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  1. FAMILIA Enterobacteriaceae

  2. CARACTERÍSTICAS • BACILOS RECTOS, 0,4-0,6 X 2-3 µm, GRAM NEGATIVOS • NO ESPORULADOS, ANAEROBIOS FACULTATIVOS, MÓVILES O INMÓ-VILES • FERMENTAN GLUCOSA, CATALASA POSITIVOS, OXIDASA NEGATIVOS

  3. MORFOLOGÍA Y TINCIÓN

  4. HÁBITAT • AGUA, TIERRA, PLANTAS, TRACTO G.I. HOMBRE Y ANIMALES • PRESENCIA EN AGUA INDICA CONTAMINACIÓN FECAL • UBICUAS (Klebsiella) O DE DISTRIBUCIÓN LIMITIDA (Salmonella typhi)

  5. TAXONOMÍA • SECCIÓN 5, 2da EDICIÓN BERGEY • 41 GÉNEROS Y CIENTOS DE ESPECIES • CLASIFICACIÓN POR CRITERIOS BIOQUÍMICOS Y ANTIGÉNICOS • ACTUALMENTE CRITERIOS GENÉTICOS: HIBRIDACIÓN ADN, SECUENCIACIÓN ADN Y ARNr 16S

  6. PODER PATÓGENO • ALREDEDOR DE 28 ESPECIES TIENEN IMPORTANCIA CLÍNICA • CAUSANTES DE DIVERSOS CUADROS CLÍNICOS • PATÓGENAS VERDADERAS O PRIMARIAS • PATÓGENAS OPORTUNISTAS O POTENCIALES

  7. PODER PATÓGENO • FACTORES DE VIRULENCIA: ADHE-SINAS, EXOTOXINAS, ENDOTOXI-NAS, SIDERÓFOROS, ANTÍGENOS O-K, PROTEÍNAS DE MEMBRANA EXTERNA • GENES DE VIRULENCIA: CROMOSO-MA, PLÁSMIDOS O PROFAGOS • ISLAS DE PATOGENICIDAD

  8. AISLAMIENTO E IDENTIFICACIÓN • MEDIOS NO ENRIQUECIDOS • MEDIOS SELECTIVOS/DIFEREN-CIALES • INHIBEN CRECIMIENTO DE GRAM POSITIVAS Y OTRAS GRAM NEGATIVAS NO ENTÉRICAS • CITRATO SÓDICO, EOSINA, SALES BILIARES, CRISTAL VIOLETA, etc.

  9. MEDIO McCONKEY

  10. AISLAMIENTO E IDENTIFICACIÓN • MUESTRAS DE ÁREAS ESTÉRILES: MEDIOS ENRIQUECIDOS • AGAR McCONKEY: LACTOSA + (Escherichia, Klebsiella, Enterobac-ter) Y LACTOSA – (Salmonella, Proteus, Shigella, etc.) • MUESTRAS INTESTINALES: SELEC-TIVOS/DIFERENCIALES, ENRIQUE-CIMIENTO PREVIO

  11. AISLAMIENTO E IDENTIFICACIÓN • PRUEBAS BIOQUÍMICAS: IMVIC • INDOL, ROJO DE METILO, VOGES-PROSKAUER, CITRATO • SISTEMAS COMERCIALES DE IDEN-TIFICACIÓN BIOQUÍMICA

  12. IDENTIFICACIÓN BIOQUÍMICA

  13. TIPIFICACIÓN • PARA PODER PATÓGENO YESTUDIOS EPIDEMIOLÓGICOS • BIOTIPIFICACIÓN: CARACTERES BIOQUÍMICOS • SEROTIPIFICACIÓN: ANTÍGENOS O (SOMÁTICOS), K ó Vi (CAPSULA-RES) Y H (FLAGELARES) • SEROGRUPOS Y SEROTIPOS

  14. ANTÍGENOS

  15. TIPIFICACIÓN • FAGOTIPIFICACIÓN: DE VALOR EN Salmonella Y E. coli • ANTIBIOTIPIFICACIÓN: PATRÓN DE SUSCEPTIBILIAD A ANTIBIÓTI-COS • VIROTIPIFICACIÓN: DETECTAR GENES DE VIRULENCIA • GENOTIPIFICACIÓN MOLECULAR: GRUPOS CLONALES, etc.

  16. GÉNERO Escherichia

  17. INTRODUCCIÓN • ESPECIE TIPO: E. coli • ANTÍGENO O: PARTE DEL LPS (TERMOESTABLE -121ºC 2 hs) • ANTÍGENO K: POLISACÁRIDO CAPSULAR (K I y II) • FLAGELARES H: PROTEÍNAS • FÓRMULA ANTIGÉNICA: O:K:H

  18. PATOGENICIDAD • CEPAS PATÓGENAS: INTESTINALES Y EXTRAINTESTINALES • DIARREAS EN NEONATOS • VIRULENCIA: FENÓMENO MULTI-FACTORIAL • CORRESPONDENCIA ENTRE ALGU-NOS FACTORES Y SEROTIPOS

  19. PODER PATÓGENO • ADHESINAS: FIMBRIAS O PILI • ADHESINAS MANOSA SENSIBLES (FIMBRIAS TIPO I) (HAMS) • ADHESINAS MANOSA RESISTEN-TES (HAMR) • ENTEROTOXINAS Y TOXINAS • PATÓGENOS EN ALGUNAS ESPECIES Y COMENSALES EN OTRAS (EJ. O157:H7)

  20. FACTORES DE VIRULENCIA

  21. GRUPOS PATOGÉNICOS • ECEP: ENTEROPATOGÉNICAS • ECET: ENTEROTOXIGÉNICAS • ECEI: ENTEROINVASIVAS • ECVT ó ECEH: VEROTOXIGÉNICAS O ENTEROHEMORRÁGICAS • ECEA: ENTEROAGREGATIVAS • ECAD: ADHERENCIA DIFUSA • UROPATOGÉNAS Y SEPTICÉMICAS

  22. ECEP • HUMANOS, CONEJOS, PERROS • CUADRO DE ADHESIÓN Y BORRADO DEL ENTEROCITO • POSEEN ADHESINAS, ISLA DE PATOGENICIDAD (LOCUS LEE) • CAUSANTES DE DIARREAS

  23. ECET • HUMANOS, PORCINOS, BOVINOS OVINOS, PERROS • POSEEN ADHESINAS FIMBRIALES Y ENTEROTOXINAS • CEPAS PORCINAS: TOXINAS LT, ST Y ADHESINAS K88, P987, F41 • CEPAS BOVINAS: TOXINA ST Y F41 • ESPECIFIDAD DE HOSPEDADOR

  24. FIMBRIAS

  25. ENTEROTOXINA ST • PM:5.000; NO ANTIGÉNICA • ACCIÓN: GUANILATO CICLASA • DURACIÓN:CORTA • EFECTO: ELEVA cGMP, SUPRIME ABSORCIÓN DE Cl-, PÉRDIDA DE Na+, H2O Y HCO3- AL LUMEN

  26. ENTEROTOXINA LT • PM:85.000; ANTIGÉNICA • ACCIÓN: ADENILATO CICLASA • DURACIÓN:MAYOR QUE ST • EFECTO: ELEVA cAMP, SUPRIME ABSORCIÓN DE Cl-, PÉRDIDA DE Na+, H2O Y HCO3- AL LUMEN

  27. ECET Adherencia Transporte y acción de enterotoxinas

  28. ECVT • COLITIS HEMORRÁGICA Y SÍNDROME URÉMICO HEMOLÍTICO EN HUMANOS (O157:H7) • RUMIANTES: RESERVORIOS • COLONIZACIÓN DE MUCOSA IN-TESTINAL (10% BOVINOS)

  29. ECVT • VT1-2: DESTRUYEN CÉLULAS VERO • COLITIS HEMORRÁGICAS TERNEROS • “BORRADO” (effacement) DEL ENTEROCITO • LOCUS CROMOSÓMICO LEE • ENTEROHEMOLISINA Y FIMBRIA

  30. ECVT Adherencia íntima Condensación de actina Borrado de vellosidades Transporte toxina tipo Shiga

  31. UROPATOGÉNICAS Y SEPTICÉMICAS • SIDERÓFORO AEROBACTINA • FACTORES DE RESISTENCIA AL SUERO Y FAGOCITOSIS • ADHESINAS FIMBRIALES (P) Y AFIMBRIALES (CS31A) • FACTOR NECROSANTE CITOTÓXICO (CNF)

  32. UROPATOGÉNICAS Y SEPTICÉMICAS • ITU Y SEPTICEMIAS EN PERROS Y GATOS • SEPTICEMIA NEONATAL EN RUMIANTES Y PORCINOS • INFECCIONES RESPIRATORIAS Y SEPTICEMIAS EN AVES

  33. DIAGNÓSTICO • ORIGEN DE LA MUESTRA • MEDIOS SELECTIVOS/DIFEREN-CIALES (McCONKEY, EMB, etc,) • ÁREAS EXTRAINTESTINALES: AGAR SANGRE, UROCULTIVO, etc. • BIOTIPIFICACIÓN • ENTÉRICAS: DIFERENCIACIÓN DE CEPAS PATÓGENAS

  34. DIAGNÓSTICO • CULTIVO MF: DETECCIÓN CEPAS FIMBRIADAS (IF, AGLUTINA-CIÓN) y/o ENTEROTOXINAS (MÉTODOS BIOLÓGICOS, ELISA) • POSTMORTEM: RECUENTO DE COLONIAS EN YEYUNO (>106), IDENTIFICACIÓN POR IFD

  35. DIAGNÓSTICO • DEMOSTRACIÓN GENES QUE CODIFICAN PARA TOXINAS (PCR Ó SONDAS DE ADN) PARA VTEC SIMILAR A ENTÉRICAS