tinci n histol gica l.
Download
Skip this Video
Loading SlideShow in 5 Seconds..
Tinción Histológica PowerPoint Presentation
Download Presentation
Tinción Histológica

Loading in 2 Seconds...

play fullscreen
1 / 55

Tinción Histológica - PowerPoint PPT Presentation


  • 566 Views
  • Uploaded on

Universidad de Chile Facultad de Medicina Curso Histopatología 2007. Tinción Histológica. Tutora: TM Solange Zapata Residente: Dr Jorge Chamorro Ruiz 3 de Mayo del 2007. Técnica Histológica. Fijación Deshidratación Aclaramiento Inclusión Corte Tinción Montaje. Seminario Anterior.

loader
I am the owner, or an agent authorized to act on behalf of the owner, of the copyrighted work described.
capcha
Download Presentation

PowerPoint Slideshow about 'Tinción Histológica' - kiandra


An Image/Link below is provided (as is) to download presentation

Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author.While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server.


- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - E N D - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -
Presentation Transcript
tinci n histol gica

Universidad de Chile

Facultad de Medicina

Curso Histopatología 2007

Tinción Histológica

Tutora: TM Solange Zapata

Residente: Dr Jorge Chamorro Ruiz

3 de Mayo del 2007

t cnica histol gica
Técnica Histológica
  • Fijación
  • Deshidratación
  • Aclaramiento
  • Inclusión
  • Corte
  • Tinción
  • Montaje

Seminario Anterior

tinci n y montaje
Tinción y Montaje
  • Corte
  • Desparafinado – Rehidratación
  • Tinción
  • Deshidratación
  • Montaje
    • Cubreobjetos: funciones
      • Protección del tejido
      • ↓ refracción de luz polarizada
colorantes
Colorantes
  • ¿Por qué colorear una muestra?

Los diversos elementos de los tejidos poseen prácticamente el mismo índice de refracción, lo que hace que el reconocimiento de distintas estructuras sea una tarea difícil.

definici n de colorante
Definición de Colorante
  • Un colorante es un cuerpo coloreado que puede comunicar su color a otro cuerpo.
  • La coloración es la propiedad que tienen ciertos cuerpos de ejercer una absorción selectiva sobre la luz. Dicho de otra manera un cuerpo se ve de tal color porque trasmite por transparencia o por difusión las radiaciones complementarias de las que él absorbe.
tipos de colorantes
Tipos de Colorantes
  • Colorantes que diferencian los componentes ácidos y básicos de la célula.
  • Colorantes especializados que distinguen los componentes fibrosos de la matriz extracelular.
  • Sales metálicas que se precipitan en los tejidos y forman depósitos de metales en ellos.
tipos de coloraciones
Tipos de Coloraciones
  • Directas: se producen por inmersión en el baño colorante.
  • Indirectas: en este tipo de coloración, el colorante no puede actuar directamente, el objeto a colorear debe ser tratado de antemano por otra sustancia que lo prepare para admitir el colorante, esta se llama mordiente.
fundamentos qu micos de la coloraci n
Fundamentos Químicos de la Coloración
  • Clasificación colorantes según afinidad:
    • Colorantes nucleares o básicos: su componente colorante activo es una base coloreada que se combina con los ácidos nucleicos.
    • Colorantes citoplasmáticos o ácidos: su componente activo es un ácido coloreado que se combina con el citoplasma.
    • Colorantes neutros, tanto el ácido como la base son coloreadas.
colorantes b sicos
Colorantes básicos

ANILINA+ Cl-

  • Los colorantes básicos reaccionan con los GRUPOS ANIÓNICOS de los componentes texturales, que son los grupos fosfato de los ácidos nucleicos (ADN y RNA), los grupos SULFATO de los glucosaminoglucanos y los GRUPOS CARBOXILO de las proteínas. La reacción de estos grupos varía según el pH.
colorantes cidos
Colorantes ácidos

Na+ ANILINA-

  • Los colorantes ácidos se unen primariamente a los componentes texturales por medio de enlaces electrostáticos de manera similar pero opuesta a la de los colorantes básicos. Las anilinas ácidas reaccionan con grupos catiónicos, como los grupos amino ionizados de las proteínas.
entonces
Elementos que se tiñan con colorantes básicos (ej. Hematoxilina) son basófilos:

La Heterocromatina y los Nucleolos por los grupos Fosfato ionizados.

Ergatoplasma por grupos Fosfato ionizados.

Matriz del Cartílago por grupos Sulfato ionizados

Elementos que se tiñan con colorantes ácidos (ej. Eosina) son acidófilos:

La mayor parte del citoplasma no especializado.

Filamentos Citoplasmáticos.

Fibras extracelulares. Todos estos debidos a grupos Amino ionizados.

Entonces:
metacromasia
Metacromasia
  • Fenómeno por el cual un colorante cambia de color tras reaccionar con un componente textural.
  • Se debe a que en tejidos con altas concentraciones de POLIANIONES, la molécula del colorante se polimeriza entre si y sus propiedades de absorción son diferentes de las propiedades de las moléculas individuales.

Cromótropos: Glucosaminoglucanos

sulfatados, nucleoproteínas, cartílago,

gránulos de los mastocitos. El cristal violeta también genera metacromasia al teñir amiloide

Azul de Toluidina tiñe gránulos mastocito púrpura

tinci n coloraci n de cortes
Tinción (coloración) de cortes
  • Diferentes componentes celulares y tisulares poseen diferentes afinidades tintoriales.
hematoxilina eosina
Hematoxilina-Eosina

Técnica de tinción más usada.

  • Hematoxilina:
    • Colorante natural.
    • Propiedades similares a las anilinas básicas.
    • Tiñe todas las estructuras celulares, pero principalmente el núcleo (Histonas).
  • Eosina:
    • Colorante ácido.
    • Acción es la de una anilina ácida.
    • Tiñe ppalmente citoplasma celular.
slide16

Cortes de piel

Tinción

Hematoxilina-Eosina

t cnica de tinci n h e
Técnica de Tinción H/E
  • Tinción con hematoxilina.
  • Lavado con abundante agua.
  • Aplicar Borato de Potasio.
    • Cambia el color generado por la hematoxilina del morado al azul.
    • Aumenta el contraste de color.
t cnica tinci n h e ii
Técnica Tinción H/E II
    • Diferenciación:
      • Eliminación selectiva del exceso de colorante.
      • Se obtiene pasando el corte por un baño de alcohol ácido.
      • Resalta núcleos.
    • Azuleamiento:
      • La tinción queda de color rojizo se vira a azul intenso
      • Sumerge la placa en agua corriente alcalina o carbonato de litio al 1% en agua.
  • Eosina
    • Obtenemos núcleos azules, citoplasma rosado y colágeno y fibras musculares rosado pálido.
cubre objeto
Cubre-objeto
  • Una vez teñido el tejido debe ser protegido con un cubre-objeto.
  • Deshidratar
  • Medio de montaje
an lisis de placas
Análisis de placas

TÉCNICAS ESPECIALES

±10% biopsias

DIAGNÓSTICO

80-90% bp

tinciones para amiloide
Tinciones para Amiloide

Rojo Congo

(cortes ±30 mm)

H/E

bacterias

c

Bacterias

c Gram negativo: colonias bacterianas se tiñen

rojas

a

d

b

a y b Gram positivos:

tinción azul

d FITE: bacilos ácido resistentes

se tiñen rojo

bacterias ii
Bacterias II

Ambas placas con tinción Ziehl Neelsen

Bacilos ácido resistentes se tiñen rojo brillante

calcio
Calcio

Von Kossa-Azul Toluidina

Von Kossa: depósitos de calcio

Se tiñen café oscuro-negro

col geno i prote na extracelular predominante en dermis funci n estructural
Colágeno I: proteína extracelular, predominante en dermis, función estructural

b

b

e

a

a y b Picrosirius: Colágeno I color amarillo-rojizo

e Van Gieson: colágeno I rojo

d

c

c y d Tricromico Masson: colágeno I verde

col geno iii o fibras de reticulina en dermis perineural perivascular
Colágeno III: o fibras de Reticulina, en dermis perineural, perivascular

Impregnación con Nitrato de Plata:

fibras de reticulina se tiñen negras

eosin filos
Eosinófilos

Tinción Giemsa, eosinófilos se ven rojos

fibras el sticas
Fibras elásticas

HE Orceína ácida de Pinkus/Giemsa:

fibras de coloración pardo oscura

fibrina
Fibrina

ambas, Tinción de Picro-Mallory: Fibrina se tiñe rojo claro

También PAS

hemosiderina
Hemosiderina

a Gránulos de Hemosiderina sin teñir, de colora

ción amarillo-café birrefringentes

a

b Ferrocianuro de Potasio de Perls: azul

b

hongos

b

Hongos

b

b PAS para Criptococo (rojo)

a

a Mucicarmin para teñir Criptococo: hongos de coloración azul-violácea

c Tinción de PAS evidenciando

Blastomicosis

c

c

hongos ii
Hongos II

c Tinción de Gomori para Criptococo

c

a

a PAS esporas fungicas

b PAS Coccidiomicosis

en ambas, hongos se tiñen

rojos

b

l pidos s lo en tj fijado en formalina cortes por congelaci n
Lípidos sólo en tj fijadoen formalina + cortes por congelación

b

b Sudan III: adipocitos rojos

a

a Sudan IV: adipocitos anaranjados

c

c Sudan black b: Lípidos azul-negruzcos

mastocitos
Mastocitos

ambas, Tinción con Azul de Toluidina:

gránulos de Mastocitos azul-púrpura

(metacromasia)

mastocitos38
Mastocitos

ambas, Tinción de Giemsa, donde los gránulos de los

Mastocitos son teñidos púrpura

melanina
Melanina

ambas, Tinción de Fontana Masson

pigmento melánico se tiñe negro

tricr mico de masson
Tricrómico de Masson
  • Principal Uso: Colágeno.
  • Tiñe:
    • Colágeno Verde.
    • Núcleo, músculo y nervios  Rojo oscuro.
    • Citoplasma  amarillo
van gieson
Van Gieson
  • Principal Uso: Tejido Fibroso
  • Tiñe:
    • Colágeno  rojo.
    • Núcleo  azul negro
    • Músculos, nervios  amarillos
    • (+Verhoeff) fibras elásticas  negro
fontana masson
Fontana Masson
  • Principal Uso: Melanina
  • Tiñe:
    • Melanina  Negro.
plata metenamina
Plata Metenamina
  • Principales Usos: Hongos y Cuerpos de Donovan
  • Tiñe:
    • Paredes micóticas  Negros.
    • Cuerpos de Donovan  negro
slide45
PAS
  • Principales Usos: Glucógeno, MPS neutros y Hongos, Membrana basal.
  • Tiñe:
    • Glucógeno  Diastasa lábil.
    • MPS neutros y Paredes micóticas  Diastasa resistentes.
slide46
Reacción positiva para glucógeno y polisacáridos neutros.
  • Reacción positiva sólo para polisacáridos neutros.

+ DIASTASA

azul alci n
Azul alcián
  • Principal Uso: Mucopolisacáridos ácidos
  • Tiñe
    • Mucopolisacáridos ácidos (mucina) Azul.
azul de toluidina
Azul de toluidina
  • Principal Uso: Mucopolisacáridos ácidos
  • Tiñe
    • Mucopolisacáridos ácidos  Purpura metacrómico.
giemsa
Giemsa
  • Principales usos: Gránulos mastocitarios, MPS ácidos, eosinófilos, leishmanias, médula ósea
  • Tiñe:
    • Gránulos mastocitarios, Mucopolisacaridos ácidos  Púrpura.
    • Eosinófilos, leishmanias  Rojo.

Eosinófilos en mucosa gástrica

ferrocianuro de potasio de perls
Ferrocianuro de Potasio de Perls.
  • Principal Uso: Hemosiderina
  • Tiñe:
    • Hemosiderina  Azul
rojo congo
Rojo Congo
  • Principal Uso: Amiloide.
  • Tiñe
    • Sustancia amiloide  Roja con luz, Verde con luz polarizada
von kossa
Von Kossa
  • Principal Uso: Calcio
  • Tiñe:
    • Calcio  Negro.
naftol as d cloroacetato esterasa
Naftol AS-D cloroacetato esterasa
  • Principal Uso: Mastocitos y Neutrófilos
  • Tiñe:
    • Gránulos de mastocitos y neutrófilos Rojo
orce na cida de pinkus giemsa
Orceína ácida de Pinkus/Giemsa
  • Principal Uso: Fibras elásticas.
  • Tiñe:
    • Fibras elásticas  Pardo oscuro.
slide55

Histopatología es como la espada del augurio

hacen ver más allá de lo evidente