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课程回顾. 影响发酵及微生物生长的因素有哪些 ?. 第七章. 发酵工业中氧的供需. 本章内容. 一、 细胞对氧的需求 ( 为什么要供氧和控制溶氧? 二、 发酵过程中氧的传递 (如何实现供氧和控制溶氧?) 重点 三、 发酵过程耗氧与供氧的动态关系 四、 影响氧传递的因素 重点 五、 摄氧率、溶解氧、 K L a 的测定 难点. 一、微生物对氧的需求. (一)氧在微生物发酵中的作用 (二)可利用氧的特征 (三)微生物的耗氧特征 重点

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Presentation Transcript


  1. 课程回顾 影响发酵及微生物生长的因素有哪些?

  2. 第七章 发酵工业中氧的供需

  3. 本章内容 一、细胞对氧的需求(为什么要供氧和控制溶氧? 二、发酵过程中氧的传递(如何实现供氧和控制溶氧?)重点 三、发酵过程耗氧与供氧的动态关系 四、影响氧传递的因素 重点 五、摄氧率、溶解氧、KLa的测定 难点

  4. 一、微生物对氧的需求 (一)氧在微生物发酵中的作用 (二)可利用氧的特征 (三)微生物的耗氧特征 重点 (四)控制溶解氧的意义

  5. (一)氧在微生物发酵中的作用(对于好气性微生物而言)(一)氧在微生物发酵中的作用(对于好气性微生物而言) 呼吸作用 直接参与一些生物合成反应 大多数微生物必须利用分子态的氧作为呼吸链末端的电子受体,与氢离子结合,同时释放能量,供细胞生长。

  6. (二)可利用氧的特征 氧是难溶性气体,正常状态下氧在水中的溶解度为0.25mol/m3。 只有溶解状态的氧才能被微生物利用。

  7. (1)呼吸强度(比耗氧速率) :单位质量干菌体在单位时间内消耗氧的量。 γ=·x 其中X表示菌体浓度 (三)微生物的耗氧特征1.微生物需氧量的表示方式 单位:mmolO2/(kg干菌体·h)。 (2) 摄氧率γ(耗氧速率):单位体积培养液在单位时间内消耗氧的量。 单位:mmolO2 /(m3·h)

  8. CL<Ccr,大大下降。 • CL> Ccr,保持恒定。 (三)微生物的耗氧特征2.与溶氧浓度CL关系 • (1) Ccr的定义 • 微生物的呼吸强度受发酵液中氧的浓度的影响,各种微生物对发酵液中溶氧浓度有一个最低要求,即不影响呼吸所允许的最低溶氧浓度,称为临界氧浓度,以Ccr表示。

  9. ( )m • k0:亲和常数,k0越大,亲和能力越小, 越小。 (2) 当CL>Ccr时, = (3) 当CL<Ccr时, =

  10. 比生长速率 + - 对数期 延滞期 衰减期 稳定期 菌体浓度 3.培养过程中细胞耗氧的一般规律 衰亡期

  11. Q O 2 3.培养过程中细胞耗氧的一般规律 细菌生长阶段 呼吸强度 菌体浓度 X 摄氧率 γ 延滞期 逐渐升高 初始浓度低 不高 对数生长期 达到最高 不是最高 不是最高 衰减期 比最高稍低 比最高稍低 最高 稳定期 降低 最高 比最高低 衰亡期 很低 很低 很低

  12. 1 微生物本身遗传特征的影响,如k0↑, ↓ • 2 培养基的成分和浓度 • 成分: 主要是碳源种类 • 耗氧速率:油脂或烃类>葡萄糖>蔗糖>乳糖 • 培养基浓度 • 浓度大, ↑。 3 菌龄的影响:一般幼龄菌大。 (三)微生物的耗氧特征4. 影响微生物耗氧的因素

  13. (三)微生物的耗氧特征4. 影响微生物耗氧的因素(续) 4发酵条件的影响 pH值→ 通过酶活来影响耗氧特征; 温 度→ 通过酶活及溶氧来影响耗氧特征;T ↑, 溶氧量 ↓ • 5 代谢类型(发酵类型)的影响 • 若产物通过三羧酸(TCA)循环获取,则 高,耗氧量大。 • 若产物通过糖酵解(EMP)途径获取,则 低,耗氧量小。

  14. 溶解氧浓度对细胞生长和产物合成的影响可能是不同的,所以须了解长菌阶段和代谢产物形成阶段的最适需氧量。 氧传递速率已成为许多好气性发酵产量的限制因素。 目前,在发酵工业上氧的利用率很低,应大大提高设备利用率。 (四)溶解氧控制的意义 返回

  15. 二、发酵过程中氧的传递 (一)供氧的实现形式 (二)发酵过程中氧的传递 1. 氧的传递途径与传质阻力 2. 气体溶解过程的双膜理论重要 3. 氧传递方程

  16. (一) 供氧的实现形式

  17. (二)发酵过程中氧的传递1.氧的传递途径与传质阻力(二)发酵过程中氧的传递1.氧的传递途径与传质阻力 细胞或细胞团表面的液膜阻力1/kLC 液膜传递阻力1/kL 细胞团内的传递阻力1/kA 液相传递阻力1/kLB 反应阻力1/kR 气膜传递阻力1/kG 气液界面传递阻力1/kI 固液界面传递阻力1/kIS 细胞膜、细胞壁阻力1/kW 氧从气泡到细胞的传递过程示意图

  18. 扩散方向 气体主流 气膜 液膜 液体主流 P P* Pi 氧溶解于液相的浓度 氧在空气中的分压 CL C* Ci Pi=HCi P=HC* P*=HCL 2. 气体溶解过程的双模理论 H—亨利常数, 越难溶解, H值越大。

  19. (2) 传质理论 • 传质达到稳态时,总的传质速率与串联的各步传质速率相等,则单位接触界面氧的传递速率为 :

  20. 若改用总传质系数和总推动力,则在稳定状态时,若改用总传质系数和总推动力,则在稳定状态时, KG—以氧分压差为总推动力的总传质系数, kmol/(m2·h· MPa) KL —以氧浓度差为总推动力的总传质系数,m/h P*—与液相中氧浓度C相平衡时氧的分压,MPa C*—与气相中氧分压P达平衡时氧的浓度,kmol/m3

  21. 由式

  22. ,说明这一过程液膜阻力是主要因素。 返回

  23. 3.氧传递方程 在气液传质过程中,通常将KLa作为一项处理,称为体积溶氧系数或体积传质系数。 在单位体积培养液中,氧的传质速率(气液传质的基本方程式)为 返回

  24. OTR—单位体积培养液中氧的传递速率, KLa—以浓度差为推动力的体积溶氧系数, h-1,s-1 KGa—以分压差为推动力的体积溶氧系数,

  25. 三. 发酵过程耗氧与供氧的动态关系 细胞呼吸的本征要求: 氧传递特征(发酵罐传递性能) 若需氧量>供氧量,则生产能力受设备限制,需进一步提高传递能力; 若需氧量<供氧量,则生产能力受微生物限制,需筛选高产菌:呼吸强,生长快,代谢旺盛。 供氧与耗氧至少必须平衡,此时可用下式表示: 传递 消耗

  26. 变换 令 则

  27. 无因次数Da为Damköhler 准数,物理意义是细胞的 • 最大耗氧量与最大供氧量之比。 • 当Da<1时,细胞的耗氧量<最大供氧量,存在耗 • 氧限制,整个过程受呼吸速率控制; • 当Da>1时,细胞的耗氧量>最大供氧量,存在供 • 氧限制,整个过程受氧传递速率控制。 • 对于一个给定的发酵设备和微生物,C*、k0、(QO2)m • 已知,假定呼吸只与氧的限制有关,则,

  28. 稳态过程中,在KLa一定时,细胞浓度对呼吸强度的影响稳态过程中,在KLa一定时,细胞浓度对呼吸强度的影响

  29. 在发酵过程中,OTR和γ平衡非常短暂,然后又打破,又平衡。在发酵过程中,OTR和γ平衡非常短暂,然后又打破,又平衡。 • 对于一个培养物来说,最低的通气条件可由式 • 求得。 • kLa亦可称为“通气效率”, 可用来衡量发酵罐的通 • 气状况,高值表示通气条件富裕,低值表示通气条 • 件贫乏。

  30. 在发酵过程中,培养液内某瞬间溶氧浓度变化可用下式表示:在发酵过程中,培养液内某瞬间溶氧浓度变化可用下式表示: 在稳态时,则 ,则

  31. 影响氧传递的因素 (一)影响氧传递的因素 • 由气液传递速率方程 可知,影响氧传递速率的因素(即影响供氧的因素)有: 1. 影响推动力C*-CL的因素  影响比表面积a的因素 影响液膜传递系数kL的因素 2. kLa的影响因素

  32. 1. 影响推动力C*-CL的因素1)温度 氧在水中的溶解度随温度的升高而降低,在1.01×105Pa和温度在4~33℃的范围内,与空气平衡的纯水中,氧的浓度可由以下经验公式计算: t—温度,℃ T ↑ ,Cw* ↓,推动力↓

  33. 2)溶质 电解质(盐析作用使氧的饱和溶解度降低,推动力下降) 1)对于单一电解质 Ce*—氧在电解质溶液中的溶解度,mol/m3 Cw*—氧在纯水中的溶解度, mol/m3 CE—电解质溶液的浓度,kmol/m3 K—Sechenov常数,随气体种类,电解质种类和温度变化.

  34. 2)溶质(续) 2)对于几种电解质的混合溶液: 式中 hi—第i种离子的常数, m3/kmol 离子强度, kmol/m3 Zi—第i种离子的价数, —第i种离子的浓度, kmol/m3

  35. 2) 溶质(续) B.非电解质 式中 Cn*—氧在非电解质溶液中的溶解度, mol/m3 CN—非电解质或有机物浓度,kg/m3 k—非电解质的Sechenov常数, m3/kg

  36. 2) 溶质 C.混合溶液(电解质+非电解质):叠加 Cm*—氧在混合溶液中的溶解度,mol/m3 溶质↑ Cm*↓

  37. 3) 溶剂 通常溶剂为水; 氧在一些有机化合物中溶解度比水中高,可以通过添加有机溶剂来降低水的极性从而增加溶解氧的浓度

  38. 4) 氧分压 提高空气总压(增加罐压),从而提高了氧分压,对应的溶解度也提高,但增加罐压是有一定限度的。 保持空气总压不变,提高氧分压,即改变空气中氧的组分浓度,如:进行富氧通气等。

  39. 影响KLa的因素 发酵罐的形状,结构(几何参数) 搅拌器,空气分布器(几何参数) 通气:表观线速度Ws ② 操作条件搅拌:转速N,搅拌功率PG 发酵液体积V,液柱高度HL ③发酵液的性质:如影响发酵液性质的表面活性剂、离子 强度、菌体量 ①设备参数

  40. KLa的准数关联式 • 综合①②③三类影响因素,有 • 其中d—搅拌器直径,m ; Ν—搅拌器转速,s-1 ; • Ws— 表观线速度,m/s ; DL—扩散系数, m2/s ; • —液体粘度,Pa·s ; ρ—液体密度,kg/m3; • σ—界面张力,N/m; • g—重力加速度, 9.81m/s2

  41. 写成准数式(无因次式) = 准数

  42. =气流准数 准数

  43. KLa影响因素的分析依据 : 以小型罐中牛顿型流体测定的结果为例: 合并化简得: =0.06 KLa=0.06

  44. 在PG的计算中要满足下列条件: • ①P的计算与Rem值有关: • Rem﹤10 x=-1层流 • Rem﹥104 x=0 湍流

  45. 操作条件的影响A. 搅拌对KLa的影响 搅拌作用(影响KLa原理) 将通入培养液的空气分散成细小的气泡,防止小气泡的凝聚,从而增大气液相的接触面积,即a↑→KLa↑→溶氧↑ 搅拌产生涡流,延长气泡在液体中的停留时间,溶氧↑ 搅拌造成湍流,减小气泡外滞流液膜的厚度,从而减小传递过程的阻力,即1/KL↓→KL↑→KLa↑→溶氧↑ 搅拌使菌体分散,避免结团,有利于固液传递中接 触面积的增加,使推动力均一;同时,也减少菌体 表面液膜的厚度,有利于氧的传递。

  46. 搅拌对KLa的影响(续) N(搅拌转速)并不是越大越好 剪切力↑, 对细胞损伤↑,对形态破坏↑ 发酵期间搅拌热↑,增加传热负荷 N↑

  47. B. 通气对KLa的影响: 在通气量Q较低时, Q↑→Ws↑→ KLa↑

  48. C. 通气、搅拌的关联对KLa的影响 PG↑, Ws↑, KLa↑, 但Ws的增加是有上限的, 当Ws>(Ws)m, Ws会通过 、 来影响PG,导致PG严重下降. ∴Ws>(Ws)m, PG ↓,KLa↓ Rem=

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