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白血病 的实验室诊断

白血病 的实验室诊断. 安徽省立医院 丁邦胜. 患者有不明原因的持续或反复发热，贫血，恶液质，有出血倾向，肝、脾、淋巴结肿大，骨骼疼痛或胸骨有压痛，不明原因的消瘦，体力逐渐下降等症状就诊时，医生要高度警惕。考虑是否为血液病？. 血常规的检测是必不可少的. 血常规中会发现原始或幼稚细胞，或某一种细胞明显增多或减少. 当高度怀疑是白血病，骨髓穿刺是首要进行的，骨髓细胞学检测是诊断白血病及疗效观察、判断预后有着重要作用。.

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白血病 的实验室诊断

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Presentation Transcript

  1. 白血病的实验室诊断 安徽省立医院 丁邦胜

  2. 患者有不明原因的持续或反复发热，贫血，恶液质，有出血倾向，肝、脾、淋巴结肿大，骨骼疼痛或胸骨有压痛，不明原因的消瘦，体力逐渐下降等症状就诊时，医生要高度警惕。考虑是否为血液病？

  3. 血常规的检测是必不可少的

  4. 血常规中会发现原始或幼稚细胞，或某一种细胞明显增多或减少血常规中会发现原始或幼稚细胞，或某一种细胞明显增多或减少

  5. 当高度怀疑是白血病，骨髓穿刺是首要进行的，骨髓细胞学检测是诊断白血病及疗效观察、判断预后有着重要作用。

  6. 白血病是起源与造血系统的恶性肿瘤性疾病，其特征是造血组织中某一系列或几系列血细胞无控制地增生、并侵润其他组织，骨髓及外周血中以原始及早期幼稚细胞为主，临床常见贫血、发热和肝、脾、淋巴结肿大等表现，其起病急，发展快，未经治疗一般病程6个月之内。 病因：1、电离辐射 2、化学因素 3、病毒 4、遗传因素

  7. 按白血病细胞成熟障碍的情况，以及病情发展快慢将白血病划分为急性白血病和慢性白血病

  8. 急性白血病的分型由过去的单一的FAB形态学分型方法发展为:形态学（Morphological)、免疫学(Immunological)、细胞遗传学(Cytogenetics)、分子生物学（Molecular biology)的MICM分型方法

  9. 白血病细胞形态特点 • 细胞大小不均及形态异常 • 胞核异常，核形不规则，可见扭曲、折叠 • 核仁异常，核仁有的大而明显，有的不清 • 变性的征象：Auer`s小体、蓝细胞。

  10. 骨髓检查是诊断白血病的主要方法 骨髓中原始粒细胞或原始（单、淋）+幼稚（单、淋）细胞≥20%方可诊断为急性白血病 急性白血病分为急性淋巴细胞白血病和急性非淋巴细胞白血病。 常用的细胞化学染色：POX、NSE、NSE-NaF、CE、NAP、ACP、PAS等

  11. 急性白血病形态学特点： 血象：贫血，白细胞大部分明显最高，少数减少，可见原始、幼稚细胞，血小板明显减少。 骨髓象：常增生明显活跃或极度活跃，原始、幼稚细胞明显增多，常常伴有形态学异常，红系、巨核系受抑制。

  12. POX ≥3% ＜3% ANLL ALL NSE，NSE-NaF NSE，NSE-NaF 抑制 不抑制 不抑制 抑制 细胞体积大小、胞浆空泡 早幼粒 原始 原始+幼稚 小细胞 大小细胞 大细胞胞浆有空泡 红系≥50% M3 M1、M2 M6 M4 M5 L1 L2 L3 根据细胞化学染色将急性白血病分型

  13. 细胞免疫分型的临床应用1 有助于识别不同系列的细胞 识别髓系细胞的抗体有CD13、CD14、CD15、CD32、CD33、CD65、CD91、CD156、CD166等。识别淋巴细胞系列的抗体有：CD1、CD2、CD3、CD4、CD5、CD7、CD8、CD9、CD10、CD19、CD20、CD52、CD77等。识别巨核细胞和血小板的抗体有CD41、CD42、CD61、等。识别红细胞系列的抗体常用血型糖蛋白A或B，CD71。

  14. 识别不同的淋巴系统 识别成熟T淋巴细胞的抗体有CD2、CD3、CD4、CD7、CD8等。识别成熟B淋巴细胞的抗体有CD19、CD20、CD22等。识别NK细胞的抗体有CD16、CD56等。

  15. 用于识别不同分化阶段的细胞CD34+、CD90+、Lin-被认为使造血干细胞的主要标志; CD34+、CD33+为造血干细胞向髓系定向的标志; CD34+、TDT+、CD10+、CD7+为T淋巴细胞系祖细胞标志；CD34+、CD19+为B淋巴细胞系祖细胞标志。

  16. 急性粒细胞白血病（M1、M2） M1：急性粒细胞白血病未成熟型，骨髓中原粒细胞≥90% （非红系），早幼粒很少，中幼粒以下阶段不见或罕见。 M2：急性粒细胞白血病部分成熟型，分为两个亚型：M2a：骨髓中原粒细胞30~90% （非红系），早幼粒以下阶段＞10%，单核细胞＜20%；M2b：异常中性中幼粒＞30%。 细胞化学染色：POX＞3%，NSE：阴性~弱阳性，NSE-NaF：不抑制，NAP：减低，CE：阳性，PAS：阴性

  17. M1、M2a

  18. POX

  19. NSE

  20. NSE-NaF

  21. M1免疫表型： HLA─DR,MPO,CD34,CD33,CD13阳性，CD11,CD15阴性有t(9;22)形成BCR/ABL融合基因

  22. M2免疫表型： HLA─DR,MPO,CD33,CD13阳性，有t(6; 9)形成DEK-CAN融合基因

  23. M2b

  24. 免疫表型： HLA-DR,MPO,CD57,CD33,CD13阳性，其中CD33,CD13阳性率减低，更成熟的抗原CD15和CD11b阳性率增高有t(8;21)（q22;q22)或AML1基因重排

  25. M3：急性颗粒增多的早幼粒细胞白血病 分为两个亚型： M3a（粗颗粒型），M3b（细颗粒型） 细胞化学染色：POX：100%强阳性，NSE：阳性，NSE-NaF：不抑制，NAP：减低，CE：阳性

  26. M3a

  27. M3b

  28. M3 POX

  29. M3 NSE

  30. M3 NSE-NaF

  31. 免疫表型： CD33,CD13阳性，CD34、HLA-DR阴性 遗传学：t（15；17）及PNL/RARa融合基因

  32. M4：急性粒-单细胞白血病。分为4个亚型 M4a：原始和早幼粒细胞为主，原、幼单和单核细胞≥20%（非红系） M4b：原、幼单核细胞为主，原始和早幼粒细胞＞ 20%（非红系） M4c：原始细胞即具有粒细胞系又具有单核细胞系形态特征＞30% （非红系） M4eo：除上述特点外，还有粗大而圆的嗜酸颗粒及嗜碱颗粒细胞占5~30% （非红系） 细胞化学染色：POX＞3%，NSE：阳性，NSE-NaF：抑制，，CE：部分阳性，

  33. M4

  34. M4 NSE 单为主

  35. NSE-NaF

  36. NSE 粒为主

  37. NSE-NaF

  38. M4eo

  39. 免疫表型：CD13,CD14,CD15.CD33.HLA-DR阳性 遗传学：M4Eo有16号染色体异常，inv(16)(p13;q22)或t(16;16)(p13;q22)

  40. M5：急性单核细胞白血病，分为两个亚型 M5a：未分化型：骨髓中原单≥80% （非红系） M5b：部分分化型：骨髓中原始和幼稚单核细胞＞30%，原单细胞＜80% （非红系） 细胞化学染色：POX＞3%（弱阳性），NSE：阳性，NSE-NaF：抑制，NAP：正常或增高，CE：阴性

  41. M5b

  42. M5 POX

  43. M5 NSE

  44. M5 NaF

  45. 免疫表型： CD11,CD13,CD14,CD15,CD33,HLA-DR,CD36,CD64和溶菌酶阳性，CD34阴性 遗传学：常有t/del(11)(q23),多见于M5a, t(9;11)易位致MLL-AF9融合基因及t(11;19)易位致MLL-ENL融合基因多见

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