问题 总结问题 提出问题 自然科学研究 了解自然现象 认识自然规律 改造自然为人类造福

  5. 科研的动力 小我－为自己－领导表扬已满足 为学位－能毕业就可 为出国－多学几项实验技术 大我－为国家－世界舞台上争雄 为民生－提高人民健康和生活水平

  6. 科教兴国 科研工作者人人有责 不甘落后，敢于竞争， 不满足于赶，要勇于超越。 怎样在科研中鞭策自己 走出一条多、快、好、省的新路

  7. 参加课题 解决问题， 总结问题 主持课题 螺旋性上升的深层次的规律问题的提出 研究方向性问题的提出 战略性问题的提出

  8. 解决问题的能力：了解自然－现象 观察自然的眼睛－－技术方法 方法的选择－－ 灵敏度，优缺点，局限性 方法的运用－－对照，样品的代表性 成功率－－操作过程每一步的检查， 方法的改进和创造 效率－－周密设计，时间巧安排

  9. 实验方法的选择和创造 已有方法的改进 要学习，但不墨守成规， 多思考，创造性地运用学到的知识

  10. 不依赖特殊仪器或KIT C14样品 PAGE Gel 等电聚焦分析

  11. Transfection Assay PSBP C3 gene 9.5kb B P P P B

  12. 肝 前列腺 睾丸 肝 前列腺 睾丸 _ ++ _ + _ _ ++ _ + _

  13. B A 32P 32P 32P 32P 32P 32P 32P 32P

  14. _ _ _ +

  15. 凝胶阻滞分析 组织 细胞核（纯，无细胞质蛋白污染） 核蛋白质抽提液（完全） DNA oligo 32P-DNA oligo 探针 （放射性比活高） 20C X 30min DNA竞争剂（选择） 灵敏度的提高： HindIII EcoRI AA TTCGA In vitro transcription: 抽提液 4x三核苷酸 转录 基因组DNA PAGE电泳 GAA CTTAA GAATT CTTAA X光片曝光

  16. 为什么实验成功率那么高？ 【1】设计尽量周密－几种可能性都要估计到，最适条件（剂量、时间……),可比性(miRNA Northern) 【2】阳性和阴性对照，关键时（样品）要作预实验（Bin1b， 转基因鼠） 【3】每一步要检查（克隆、足迹法） 【4】作好实验记录 （x光片、试剂配错、过程中的突然事件） 为什么在很短时间内能作那么多实验？ 【1】每天写工作计划，几个实验参差在一起安排 【2】利用晚上时间 【3】作好准备工作，Vector切好一大批，gel铺好

  17. 总结问题能力－－认识自然规律 数据处理：实验的可靠性：假象？条件性？ 规律：普遍规律和一般规律－－结论、 展望：意义和进一步的深入实验，抓主要矛盾 阶段性总结：写文章

  18. 为什么总结那么快？ 【1】观察现象要仔细， 【2】数据要publishable 【3】每个实验有小结，及时补数据 不同暴光时间 【4】结论是否成立？意义？

  19. corpus corpus corpus Initial segment Initial segment Initial segment caput caput caput cauda cauda cauda 14day Rat 21day Rat 36day Rat

  20. corpus corpus corpus Initial segment Initial segment Initial segment caput caput caput cauda cauda cauda 49day Rat 69day Rat 120day Rat

  21. Development changes of Bin1b and Bin2a in rat epididymis caput region 60 D 120 D 270 D 720 D 15 D 30 D 45 D Bin2a Bin1b 18s Relative mRNA level /20ug total RNA in rat epididymis caput Bin-1b Bin-2a days

  22. 肝 前列腺 睾丸 肝 前列腺 睾丸 _ ++ _ + _ _ ++ _ + _

  23. The ORF of the Clone 16 Mouse16 Isoform  : ORF 245 a.a. 1 8 101 240 526 605 745 783 (A)n Mouse16 Isoform : ORF 181 a.a. 1 8 101 240 525 526 553 703 (A)n Rat16: ORF 181 a.a. 1 31 548 549 576 725 (A)n Monkey16: ORF 160 a.a. 1 12 526 527 554 673 (A)n Human16: ORF 163 a.a. 1 26 514 540 541 688 (A)n

  24. ACAG TTTC ACAG TCAC 133bp 26bp 80bp ACAG TTTC ACAG TCAC 133bp 80bp 26bp ACAG CTTC ACAG TCAC 155bp 80bp CTAG TCAC 26bp 265bp 26bp CTAG TCAC 275bp 26bp Intron5 Exon6 Mouse16 α Mouse16β Rat16 Monkey16 Human16

  25. 参加课题 解决问题， 总结问题 主持课题 螺旋性上升的深层次的规律问题的提出 研究方向性问题的提出 战略性问题的提出

  26. 未来是你们的！

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